基因技术专题1
专题一:RNA干扰技术(RNAi)1995年,康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现,反义和正义RNA都阻断了基因的表达,他们对这个结果百思不得其解。直到1998年, Andrew Fire的研究证明,在正义RNA也阻断了基因表达的试验中,真正起作用的是双链RNA。这些双链RNA是体外转录正义RNA时生成的。这种双链RNA对基因表达的阻断作用被称为RNA干预(RNA interference,RNAi)。随后的研究中发现,RNAi现象广泛存在于线虫,果蝇,斑马鱼,真菌以及植物等生物体内,这些生物体利用RNAi来抵御病毒的感染,阻断转座子的作用。RNAi能高效特异的阻断基因的表达,在线虫,果蝇体内,RNAi能达到基因敲除的效果。在小鼠和人的体外培养细胞中利用RNAi技术也成功阻断了基因的表达,实现了细胞水平的基因敲除。近几年来RNAi的研究取得了很大进展,它被《Science》杂志评为2001年的十大......阅读全文
细胞技术专题:大鼠肝星状细胞培养实验
实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC,通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
DNA重组(DNA-recombination)技术:外源基因的蛋白表达1
通过外源DNA的重组、克隆、以及鉴定,可以获得所需的特异DNA克隆。外源克隆基因在某种表达载体及适宜的宿主细胞中可表达为相应的蛋白质,这就组成了外源基因的蛋白表达系统。表达后的蛋白质必须具有原来的生物学活性,这是基于正确的基因转录、转录后加工、mRNA翻译及翻译后修饰,同时与表达载体的结构和表达体系
细胞代谢信号通路相关的基因介绍UGT1A1基因
这个基因编码一个UDP葡萄糖醛酸基转移酶,一种葡萄糖醛酸化途径的酶,能将小的亲脂性分子,如类固醇、胆红素、激素和药物,转化为水溶性、可排泄的代谢物。这个基因是一个复杂基因座的一部分,编码几个UDP葡萄糖醛酸转移酶。该位点包括13个唯一的交替第一外显子,随后是4个常见外显子。四个交替的第一外显子被认为
生产过程与质量控制技术专题论坛召开
分析测试百科网讯 今年以来,药品质量安全事件频发。4月,河南省林州市亚神制药有限公司生产的葡萄糖酸钙注射液(批号:14102421)在云南省出现不良事件,个别患者用药后出现“寒战、发热”症状。经云南省文山州食品药品检验所检验,该批次药品“可见异物”项目不符合规定。同一时间段,江苏苏中药业
粮食质量安全检验技术专题讲座在长春召开
为配合粮食质量安全整治活动的开展,提高粮食行业质量安全管理水平和粮食质量与原粮卫生的检验能力,9月22日至23日,国家粮食局标准质量中心在长春主持召开了粮食质量安全检验技术专题讲座,国内外10余位专家介绍了最新的粮食真菌毒素、农药残留、重金属、食品添加剂和稻谷、小麦品质检验技术和仪器设备,来自全国省
PerkinElmer-BCEIA-2013专题前沿技术交流会
2013年10月23日,Perkinelmer携最新创新成果和技术,于BCEIA 2013期间举行了专题交流会,此次会议上来自珀金埃尔默仪器有限公司的色谱、质谱以及红外、材料表征的专家老师为大家展示了公司的新技术以及新产品。会议现场气氛非常热烈,来参会的各位专家老师均表示了浓厚的兴趣。
战略院召开技术预测工作专题研讨会
5月9日下午,战略院召开技术预测工作专题研讨会,邀请了来自俄罗斯高等经济学院的Alexander Sokolov做了主题为“俄罗斯的科学和技术预测”的学术报告,就世界科技发展大趋势、俄罗斯技术预见的进程、俄罗斯高等经济学院的技术预见工作、技术预见在俄罗斯国家创新体系中的作用、对战略规划的支持、技
细胞技术专题:原代胚胎成纤维细胞培养
实验器材手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。实验试剂无Ca2+和Mg2+的 PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM
