免疫组化SABC法操作流程

1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37 oC温箱中,将多聚赖氨酸涂布于玻片的表面,由于Lys带正电,而大多数的组织带负电荷,从而产生吸附作用。2、包埋组织先在铁模具中加入一些液态石蜡,先稍微冷却,然后再将待包埋的组织置于石蜡之中,并排列整齐,再将塑料模具盒盖上,最后加入少许液体石蜡,进行冷冻,使石蜡变成固态。3、切片将包埋好的组织从模具上取下来,并置于石蜡切片机上,切片机通过调节上下左右来来使组织和切割方向一致,然后调节切片的厚度,一般为5 um,如果比较难切,则可以适当调整厚度,用毛笔将切割的载玻片向外拉,并用小镊子将包含有完整组织的载玻片置于40 oC温水中。4、捞组织当......阅读全文

免疫组化的操作步骤

一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加

免疫组化操作规程

免疫组化操作规程(一)、仪器设备   1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;    2)水浴锅(二)、试剂     1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。   

免疫组化的操作步骤

1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,

免疫组化操作规程

(一)、仪器设备   1)18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉;    2)水浴锅(二)、试剂     1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。    2)0.01mo

免疫组化SP法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法.按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

免疫组化ABC法步骤

1、4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后;2、加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5mi

免疫组化SP法步骤

SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二

移液器的操作流程

移液器的使用方法:1调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液

临床输血操作流程

1 一般病人用血 (1)当班护士协助医师向病人解释,做好输血前的“九项”①检查工作;(2)将血交叉申请单与贴好标签的试管携至病人床边核对“4项”②内容后,采血标本5~6ml;(3)将“4单”③及血标本一起送到血库与血库人员核对、双签名;(4)交叉配血完成后,由当班护士与血库人员共同核对“九项”、双签

细胞复苏操作流程

细胞复苏操作流程:1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻

真空烘箱操作流程

  1、将物料均匀放入真空干燥箱内样品架上,推入干燥箱内;  2、关紧箱门,放气阀,箱门上有螺栓,可使箱门与硅胶密封条紧密结合;  3、将真空泵与真空阀连接,开启真空阀,抽真空;  4、依据真空泵的性能,抽到压力表为真空泵的极限值为准;  5、抽完真空后,先将真空阀门关闭,如果真空阀门关不紧,请更换

实验电炉操作流程

1. 本仪器额定功率为12千瓦,高可控温度为1000度,升温速率必须小于120度/分钟(否则功率过大,影响仪器正常使用)。  2. 箱式电阻炉配套使用的电炉温度控制器可直接调控箱式电阻炉的电源开关、温度控制等测量参数。打开绿色电源开关【ON】,开关变绿,仪器右边的仪表盘上的【指示】灯亮,通过左右拨动

离子色谱操作流程

一、配制新鲜的淋洗液 按照色谱柱配制与之相适宜浓度的淋洗液,配制淋洗液的去离子水要经过脱气处理, 如果气泡进入泵内会影响泵的稳定,基线打折,如果气泡进入检测器会影响样品的测定。二、开机顺序 先开主机后开泵,然后打开工作站,点控制面板连接。三、启动泵 首先确保滤头到泵之间的输液管充满淋洗液不能有气体,

移液器的操作流程

1调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的高确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。 2装配枪头(吸液

ELISpot实验操作流程

ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表

熔点仪操作流程

熔点仪操作流程1、装样1、将样品置于瓷研钵内,轻轻研碎成尽可能细密的粉末,以得到均一的样品。2、取一支或数支清洁、干燥的熔点管,将其开口端插入样品中,装入样品。3、取一长约0.8米的干燥玻璃管,直立于玻璃板上,将装有试样的熔点管在其中投落至少20次,使熔点管内样品紧缩至3-4mm高。如果同时测两个样

免疫组化的操作规程

实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬

免疫组化的操作规程

实验概要本实验介绍了免疫组化的操作规程。主要试剂1. PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。 2. 0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬

生物安全柜操作操作流程

操作流程:生物安全柜玻璃门为手动操作,正常工作时玻璃门的开启高度200mm,如果超出表示高度时,声光报警系统启动,提醒用户玻璃门超高。注:当玻璃门开启时,紫外灯无法开启。生物安全柜电源为220V、50Hz,柜体后部方有接地标志,必须做到可靠接地后方可使用。接通电源后,通电进入待命状态。(1)按下[紫

