细胞工厂的操作流程
细胞工厂一般用于细胞的扩大培养,首先在操作前需要根据工厂的培养面积来确定细胞接种的数量。根据细胞瓶中单位面积细胞培养的数量,乘以细胞工厂的培养面积,再除以培养细胞的接种比例即可。其次要准备好细胞培养时所需的工作液,如血清、蛋白酶等。准备工作做好以后,就可以将液体注入容器内部了,直接通过进液口倾倒就可以,注意控制液体流速,避免产生太多气泡。液体注入完成后将容器向一侧放倒,使得液体均匀分布在各层之间。然后将容器向着没有进/出液口的一端倾斜,使液体在每一层之间均匀的分布。在倾斜的过程中,一定要保证细胞进液一侧同时抬高,一定要避免液体在层间流动,破坏每一层之间的分布。最后,将容器放平,放入合适的培养环境中就可以了。在操作的过程中要注意,移动细胞工厂时尽量保持水平,避免倾斜导致液体分布不均,影响细胞生长效果。......阅读全文
细胞工厂的操作流程
细胞工厂一般用于细胞的扩大培养,首先在操作前需要根据工厂的培养面积来确定细胞接种的数量。根据细胞瓶中单位面积细胞培养的数量,乘以细胞工厂的培养面积,再除以培养细胞的接种比例即可。其次要准备好细胞培养时所需的工作液,如血清、蛋白酶等。准备工作做好以后,就可以将液体注入容器内部了,直接通过进液口倾倒就可
细胞复苏操作流程
细胞复苏操作流程:1、将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻
细胞冻存操作流程
细胞冻存操作流程:1、细胞冻存前12~24h,换新鲜培养基,使细胞一直处于对数生长期。2、待细胞长至80%汇合时胰酶消化,用新鲜培养基吹打后制成细胞悬液,1000rpm离心10min。悬浮细胞则直接离心。3、弃上清,加入冻存液重悬细胞沉淀,调整细胞浓度为3×106~1×107cells/mL。将细胞
细胞有丝分裂的试验操作流程
(一)原材料 1.待检材料(药品)。 2.体细胞培养成层的贴壁细胞。 3.实验试剂 甲醇、3%吉姆萨染液。 4.器械CO2培养箱、倒置显微镜、盖玻片(2.2 cm×2.2 cm,需事先清理和杀菌解决)、塑胶培养皿(3.5 cm)、载玻片、封片用盖玻片、中性化虫胶。
RNc细胞大鼠皮质细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
PA1细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
2A1细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
大鼠纤维环细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
WML2细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
人肾实质细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
人脑膜细胞-1520复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
免疫荧光组织(细胞)化学的操作流程
一、原理与意义免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——直接法,是一种荧光抗体染色法。该方法比较简单,适合做细菌、螺旋体、原虫、真菌及浓度较高的蛋白质抗原如肾、皮肤的检查和研究。此法每种荧光抗体只能检查一种相应的抗原,特异性高而敏感性较低。二、操作流程1、染色:切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或
人脑成纤维细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
LLCMK2细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
2B4细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
LLCMK2细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
Nunc细胞工厂
实验方法原理 用培养液制备细胞悬液,将悬液注入单元的各小室内。使长边朝下,放置。将单元旋转 90度,放平后用 CO2 充气。然后封闭,进行培养。 实验材料
Nunc细胞工厂
实验方法原理用培养液制备细胞悬液,将悬液注入单元的各小室内。使长边朝下,放置。将单元旋转 90度,放平后用 CO2 充气。然后封闭,进行培养。实验材料单层细胞0.25%天然胰蛋白酶D-PBSA试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材Nunc细胞工厂硅酮管和连接器血细胞计数板或电子细胞计数器和计数用液体实验步
Nunc细胞工厂
Nunc细胞工厂 实验方法原理 用培养液制备细胞悬液,将悬液注入单元的各小室内。使长边朝下,放置。将单元旋转 90度,放平后用 CO2 充气。然后封闭,进行培
移液器的操作流程
1调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的高确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。 2装配枪头(吸液
移液器的操作流程
移液器的使用方法:1调节量程在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液
流式细胞仪的使用操作流程(图)
一.开机程序1.检查稳压器电源,打开电源,稳定5分钟。 2.打开储液箱,倒掉废液,并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀,取出鞘液桶,将鞘液桶加至4/5满(一般可用三蒸水,做分选必须用PBS 或FACSFlow),合上压力阀。确实盖紧桶盖,检查所有管路是否妥善安置。 3.将FACS
大鼠淋巴成纤维细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
HCC-94-(HCC941122)细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
人毛囊外根鞘细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
小鼠源细胞注意事项与操作流程
小鼠源细胞注意事项: 1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。 2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。 3.严格无菌操作,打
细胞工厂的基本步骤
1、培养结束后将培养液倒出,使用无钙无镁磷酸盐缓冲液(CMF-PBS)清洗(40-50 ml/层),若有需要重复清洗一次。2、消化:消化液(10-40 ml/层)提前预热。3、收集:1000 rpm 离心5分钟,去除消化液,收集细胞。4、清洗:用CMF-PBS或培养基清洗消化过的培养器。
细胞工厂的构建理念
细胞工厂的设计通常是以产品的高效生产为理念,并在此过程中是遵循以下五大准则:(ⅰ) 构建一条由原料到产品的最优合成途径;(ⅱ) 平衡代谢途径中每步反应的代谢流,使该途径代谢通量远高于细胞基础代谢;(ⅲ) 足量地供应合成途径的前体,多个前体根据需要调整供应比例;(ⅳ) 酶促反应往往有各种辅因子的参与,
LLCMK2细胞恒河猴肾细胞复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
Annexin-V-检测凋亡细胞膜的改变操作流程
一、Annexin V 检测凋亡细胞膜的改变试剂及溶液:A 对于单独购买的试剂: a) 10X Binding Buffer (货号:556454) b) Propidium Iodide(PI,货号:556463):建议与以下试剂同时使用 Annexin V-FITC(货号: 556420