ATCC细胞冷冻及解冻方法
一、细胞冷冻保存1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、冷冻保存方法:(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟→ -20℃30分钟→ -80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 (2)程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。 3、步骤: (1)冷冻前一日......阅读全文
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物(如盖玻片)上培养贴壁细胞,可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固,能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液; 6孔平底组织培养板,或φ60 mm培养皿; 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
ATCC细胞分类检测步骤
ATCC细胞检测步骤:【 样本储存 】:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激
ATCC细胞培养方法
基本原理 通过在支持物(如盖玻片)上培养贴壁细胞,可以应用抗体检测细胞表面抗原的表达或进行酶细胞化学以及免疫细胞化学检测。该方法的优点是细胞贴壁牢固,能够维持细胞生长时的状态。 试剂和设备 细胞悬浮液; 6孔平底组织培养板,或φ60 mm培养皿; 18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于
ATCC细胞注意事项方法
ATCC细胞注意事项:1、首先肉眼观察细胞培养基颜色,然后再借助显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张),这样做可方便后期的对比。2、一定要用75%的酒精消毒(75%的酒精的水要经过杀菌处理)。3、严格按照在无菌环
ATCC细胞冷冻及解冻方法
一、细胞冷冻保存1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesI
ATCC细胞-冷冻及解冻方法
一、细胞冷冻保存1、材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10Series
ATCC细胞的冷冻保存与解冻方法!
一、细胞冷冻保存1、材料生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)。2、
ATCC细胞基本原理与培养的方法
ATCC细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向**母细胞转化.**细胞转化率的高低可以反映机体的细胞**水平,因此可作为测定机体**功能的指标之一.ATCC细胞转化试验有形态计数法、MTT 法和同位素法三种.MTT
为什么STR鉴定对于ATCC细胞系来说很重要
ATCC 成立于 1925 年,是大的生物资源中心,由美国 14 家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家全球性、非盈利生物标准品资源中心。 进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国?ATCC,
ATCC菌种生理状况改变原因
ATCC菌种的遗传特性需要在一定条件下才能表现出来。由于培养条件不适当,使菌种处于不利于发酵生产的生理状况,其结果也表现为菌种衰退。菌种处于不利于发酵的生理状况有以下三个方面的原因:①一个菌种不是纯的群体,而是由一些变异株混合组成,这些变异株所占的比例决定该菌种的特性。一个由单菌落发育而来的菌种在固
常用微生物菌株
常用微生物菌株 /质控菌株/对照菌株 菌种编号菌种名称菌种编号菌种名称ATCC 16404黑曲霉CMCC(B) 51105痢疾志贺氏菌CMCC(F) 98003黑曲霉CMCC(B) 51572福氏志贺氏菌As 3.2788桔青霉CMCC(B) 51592宋氏志贺氏菌MIG3.104绳状青霉ATCC
常用微生物菌株
常用微生物菌株 /质控菌株/对照菌株 菌种编号菌种名称菌种编号菌种名称ATCC 16404黑曲霉CMCC(B) 51105痢疾志贺氏菌CMCC(F) 98003黑曲霉CMCC(B) 51572福氏志贺氏菌As 3.2788桔青霉CMCC(B) 51592宋氏志贺氏菌MIG3.104绳状青霉ATCC
怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件?
ATCC (American Type Culture Collection) 收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cells and hybridomas链接,输入细胞名称就可以搜索ATCC的细胞数据库。数据库中有每一种细胞的详细描述,包括细胞的来源,培养和冻存条件,以及相关文
体外培养细胞的种类命名以及建立细胞系或细胞株要求...
二、建立细胞系(或株)的要求关于什么样的体外培养细胞群,可被确认为是已被鉴定的细胞(Certified Cells),国际上也尚无统一的规定,一般依具体情况而定。在只用作初代培养细胞,只要供体性别、年龄等均一,取材部位及组织种类等条件稳定,做鉴定的项目无需很多,有几项能说明细胞的相关性状的即可。
选择性增菌培养基质量控制标准解析
培养基能够保证特定的微生物在其中繁殖,而部分或全部抑制其他微生物生长的,以下总结对于不同的微生物而言,培养基的标准。 培养基 李氏增菌肉汤 (LB1,LB2) Bolton肉汤 状态 液体 液体
STR鉴定报告看不懂,希尔博士来解忧
STR是什么意思? STR(Short Tandem Repeats,短串联重复序列)分析已被国际细胞系鉴定协会(ICLAC:International Cell Line Authentication Committee )、ATCC、NIST(美国国家标准局)等权威机构作为金标准应用于
分析细胞鉴定金标准STR(Short-TandemRepeat)短串联重复...