关注食品快检-CFAS-2020快速检测技术专题召开
分析测试百科网讯 2020年9月22-23日,“第九届中国食品与农产品安全检测技术与质量控制国际论坛(简称 CFAS 2020)”在江苏南京召开。大会第二日围绕农兽药残留检测、快速检测、重金属及元素检测等食品安全话题展开交流。快速检测技术专题论坛邀请了暨南大学石磊教授、国家饲料质量监督检验中心(
细胞技术专题:大鼠肝星状细胞原代培养实验
大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法 实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 实验材料SD大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠
细胞技术专题:大鼠星型胶质细胞培养实验
大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。 实验方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 实验材料大鼠胚胎 试剂、试剂盒L-15培养基 胶原酶 Dnase D-MEM-B
转基因抗虫杂交棉品种的配套栽培技术1
转基因抗虫杂交棉品种的配套栽培技术1来源:种子世界 类别:技术文章 更新时间:2008-9-9 15:41:15 阅读4次韩梅邹芳刚(江苏省农林厅)转基因抗虫杂交棉棉苗生长快,横向生长优势强,营养生长和生殖生长优势明显,干物质积累多,抗虫性强。单铃籽棉重,皮棉产量高。其高产栽培的关键是促进生长中心及
antpedia专题汇总
安捷伦科技食品安全专题DART-MS实时直接分析质谱离子源博纳艾杰尔科技《中国药典》2010版应用文集MassWorks每台质谱都值得拥有Analytica China 2010 赛默飞世尔科技.实验室综合解决方案2010年全国质谱大会暨第三届世界华人质谱研讨会 第十三届全国离子色谱学
液体活检专题
近十年来,液体活检研究热度不断攀升,多个国家以及地区的研究纷纷投入其中。 一、传统肿瘤检查之“痛”如果某人不幸确诊患上恶性肿瘤,似乎将面临无尽的“痛苦”和“危险”。除了各种治疗方法要“折磨”他的身体,各种定期检查、药物疗效评估方法也给病人带来了巨大的“痛苦”。整个肿瘤诊疗过程,从筛选到初步诊断,到手
Nature专题:肾癌
肾癌(carcinoma of kidney)又称肾细胞癌,这种疾病无论体积大小,约80%的患者早期可无任何症状,只是在普查和因其他原因作体格检查或B超检查时才被发现其肾脏有占位病变或触摸到腹部包块,因此经常容易被人忽略。 但这种状况近期开始发生好转,研究人员从这种疾病的周遭挖掘到了一些答案,
RFLP技术和RAPD技术1
第一节 概 述DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切
基因的翻译表达1
1体外TNTRT7 转录/翻译系统表达重组基因体外翻译是研究基因表达、基因调控的一类重要技术,该技术可广泛用于基因表达量、启动序列等调控因子的确立,并结合PTT实验筛选天然突变或人工诱变的基因片段,还可用来进行蛋白和DNA结合方面的研究。早期的体外翻译研究大多是提取mRNA然后通过网织红细胞或麦胚系
目的基因的获取1
基因工程的主要目的是使优良性状相关的基因聚集在同一生物体中,创造出具有高度应用价值的新物种。为此必须从现有生物群中,根据需要分离出用于克隆的此类基因。这类基因称之为目的基因,即准备要分离、改造、扩增或表达的基因。目前目的基因的获取方法主要有以下2类:(1)已知基因的获得:PCR分离法和化学合成法等(
UGT1A1基因的结构和作用
这个基因编码一个UDP葡萄糖醛酸基转移酶,一种葡萄糖醛酸化途径的酶,能将小的亲脂性分子,如类固醇、胆红素、激素和药物,转化为水溶性、可排泄的代谢物。这个基因是一个复杂基因座的一部分,编码几个UDP葡萄糖醛酸转移酶。该位点包括13个唯一的交替第一外显子,随后是4个常见外显子。四个交替的第一外显子被认为
