关于RNA酶保护试验的个人体会
RNA酶保护试验实际上是很早就出现的技术。在1982年出版的第一版圣经（分子克隆）还没有提到。在1989年出版的第二版中已经出现：7.71 Mapping of RNA with Ribonuclease and Radiolabeled RNA(可参见中译本P383-387）。在2001年出版的第三版中的第七章用了大量的篇幅介绍这一技术，可参见科学出版社的第三版中译本P567-577，其中有RNA酶保护试验的用途、优缺点、所用试剂、操作程序等。根据实验的经历，我感觉到这个方法的的主要缺点如下：1.这个实验的前提是你必须首先要把要研究的基因克隆于一个载体，要清楚插入片段的方向，该载体插入片段两侧有T3、T7或SP6的启动子位点。载体先要用合适的内切酶线性化，选择正确的体外转录试剂盒，转录出要研究的mRNA 的互补链，再纯化。总之RNA探针的制备够麻烦。2.核酸酶消化时，酶量的控制困难，容易消化过头，X片上什么都没有。3.要用放射......阅读全文
关于血球维修的一些体会（三）
近两个星期有两个工程师询问了相同的问题，我给出了相同的处理方案处理的结果是不同的，第一位是资深工程师经验丰富的费工，第二位是刚入道不久的工程师。 故障是这样的，ABX M60，PLT本地高（第一位的数值是90且稳定， 第二位数值是700，不稳定，有正常的时候。两者血小板图形都很低且很尖
关于血球维修的一些体会（一）
经过了几年的血球维修，逐步摸索了一套不成熟的认识，写出来请大家批评指正。一、血球的类型1、血球在界标类型方面分为固定界标和浮动界标。2、在采样方面分为自动进样和手工进样还有半自动进样，所谓半自动就是像HCYEL，CD1200，ABX M60 CT，等等这样的有个进样拖架 ，需要把样品试管方到
关于血球维修的一些体会（二）
4）废液排除不干净，像东亚，丹能，雅培等设备都有一个或者几个废液池，先用负压把计数池和冲洗后的废液吸到这里，然后等待正压的到来排出机器外。计数池的废液不能排出干净，那么就要考虑负压问题和计数池的密封和泄漏，废液池不能排出干净就要考虑正压，两者都不能排出干净就都要考虑，检查的重点首先就是废
关于硬膜外两种穿刺方法的体会
硬膜外穿刺是麻醉医生临床工作上必不可少的操作技能之一，由于属于盲穿，所以就更需要麻醉医生丰富的临床经验。而在硬膜外穿刺的方法中，主要有两种穿刺方法，分别是直入法和侧入法。那么，这两种方法有什么区别，对于实际上硬膜外穿刺到底哪种方法好呢？ 下面就本人从事麻醉多年经验，就两种方法提出自己的看法和总结
提质粒后有RNA污染，可以加点RNA酶处理吗
实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒，转染细胞没问题。我觉得只要是注意以下2点就可以了：1，注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染，收集菌体沉淀时防止菌液散落，经常用75%的乙醇擦拭手套。2，最后洗脱时最好使用无内毒素的水，我们是用注射用水的。无论是小提还是大提我们都是用的日常型
用T4－RNA－连接酶连接－RNA－分子
实验材料 T4RNA连接酶 供体RNA 受体RNA 试剂、试剂盒 10XT4RNA连接酶缓冲液
提取质粒还没加Rna酶为何电泳中不见Rna
一般来说，提取质粒所用的试剂盒已经加入了RNase，所以电泳跑胶不会出现RNA条带。即使是采用的人工方法提取，也不可避免的空气中，汗液，唾液等中丰富的RNase的降解。此外，按照你的问题来看，你应该是再提取质粒，提取质粒然后电泳渴望观察到RNA的条带，殊不知质粒分子一般较大，其所用的琼脂糖胶浓度一般
用T4－RNA－连接酶连接－RNA－分子
实验材料 T4RNA连接酶供体RNA受体RNA试剂、试剂盒 10XT4RNA连接酶缓冲液无核酸酶的水FEGRNA酶抑制剂实验步骤 一材料与设备1)10XT4RNA 连接酶缓冲液：50 mmol/LTris (pH7,8)，l0 mmol/L MgCl2，5 mmol/LDTT,1 mmol/L AT
DNA酶保护分析的方法用途
