ELISA的概念、原理、操作步骤

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。 (二) 操作步骤 ......阅读全文

ELISA的概念、原理、操作步骤

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。   (一) 原理  ELISA是以免

ELISA的概念、原理、操作步骤

  ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。   (一) 原理  ELISA是

ELISA的概念、原理、操作步骤

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。(一) 原理ELISA是以免疫学反应为

ELISA操作步骤

酶联免疫吸附实验材料,试剂,溶液1.酶标板,100μltip头,1ml Ep管,湿盒2.包被稀释液(0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH 9.6)碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水至100ml,调至pH 9.63. 封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)小牛

细胞ELISA操作步骤

Cellular ELISA ProtocolFormalin Fixed Cell Plates1. Trypsinize confluent flasks2. Pool and count cells3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes4. Resus

电导率仪的概念及其测定原理、操作步骤

电导率是物体传导电流的能力。电导率测量仪的测量原理是将两块平行的极板,放到被测溶液中,在极板的两端加上一定的电势(通常为正弦波电压),然后测量极板间流过的电流。根据欧姆定律 ,电导率(G)--电阻(R)的倒数,由导体本身决定的。电导率的基本单位是西门子(S),原来被称为欧姆。因为电导池的几何形状影响

elisa的原理和实验步骤

ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与

elisa的原理和实验步骤

1. ELISA的原理  ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗

elisa的原理和实验步骤

ELISA的原理ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与

视频:ELISA实验操作步骤演示

优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式ELISA。以下是一份操作视频演示。ELISA实验操作步骤演示

Elisa技术原理和相关概念

一、免疫分析技术基本原理运用抗原、抗体之间的特异性结合来测定、分析特定物质的方法抗原:可诱导动物免疫系统发作免疫应对的物质。1.elisa试剂盒按其引起免疫应对的才干分半抗原、抗原、超抗原。 抗体:由动物免疫系统发作,可特异性结合某种物质的免疫球蛋白。分IgG、 IgM、 IgE、 IgA、

小鼠ELISA试剂盒的操作步骤

小鼠ELISA试剂盒的操作步骤: 影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA试剂盒,标准曲线的范围一般较宽,曲线点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数纸,

关于电导率仪的概念与测定原理及操作步骤详解

  电导率仪的测量原理是将两块平行的极板,放到被测溶液中,在极板的两端加上一定的电势(通常为正弦波电压),然后测量极板间流过的电流。根据欧姆定律,电导率(G)--电阻(R)的倒数,由导体本身决定的。电导率的基本单位是西门子(S),原来被称为欧姆。因为电导池的几何形状影响电导率值,标准的测量中用单位电

夹心法ELISA和竞争法ELISA操作步骤比较

竞争法ELISA操作步骤实验开始前,各试剂和样本均应平衡至室温;样本复融后需再次离心,取上清检测;试剂或样本配制时,需充分混匀并尽量避免起泡;标曲和样本建议做复孔检测。1.加样:将标准品工作液依次加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔50 μL。待测样品加入到其他孔,每孔50 μ

ELISA试剂盒操作时的浸泡步骤

ELISA试剂盒操作时的浸泡步骤分享:1、吸干或甩干孔内反应液。2、用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去)。3、浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短。4、吸干孔内液体,吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干。5、重复操作3

液相阻断ELISA的原理和步骤

ELISA原理  ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牵9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际

细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法

细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小

western-blot-的原理及操作步骤

原理Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附

间接法的原理和操作步骤

间接法是检测抗体最常用的方法,其原理为利用酶标记的抗体以检测已与固相结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:⑴将特异性抗原与固相载体连接,形成固相抗原:洗涤除去未结合的抗原及杂质。⑵加稀释的受检血清:其中的特异抗体与抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体。其他抗体

小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒原理及操作步骤

小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒 【小鼠酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被趋化因子C-C-基元配体3(CCL3)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足

山羊丙酮检测ELISA试剂盒操作步骤

  山羊丙酮检测ELISA试剂盒操作步骤:   1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀

人溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒操作步骤

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人溶菌酶(LZM)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人溶菌酶(LZM)水平。用纯化的人溶菌酶(LZM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入溶菌酶(LZM),再与HRP标记的溶菌酶(LZM)抗体结

关于人白介素ELISA试剂盒的操作步骤介绍

  1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉

高灵敏ELISA试剂盒操作步骤中的忌讳

  ELISA试剂盒实验中每一个步骤都尤为重要,细节不容忽视,它是实验成功的关键与否;在这   里本司为方便各位了解,更好的完成实验,特对高灵敏ELISA试剂盒操作步骤中的忌讳做出以   下分析,供大家参考:   1、吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,吸取的量不够准确。

高灵敏ELISA试剂盒操作步骤中的忌讳

   elisa试剂盒实验中每一个步骤都尤为重要,细节不容忽视,它是实验成功的关键与否;在这里本司为方便各位了解,更好的完成实验,特对高灵敏ELISA试剂盒操作步骤中的忌讳做出以下分析,供大家参考:     1.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,吸取的量不够准确。     2.手工洗板时每次加入

熔点仪的工作原理和操作步骤

工作原理    熔点仪是按照药典规定的熔点检测方法而设计的,该仪器利用电子技术实现温度程控,初熔和终熔数字显示。应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用电子线路实现了快速“起始温度”设定及四档可供选择的线性的升温速率。仪器采用药典规定的毛细管作为样品管,通过高倍率的放大镜观察毛细管内样品的熔化过程,清

热解吸仪的原理及操作步骤

     热解吸仪广泛应用于大气污染、建筑工程室内空气污染、高纯气体、石油化工、食品等分析测试领域,是利用隋性气体流提取固体和液体介质中的挥发物,并通过加热的方法转移到分析系统,如气相色谱仪或色/质连用仪,将介质中的挥发物组分分析出来的装置,其主要操作步骤为:吸附-脱附-气相色谱分析。    利用物

熔点仪的工作原理和操作步骤

   工作原理    熔点仪是按照药典规定的熔点检测方法而设计的,该仪器利用电子技术实现温度程控,初熔和终熔数字显示。应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用电子线路实现了快速“起始温度”设定及四档可供选择的线性的升温速率。仪器采用药典规定的毛细管作为样品管,通过高倍率的放大镜观察毛细管内样品的熔化

cDNA的合成实验原理和操作步骤

一、实验目的掌握植物cDNA合成的原理和方法二、实验原理反转录酶主要用于体外cDNA的合成。目前最常用的反转录酶(reverse transcriptase) 有SuperscriptII、M-MLV和AMV等。它们具有依赖于RNA或DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性,可以以RNA分子

引伸计的工作原理与操作步骤

引伸计是用来测量试件线伸缩变形的仪器。它一般由三个基本部分组成,即感受变形部分;传递和放大部分;显示部分。引伸计的种类很多,在拉力机上常有的有大变形引伸计(测试橡胶类产品)和小变形引伸计(金属引伸计)这两种。一、产品简介    引伸计是用来测量试件线伸缩变形的仪器。它一般由三个基本部分组成,即感受变