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ELISpot实验操作流程

ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。将细胞因子特异性单克隆抗体包被于乙醇处理过的PVDF膜板上。具体板子处理和包被方法请参考:https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/plate-coating-guide将细胞加入到酶标孔中,不同组加不同的刺激剂或者不加刺激剂。 具体细胞处理方法请参考: https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/cell-handling细胞分泌的细胞因子......阅读全文

酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法

酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年,Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率,经过不断发展,目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因

Ƴ干扰素释放试验临床应用的价值、问题与展望

根据最近两次的结核病流调看,我国目前结核病疫情和结核分枝杆菌感染的情况呈现两个特点。首先,我国的潜伏结核感染率为44.5%-50.2%(用PPD试验检测),应用ELISPOT方法检测的LTBI率为15.4%-30.7%;其次,临床结核病患者中有85.6%的活动性肺结核是菌阴患者。由此可见,潜伏结核感

peprotech细胞因子注意事项(一)

目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括:ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析(limiting dilution analysis,LDA)和单细胞PCR,应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th2细胞,此方法可获得较强的细胞

流式细胞仪实验方法-1

流式细胞仪实验方法 一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.C

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

MHC 四聚体技术:检测抗原特异性T细胞的金标准

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体(TCR),与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽,启动获得性/特异性免疫应答机制,比如 T 细胞介导的细胞免