我国研究人员开发了蛋白质瞬时原位激活新技术
近日，北京大学陈鹏课题组与王初课题组发展了一种在活体细胞或动物内瞬时激活蛋白质的普适性新技术，具体成果发表在Nature上，题为Time-resolved protein activation by proximal decaging in living systems。 在复杂的生命体系中原位研究蛋白质功能具有重要的科学意义，但目前适用此类研究的技术十分有限。蛋白质原位激活的“功能获得型”方法具有高灵敏度和时间分辨率，但对于绝大多数蛋白质来说，目前还缺乏这类原位激活的技术手段。 为此，研究人员发展了一种基于可遗传编码非天然氨基酸的“邻近脱笼”策略（CAGE-prox），结合计算机辅助设计与筛选，在一系列不同种类的蛋白质上实现了高时间分辨的原位激活，为在活体环境下研究蛋白质动态功能变化提供了一种通用和便捷的化学生物学技术。利用CAGE-prox,他们在活细胞或活体动物内建立了“激酶正交激活和信号转导系统”、 实现了“具有......阅读全文
激活媒质的功能介绍
中文名称激活媒质英文名称active medium定 义已经形成粒子数反转的［激光］工作物质，其微观粒子(电子、原子、分子或离子)由较高能级受激跃迁到较低能级时发射相干辐射。应用学科机械工程（一级学科），光学仪器（二级学科），激光器件和激光设备-激光器件和激光设备一般名词（三级学科）
激活剂的作用
酶的活力可以被某些物质提高，这些物质称为激活剂，在酶促反应体现中加入激活剂可导致反应速率增加。通常酶对激活剂有一定选择性，且有一定浓度要求，一种酶的激活剂对另一种酶可能是抑制剂，当激活剂的浓度超过一定的范围时，它就成为抑制剂。
Caspase级联的激活途径
Caspase级联由两条不同的途径激活：一条来自细胞表面，另一条来自线粒体，导致Caspase活化的途径因凋亡刺激的不同而不同。
激活蛋白的定义
激活蛋白是从葡萄孢菌（Botrytis）、交链孢菌（Alternaria）、黄曲霉菌（Asporgillus）、稻瘟菌（Pyrcularia）、青霉菌（Penicillium）、纹枯病菌（Rhizoctonia solani）、木霉菌（Trichoderma）、镰刀菌（Fusarium）等多种真菌中
黄病毒的激活机制
维也纳医科大学病毒学中心和巴黎巴斯德研究所的研究人员之间的一项合作，为蜱媒脑炎(TBE)病毒在受感染细胞中的原子相互作用提供了意想不到的见解。特别是，研究人员发现了一个新的分子开关，用于控制病毒组装、病毒成熟和进入新细胞的过程。由于它们之间的密切关系和结构上的同源性，从TBE病毒模型获得的认识对所有
自噬激活Hippo通路
而最早关于Hippo通路与自噬关系的论文则是2014年发表于《JEM》的一篇论文。mTORC1信号是自噬途径主要的上游抑制通路，而在TSC1缺失的细胞中，mTORC1通路则维持组成型激活状态。该项研究的研究者发现，在TSC1缺失的细胞中，不仅自噬受到抑制， Hippo通路也受到显著抑制。机制研究发现
T细胞依赖途径激活
借助T细胞激活B细胞的抗原被称为T细胞依赖性（TD）抗原，包括外源蛋白质。这样命名的是因为它们在缺乏T细胞的生物体中无法诱导体液免疫应答。尽管通过T细胞依赖途径所产生的抗体比非T细胞依赖途径产生的抗体具有更高的亲和力和更多的功能，但B细胞对这些抗原的应答往往需要几天的时间。一旦BCR结合TD抗原，抗
金属激活酶的定义
中文名称金属激活酶英文名称metal-activated enzyme;metal ion activated enzyme定 义一种保留一个或多个金属离子于其结合基团的表面并保持平衡的酶。这些金属离子的解离会使酶活性丧失。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
ras基因激活的方式
作为原癌基因的ras基因被激活以后就变成有致癌活性的癌基因.ras基因激活的方式有3种：基因点突变，基因大量表达，基因插入及转位.其中ras基因被激活最常见的方式就是点突变，多发生在N端第12,13和61密码子，其中又以第12密码子突变最常见，而且多为GGT突变成GTT.不同突变位点对P21的活化机
酶原激活的生理意义