蛋白质技术专题:蛋白等电聚焦凝胶电泳技术(二)
1) 若产生模糊条带则证明聚焦不完全,这可能是由于电泳中的问题或大分子蛋白质限制了其在凝胶中的迁移能力。若聚焦时间过长或过短,条带的分辨率会下降。增加电压梯度可以使带形更加锐利。高分子量蛋白质在琼脂糖凝胶中可以聚焦的更好。 2) 产生歪斜的条带通常由于不正确的pH梯度,检查电极是否洁净,是
蛋白质技术专题:蛋白等电聚焦凝胶电泳技术(二)
8.常见问题及解释1) 若产生模糊条带则证明聚焦不完全,这可能是由于电泳中的问题或大分子蛋白质限制了其在凝胶中的迁移能力。若聚焦时间过长或过短,条带的分辨率会下降。增加电压梯度可以使带形更加锐利。高分子量蛋白质在琼脂糖凝胶中可以聚焦的更好。2) 产生歪斜的条带通常由于不正确的pH梯度,检查电极是否洁
蛋白质技术专题:蛋白等电聚焦凝胶电泳技术(一)
等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场
细胞代谢信号通路相关的基因介绍CYP1B1基因
该基因编码细胞色素p450酶超家族的一个成员。细胞色素p450蛋白是一种单加氧酶,催化药物代谢和胆固醇、类固醇等脂类的合成。该基因编码的酶定位于内质网,代谢前致癌物,如多环芳烃和17β-雌二醇。这种基因的突变与原发性先天性青光眼有关,因此人们认为这种酶也代谢了一种参与眼睛发育的信号分子,可能是类固醇
动物实验技术1
实验动物常用作病原微生物的分离和鉴定,进行动物接种实验应选择易感性高、健康的动物。常用的动物有小鼠、豚鼠和家兔。根据实验要求可通过皮下、皮内、肌肉、腹腔、静脉等途径注射。感染动物死亡后,必要时进行尸体解剖并作病原体的检查。 一、实验动物接种法 (一)小白鼠接种法 【
RAPD分析技术1
1 导论聚合酶链式反应(PCR)以其优越性极大地影响到了分子生物学的几乎所有领域,并以其基本程序和DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis),开发出多种检测核苷酸变异的方法。 RAPD(Random Amplifed Polymorphic D
分子杂交技术--1
互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。 杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方
cDNA合成技术1
Promega公司的RibocloneR M-MLV(H- ) cDNA合成系统采用M-MLV反转录酶的RNase H缺失突变株取代AMV反转录酶,使合成的cDNA更长。该系统的第一链合成使用M-MLV反转录酶,cDNA第二链合成采用置换合成法,采用 RNaseH和DNA聚合酶Ⅰ进行置换合成
细胞化学技术1
细胞化学技术(cytochemistry)是在保持细胞结构完整的条件下,通过细胞化学反应研究细胞内各种成分(主要是生物大分子)的分布情况以及这些成分在细胞活动过程中的动态变化的技术,可以通俗地说,这类技术让人们在显微镜下看到细胞内大分子的位置。这类技术包括光镜和电镜水平的酶细胞化学技术、免疫细胞化学
动物实验技术1
实验动物常用作病原微生物的分离和鉴定,进行动物接种实验应选择易感性高、健康的动物。常用的动物有小鼠、豚鼠和家兔。根据实验要求可通过皮下、皮内、肌肉、腹腔、静脉等途径注射。感染动物死亡后,必要时进行尸体解剖并作病原体的检查。一、实验动物接种法(一)小白鼠接种法【材料】1.小白鼠。2.无菌注射器(1ml
Southern-杂交技术1
Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定DNA序列的定位,可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。用一种或多种限制性内切酶对基因组DNA加以切割,通过琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段,随后,使DNA在原位变性,并从凝胶转移至固相膜