分析细胞鉴定金标准-STR(Short TandemRepeat)短串联重复序列STR(Short TandemRepeat,短串联重复序列)分析已被ICLAC、ATCC等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定。由于目前使用错误细胞情况非常严重,越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞STR分析数据。经常有小伙
传代细胞系的研究进展介绍
由于哺乳动物细胞传代细胞系(continuous cell lines,CCL)对重组蛋白质的翻译后加工、修饰比大肠杆菌、酵母和昆虫细胞具有不可替代的优点,因此,采用哺乳动物细胞CCL作为宿主细胞建立细胞库也就成为重组治疗用生物制品的研发和申报热点。明确的宿主细胞来源和历史可以为我们对后续建库细
130家实验室想引进它的病毒细菌,这口子上海敢不敢开?
摘要:目前全球新药研发的外包服务市场规模超过300亿美元,中国生物医药企业要想从中拿下订单,其新药研发的可靠和权威性极其关键。而上海检验检疫部门创新进境微生物样本监管模式,无疑将使中国科学家与国外同行有了平等竞争的起点。 在生物医药产业正蓬勃发展的上海,当超过130家生物领域科研机构对美国
细胞STR鉴定
细胞STR鉴定应用于生物医学研究领域的哺乳动物细胞被错误鉴定和交叉污染的问题,一直是一个普遍存在的突出问题。据统计,国外实验室有20%左右的细胞株被错误鉴定和交叉污染,NIH和ATCC近两年都对此发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。近年来,大量研究表明STR基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的
细胞伤口愈合实验所需材料和仪器
1.人MDA-MB-231cell(ATCC#HTB-26)2.DMEM培养基(Invitrogen#10313-021)3.胎牛血清(ATCC#30-2020)4.PBS(Invitrogen#14190-144)5.BD24孔细胞培养板(Fisher#08-772-1H;BD#353226)6.
关于细胞系的检测项目的介绍
ATCC接纳入库细胞时,必须符合其入库标准,ATCC入库细胞要求检测项目如下: 培养简历:组织来源日期、物种、组织起源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态、细胞已传代数等 冻存液:培养基和防冻液名称 细胞活力:融解前后细胞接种存活率和生长特性 培养液:培养基种类和名称(一般要求不含抗生素
经典脑癌细胞系遭遇身份危机-与50年前来源不匹配
生物医学专家经常被要求检查他们的细胞系未被污染或者贴错标签。不过,一项最新研究表明,只有被用于细胞比对的参考标准靠谱,验证细胞系的任何努力才会有意义。 一个广泛用于研究脑癌的细胞系同近50年前创建该细胞系的细胞,即其源头肿瘤并不匹配。研究人员在日前出版的《科学—转化医学》杂志上报告了这一发现。
你的细胞有做过-STR-鉴定吗?
据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa c
建立细胞系或细胞株
各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certified Cells)。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各种细胞系(株
STR细胞鉴定意义
导读: 新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么? 没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。
STR基因分型应用于细胞鉴定的意义
新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么? 没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。 背景介绍应用于
STR细胞鉴定意义
导读:新买到的细胞,实验室传了几代的细胞,又或者储存于超低温冰箱几年不用的细胞,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么? 没有经过相应的细胞鉴定,使用了被污染的细胞,经过大量的实验,写出一篇论文,但是结论被推翻,论文被召回,大量的时间、物力和人力被浪费,一切都要从头再来。背景介绍应
金黄色葡萄球菌、沙门氏菌快速检测方法
在发达国家以及发展中国家,食源性致病菌引发的疾病已经成为严重威胁公众健康的重要因素[1,2]。金黄色葡萄球菌(StaphylococcusAureus)是引发多种类型感染和食物中毒的病原菌,由此引发的食物中毒发生频率很高[3]。沙门氏菌是最常见的食源性致病菌,也是食源性致病菌中研究最活跃的细菌[4]
THP1细胞如何培养
细胞培养:THP-1细胞培养于含有10%FBS+1%P/S的RPMI-1640培养基中,培养环境为37℃,5%CO2。可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基,或直接传代。细胞传代:当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