一方面它保证合成酶的细胞本身不受蛋白酶的消化破坏， 另一方面使它们在特定的生理条件和规定的部位受到激活并发挥其生理作用。如组织或血管内膜受损后激活凝血因子；胃主细胞分泌的胃蛋白酶原和胰腺细胞分泌的糜蛋白酶原、胰蛋白酶原、弹性蛋白酶原等分别在胃和小肠激活成相应的活性酶，促进食物蛋白质的消化就是明显的例
酶原激活的生理意义
保护自身组织细胞：酶原以无活性形式存在，可避免在合成部位或分泌通道内对细胞自身进行消化水解，从而起到保护自身组织细胞的作用。例如，胰腺合成的胰蛋白酶原、糜蛋白酶原、弹性蛋白酶原等以酶原形式分泌，可防止这些蛋白酶在胰腺内激活而对胰腺自身进行消化。调节酶的活性：酶原激活是机体调节酶活性的一种方式。酶原激
补体经典激活途径介绍
补体系统的经典激活途径是由抗原-抗体复合物（即免疫复合物）结合C1q启动补体激活的补体活化途径。一般在感染后期发挥作用。经典激活途径主要由抗原-抗体复合物激活，由C3转化酶C4b2a与C5转化酶C4b2a3b介导，经由一系列级联放大反应激活补体系统，形成攻膜复合体，造成带有抗原的细胞质膜溶解破裂，细
补体激活途径都有什么？
①经典途径是以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂，补体C1～C9共11种成分全部参与了激活途径。除了抗原抗体复合物外，还有许多因子可激活此途径，如非特异性凝集的Ig、细菌脂多糖、一些RNA肿瘤病毒、双链DNA等。②替代途径又称旁路途径。由病原微生物等细胞壁成分提供接触面直接激活补体C3，然
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（四）
（2）硝酸纤维素滤膜吸印。①将胶切成合适大小，切去右上角作为记号。②将胶放进盛有变性缓冲液（1.5mol/l NaCl, 0.5mol/L NaOH）的盘中轻摇动15min。③换到中和缓冲液（1mol/L Tris·HCl , pH8.0, 1.5mol/L NaCl）中轻摇动30min。④裁一张硝
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（五）
⑦60伏电泳过夜。 ⑧取出凝胶，水中浸泡2次，每次5min。 ⑨室温下将胶浸到50mmol/L NaOH和10mmol/l NaCl中45min，水解高分子RNA，以增强转印。 ⑩室温下将胶浸到0.1mol/L Tris·HCl (Ph7.5)中45min，使胶中和。
前列腺原位肿瘤模型的建立实验——原位种植法
前列腺原位肿瘤模型的建立可以：（1）连续活体监测前列腺癌发生、发展；（2）用于前列腺原位肿瘤生长及治疗的研究；（3）研究前列腺癌的生物学行为。实验方法原理10只BALB/C裸鼠前列腺背侧包膜内注入携带红色荧光蛋白（RFP）的前列腺癌PC-3细胞（PR7细胞）悬液20μL，第2、4、6、8周分别用非侵
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（三）
（1）DAN斑点杂交①先将膜在水中浸湿，再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE，煮沸5min，冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置，将DNA点样于膜上。每个样品一般点50μl（2～10μg DNA）。④将膜烘干，密封保存备用。（2）RNA斑点杂交：与上法类似，每个样品至多加10μg总RNA（
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（六）
夹心杂交法可用滤膜和小珠固定吸附探针，使用小珠可更好地进行标准化试验和更容易对小量样品进行操作。Dahlen 等利用微孔板进行夹心杂交，可同时进行大量样品检测，他们先吸取DNA探针加到凹板中，然后用紫外线照射使其固定到塑料板上。用微孔板进行夹心杂交还可直接用于PCR技术。应用光敏生物标记探针
以菌落原位杂交为例介绍原位杂交技术
对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落（100-200）进行克隆筛选时，可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后，对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。将少数菌落转移到硝酸纤维素滤膜上（1） 在含有选择性抗生素的琼