中文名称DNA酶保护分析英文名称DNase protection assay定 义主要用来检测染色质结构与功能状态的方法。当染色质结构致密，DNA被组蛋白压缩很紧时，基因是不表达的，同时也对DNA酶不敏感。反之，结构蓬松、活跃进行基因表达的染色质，则易遭DNA酶的降解。应用学科生物化学与分子生物学
关于凝固酶试验的基本信息介绍
凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶，一种是与细胞壁结合的凝聚因子，称结合凝固酶，它直接作用于血浆中纤维蛋白原，使发生沉淀，包围于细菌外面而凝聚成块，玻片法阳性结果是由此凝聚因子所致；另一种凝固酶是分泌至菌体外，称为游离凝固酶，它能使凝血酶原变成凝血酶类产物，
关于硷性磷酸酶试验的基本介绍
硷性磷酸酶试验是检验精斑的一种预试验。精液中含有大量酸性磷酸酶，而其他体液分泌液中含量很少。酸性磷酸酶在适当温度和酸性溶液中，能使磷酸苯二钠分解，产生萘酚，萘酚经铁氰化钾作用与氨基安替比林结合，产生红色醌类化合物。检材若为精液，滴加试剂后立即出现浅红色至深红色反应，颜色深浅因精斑浓度而异，若浓度
关于凝结酶实验的试验方法介绍
一、玻片法 1、取生理盐水两滴，分别置于洁净载玻片的两端。 2、 以灭菌接种环分别取金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌培养物少许，分别与玻片上的生理盐水制成均匀的细菌悬液，观察有无自凝现象。 3、于每滴细菌悬液内加入兔血浆各一滴，混匀。如出现颗粒状凝集现象即为阳性。如不立即发生凝集，可稍待一，二
关于凝结酶实验的试验方法原理
致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶。一种是结合凝固酶，结合在细胞壁上，使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白而附着于细菌表面，发生凝集：可用玻片法测出。另一种是分泌至菌体外的游离凝固酶。作用类似凝血酶原物质，可被血浆中的协同因子激活变为凝血酶样物质，而使纤维蛋白原变成纤维蛋白，从而使血浆凝固，可用试管法测
关于凝固酶试验的检查过程介绍
凝固酶试验： 1、方法: (1) 玻片法：在一张洁净玻片中央加1滴生理盐水，用接种环取待检培养物与其混合(设阳性和阴性对照)制成菌悬液，若经10-20s内无自凝现象发生，则加入人或兔新鲜血浆1环，与菌悬液混合，观察结果。 (2) 试管法：于试管内加1：4稀释的兔或人血浆0.5ml，再加1-
RNA聚合酶的基本信息
RNA聚合酶（RNA polymerase）是以一条DNA链或RNA为模板，三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶，因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关，所以也称转录酶。
芽孢杆菌RNA酶的基本信息
中文名称芽孢杆菌RNA酶英文名称barnase定 义芽孢杆菌合成的一种细胞外RNA酶，催化水解RNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
线粒体RNA加工酶的基本信息
中文名称线粒体RNA加工酶英文名称mitochondrial RNA processing enzyme;MRP RNase定 义一类存在于线粒体的酶，催化各种线粒体RNA前体加工，使之转变为成熟的RNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
芽孢杆菌RNA酶的基本信息
中文名称芽孢杆菌RNA酶英文名称barnase定 义芽孢杆菌合成的一种细胞外RNA酶，催化水解RNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子
RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量(kD)功能TBP30与TATA盒结合TFⅡ-B33介导RNA聚合酶Ⅱ的结合TFⅡ-F30,74解旋酶TFⅡ-E34,37ATP酶TFⅡ-H62,89解旋酶TFⅡ-A12,19,35稳定TFⅡ-D的结合TFⅡ-I120促进TFⅡ-D的结合
RNA聚合酶的基本信息
