细胞ELISA操作步骤
Cellular ELISA ProtocolFormalin Fixed Cell Plates1. Trypsinize confluent flasks2. Pool and count cells3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes4. Resuspend to the appropriate concentration in complete medium 4 x 105 cells/ml for epithelial cells 2 x 105 cells/ml for fibroblast cells5. Add 100 μl/cell to 96 well culture plates.6. Incubate overnight at 37oC.7. Wash plates twice with PBS8. Add 125 μl/well 10% Buffered Fo......阅读全文
细胞ELISA操作步骤
Cellular ELISA ProtocolFormalin Fixed Cell Plates1. Trypsinize confluent flasks2. Pool and count cells3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes4. Resus
ELISA操作步骤
酶联免疫吸附实验材料,试剂,溶液1.酶标板,100μltip头,1ml Ep管,湿盒2.包被稀释液(0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH 9.6)碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水至100ml,调至pH 9.63. 封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)小牛
细胞凋亡检测操作步骤之ELISA法
细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小
ELISA的概念、原理、操作步骤
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是
视频:ELISA实验操作步骤演示
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式ELISA。以下是一份操作视频演示。ELISA实验操作步骤演示
ELISA的概念、原理、操作步骤
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。(一) 原理ELISA是以免疫学反应为
ELISA的概念、原理、操作步骤
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免
大鼠自然杀伤细胞(NKC)ELISA试剂盒使用操作步骤
大鼠自然杀伤细胞(NKC)ELISA试剂盒使用操作步骤:1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3,不用的其它试剂应包装好或盖好。4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充
夹心法ELISA和竞争法ELISA操作步骤比较
竞争法ELISA操作步骤实验开始前,各试剂和样本均应平衡至室温;样本复融后需再次离心,取上清检测;试剂或样本配制时,需充分混匀并尽量避免起泡;标曲和样本建议做复孔检测。1.加样:将标准品工作液依次加入到前两列孔中,每个浓度的工作液并列加两孔,每孔50 μL。待测样品加入到其他孔,每孔50 μ
人抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒操作步骤
我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗内皮细胞抗体(AECA)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗内皮细胞抗体(AECA)水平。用纯化的抗原包被微孔
人粒细胞无形体病-(HGA)ELISA试剂盒操作步骤
我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测人血清,血浆及相关液体样本中人粒细胞无形体病 (HGA)水平。实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人粒细胞无形体病 (HGA)。用纯
小鼠ELISA试剂盒的操作步骤
小鼠ELISA试剂盒的操作步骤: 影响反应因素较多,特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致,因此在定量测定中,每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA试剂盒,标准曲线的范围一般较宽,曲线点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数纸,
简介细胞计数操作步骤
1.将计数板及盖玻片擦拭干净,并将盖玻片盖在计数板上; 2.轻轻吹打细胞悬液,使细胞均匀分布;吸出少许细胞悬液滴在细胞入口,使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间,静置1-2min,使细胞沉降;注意盖玻片下不要有气泡,也避免细胞悬液进入旁边的槽中; 3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进
山羊丙酮检测ELISA试剂盒操作步骤
山羊丙酮检测ELISA试剂盒操作步骤: 1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀
ELISA试剂盒操作时的浸泡步骤
ELISA试剂盒操作时的浸泡步骤分享:1、吸干或甩干孔内反应液。2、用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去)。3、浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短。4、吸干孔内液体,吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干。5、重复操作3
人溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒操作步骤
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人溶菌酶(LZM)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人溶菌酶(LZM)水平。用纯化的人溶菌酶(LZM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入溶菌酶(LZM),再与HRP标记的溶菌酶(LZM)抗体结
大鼠白细胞介素4elisa试剂盒的操作步骤
用于检测未知抗原的双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃*夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述
细胞冻存的操作步骤
1、配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;2、取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。3、去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;4、离心1000rpm,5min;5、去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,
细胞冻存的操作步骤
细胞冻存1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.4.
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
细胞冻存的操作步骤
1、配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;2、取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。3、去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;4、离心1000rpm,5min;5、去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,
细胞冻存的操作步骤
1、配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;2、取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。3、去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;4、离心1000rpm,5min;5、去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,
细胞冻存的操作步骤
细胞冻存1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.4.
细胞免疫荧光操作步骤
1.细胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封闭30min;7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;8.
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
冷冻细胞活化的操作步骤
1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻,以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害,导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后,约需数日,或继代一至二代,其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。3. 材料 :3.1 37 oC 恒温水槽 3.2 新鲜培养基 3.3 无菌吸管/ 离心管/ 培养
细胞冻存的操作步骤
(一)仪器1. 净化工作台2. 离心机3. 恒温水浴箱4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)5. 倒置相差显微镜6. 培养箱7. 液氮冰箱(二)玻璃器皿1. 吸管(弯头、直头)2. 培养瓶3. 玻璃瓶(250ml、100ml)4. 废液缸(三)塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10
细胞培养的操作步骤
一、原代培养及其操作步骤原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度和一定的营养条件下,生存、生长和繁殖。原代培养细胞常有不同的细胞成分,生长缓慢,但是更能代表所来源的组织细胞类型和表达组织的特异性特征。利用原代细胞
干细胞稳定转染操作步骤
外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于前两者的效率低且伤害较大,所以现在除了对于一些特殊细胞系,一般的转染方法都利用脂质体。利用脂质体转染和其他方法一样,最重要的就是防治其毒性,因此脂质体与