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（二）
5．洗膜 取出塑料袋，用剪刀剪开，小心取出滤膜，立即浸入盛有2×SSC和 0.5%SDS溶液的盘中，室温下漂洗5min。再将滤膜移入2×SSC和0.1%SDS溶液中，室温下洗涤15min（轻轻摇动）。然后将滤膜移入 0.1×SSC和0.5%SDS溶液中；68℃轻轻摇动保温2h，更换缓冲液后继
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（一）
是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分
原位PCR的基本方法
①固定组织或细胞:将组织细胞固定于预先用四氟乙烯包被的玻片上，并用多聚甲醛处理，再灭活除去细胞内源性过氧化物酶.②蛋白酶K消化处理:用60ug/ml的蛋白酶K将固定好的组织细胞片55℃消化处理2h后，96℃2min以灭活蛋白酶K.③PCR扩增:在组织细胞片上，加PCR反应液，覆盖并加液体石蜡后，直接
原位划痕仪基本试验
材料去除机理的研究对精密超精密制造具有重要意义。通过安装在扫描电子显微镜内的原位划痕试验装置，可以研究残留切屑对块体金属玻璃材料去除过程的影响。在刮擦过程中整个BMG的去除过程可以实时观测。动态观察立方隅角压头前刀面上片状切屑的形成和生长情况。实验结果表明，当大量切屑堆积在压头的前刀面上，阻碍物料向
原位杂交应用案例
对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落（100-200）进行克隆筛选时，可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张硝酸纤维素滤膜上。经培养一段时间后，对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。 将少数菌落转移到硝酸纤维素滤膜上 （1） 在含有选择
荧光原位杂交实验
实验方法原理 用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列，因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上
肽核酸原位杂交
肽核酸（peptide nucleic acids，PNA）是20世纪90年代初发现的新型DNA／RNA同类物，是一类人工合成的以电中性的肽链酰胺2—氨乙基甘氨酸组成的多聚酰胺键取代DNA中的戊糖磷酸二酯键骨架而形成的类似核苷酸的物质。像传统的DNA序列那样，PNA寡聚体的氨基末端相当于DNA的5’
原位PCR的应用范围
组织处理的要求 处理后的标本，既要保持组织，细胞的形态结构，并增加细胞膜通透性，又要充分暴露拟扩增的目的DNA或RNA，使引物、探针能有效进入胞浆中发生反应。 应用范围 主要应用于两方面： （1）检测外源性基因片段，提高检出率，集中在病毒感染的检查上，如HIV、HPV、HBV、CMV等；
原位电镜确认立方冰
水是宇宙中含量仅次于氢气的物质，而冰是宇宙中最常见的固体。它们是恒星形成的基础，也是生命之源。人们对冰的观察可以追溯到公元前。在西汉，诗人韩婴发现“凡草木花多五出，雪花独六出”；科技革命先驱开普勒曾发出疑问“为什么飘落的雪花总是六角片状？”。现在我们知道，这是因为在自然界中冰是一种属于六角密堆结构
DNA探针原位杂交
1、4—6微米切片,用防脱片胶（多聚赖氨酸）处理过的玻片贴附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2（趁热脱蜡） 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液（蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml）,37℃消化1
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林；二甲苯；PBS操