RNA聚合酶（RNA polymerase）是以一条DNA链或RNA为模板，三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶，因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关，所以也称转录酶。
RNA聚合酶的基本信息
RNA聚合酶（RNA polymerase）是以一条DNA链或RNA为模板，三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶，因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关，所以也称转录酶。
RNA聚合酶的分类相关介绍
通常可根据生物的类别，将RNA聚合酶分为原核生物RNA聚合酶、真核生物RNA聚合酶。 原核生物和真核生物的RNA聚合酶有共同特点，但在结构、组成和性质等方面又不尽相同。 （1）原核生物RNA聚合酶 研究得最清楚的是大肠杆菌RNA聚合酶。该酶是由五种亚基组成的六聚体（α2ββ'ωσ）分
线粒体RNA加工酶的基本信息
中文名称线粒体RNA加工酶英文名称mitochondrial RNA processing enzyme;MRP RNase定 义一类存在于线粒体的酶，催化各种线粒体RNA前体加工，使之转变为成熟的RNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子
RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量（kD）功能TBP30与TATA盒结合TFⅡ-B33介导RNA聚合酶Ⅱ的结合TFⅡ-F30,74解旋酶TFⅡ-E34,37ATP酶TFⅡ-H62,89解旋酶TFⅡ-A12,19,35稳定TFⅡ-D的结合TFⅡ-I120促进TFⅡ-D的结合
RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子
RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子转录因子分子量(kD)功能TBP30与TATA盒结合TFⅡ-B33介导RNA聚合酶Ⅱ的结合TFⅡ-F30,74解旋酶TFⅡ-E34,37ATP酶TFⅡ-H62,89解旋酶TFⅡ-A12,19,35稳定TFⅡ-D的结合TFⅡ-I120促进TFⅡ-D的结合
RNA聚合酶的基本信息
RNA聚合酶（RNA polymerase）是以一条DNA链或RNA为模板，三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶，因为在细胞内与基因DNA的遗传信息转录为RNA有关，所以也称转录酶。
关于转运RNA的简介
转运RNA（Transfer RNA），又称传送核糖核酸、转移核糖核酸，通常简称为tRNA，是一种由76-90个核苷酸所组成的RNA，其3'端可以在氨酰-tRNA合成酶催化之下，接附特定种类的氨基酸。转译的过程中，tRNA可借由自身的反密码子识别mRNA上的密码子，将该密码子对应的氨基酸
关于RNA沉默的简介
基因沉默是指在真核生物（植物、动物、真菌）中保守的由双链RNA诱导的鉴定和破坏其细胞质中异常变异或过表达的RNA的一种机制。 RNA 沉默(RNA silencing)或基因沉默(gene silencing)是广泛存在于植物、动物、线虫和真菌等真核生中的一种高度保守的、序列特异的 RNA 降
关于RNA剪接的简介
大多数脊椎动物基因的编码序列,无论是编码多肽的基因还是编码除mRNA以外的RNA分子的基因,都是由非编码的间隔序列(内含子)分隔为各个外显子部分。这些基因的外显子和内含子都转录在一条初级RNA转录分子中,接下来,此初级RNA转录分子要经过RNA剪接,此过程包括一系列的加工反应：RNA的内含子部分
关于卫星RNA的简介
卫星RNA是一类小的非编码RNA,基因组大小为200-1500nt,通常不编码蛋白,完全依赖于辅助病毒来完成复制、包被、移动和传播,且和其辅助病毒的基因组不存在序列同源性。部分卫星RNA可以影响辅助病毒在寄主植物上诱发的症状,多数为减轻,少数会加重寄主症状。传统理论认为卫星RNA是通过与辅助病毒