电子分析天平操作流程及程序流程

  1.手柄在启动和关闭时,务必缓慢均匀地旋转和关闭。过快会导致刀刃紧急接触和受损。同时,由于过度晃动,会导致测量误差。  2.称重时,应适当估计添加砝码,随后启动电子分析天平,按指针偏移方向增加砝码。投影屏幕上的读数应静止到10毫克以内。  3.在每次称量时,都应将电子分析天平关闭,不能在电子分析

烘箱的使用操作流程

烘箱外壳通常选用薄钢板制作,外表烤漆,工作室选用优异的构造钢板制作。外壳与工作室之间填充硅酸铝纤维。加热器装置底部,也可安顿顶部或两边。温度操控仪表选用数显智能表,PID调节:装备999.99小时时刻操控器并与报警装置相连接。使烘箱的操作更简洁,方便与有效。烘箱的使用操作流程:1. 使用前必需留心所

GSTpulldown操作流程

实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。 实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。

药敏试验的操作流程

(1)培养基的厚度对抑菌圈的大小有影响,故平皿中加入培养基要固定,以4mm深度为宜。制备的平板使用时应放于35℃温箱中30min去除过多的水分,以免影响抗菌药物的扩散。(2)接种细菌后应在室温放置片刻,待菌液被培养基吸收后,再贴纸片;但不宜放置太久,否则在贴纸片前细菌已开始生长可使抑菌圈缩小。(3)

细胞工厂的操作流程

细胞工厂一般用于细胞的扩大培养,首先在操作前需要根据工厂的培养面积来确定细胞接种的数量。根据细胞瓶中单位面积细胞培养的数量,乘以细胞工厂的培养面积,再除以培养细胞的接种比例即可。其次要准备好细胞培养时所需的工作液,如血清、蛋白酶等。准备工作做好以后,就可以将液体注入容器内部了,直接通过进液口倾倒就可

微量移液器规范操作流程

1. 微量移液器的选择:根据需求选择相应的微量移液器。通常情况下选择35%~100%范围进行操作,选择这个量程对操作者的操作技巧依赖较少,同时可保证移液的准确性和精度  。2. 量程的调节:遵循由大到小原则,当由大量程调至小量程时,通过调节按钮迅速调至需要量程,在接近理想值时,将微量移液器横放调至预

GSTpulldown操作流程

实验材料 探针蛋白原核蛋白细胞蛋白组织蛋白提取物试剂、试剂盒 NaClKClNa2HPO4KH2PO4Triton-100IPTGPMSF(苯甲基磺酰氟)CocktaierImmobilized Glutathione无水乙醇仪器、耗材 定容瓶锥形瓶高速离心机低温冰箱超声仪EP管层析柜

实验室操作流程

  一、目的:  本规程旨在为微生物实验室操作提供一个标准化规程;  二、适用范围:  微生物实验室;  三、责任人:  实验室、微生物检测员;  四、安全注意事项:  严格遵循无菌操作,防止微生物污染;操作人员进入微生物实验室应先关掉紫外灯。  五、微生物实验室标准化操作规程:  1.微生物实验室

塑料吹膜机的操作流程

塑料吹膜机的开机准备1、检查和加好减速箱,空压机内的润滑油,检查各机械传动部件的润滑情况。2、检查吹膜机组安装工作是否按要求安装好,检查各螺栓紧固良好。3、检查下料内不能有异物,原材料中不得有铁屑或其它不合要求的物料混入。4、检查本机组加热系统和测温系统完好。5、对材料要求应干燥,否则应进行预干燥。

洗板机的操作流程

  1.打开电源,启动洗板机,待自动停止后,视屏显示[Run]:A,-+,洗板机启动运行Other yes.  2.按Other键,视屏出现Prime:Ch1即第一通道(蒸馏水清洗通道),通过-+键可调节Ch1和Ch2(洗涤液通道),CH1按yes键洗板机自动用蒸馏水清洗洗涤通道。Ch2,按yes键

GSTpulldown操作流程

利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合,已广泛应用于分子生物学(1)证实两种蛋白可能有相互作用(2)寻找能与已知蛋白发生相互作用的未知蛋白。实验方法原理利用重组技术将探针蛋