免疫组化的试剂准备

最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗,注意抗体的特异性、效价和交叉反应,最好用单抗。其他常用试剂有:1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS),稀释抗体和洗片子用;2、清洁液、纯水,洗玻片用3、多聚赖氨酸处理载玻片,防止脱片4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;5、15%~30%蔗糖,组织脱水用;6、梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋,或者OCT包埋做冰冻切片;7、抗原修复液:枸橼酸缓冲液(pH6.0);8、活化剂:EDTA或者Triton X-100;9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封闭液;10、H2O2,灭活内源性过氧化物酶;11、显色液:根据你做的酶来选择,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫荧光则不需要;12、50%缓冲甘油封片液。......阅读全文

免疫组化的原理

  抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示

免疫组化的分类

  免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。  这些常用免疫组织化学方法的原理如下:  1. 免疫荧光细胞化学技术  将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的

蛋白激酶B(Akt1/PKBa)免疫组化试剂盒操作步骤

蛋白激酶B(Akt1/PKBa)免疫组化试剂盒操作步骤:1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀

牛C反应蛋白(CRP)elisa免疫组化试剂盒​样本处理及要求

牛C反应蛋白(CRP)elisa免疫组化试剂盒样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右

石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂..

石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂盒说明主要用途石蜡切片抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)免疫组化染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和免疫抗体显色技术,即通过抗酒石酸酸性磷酸酶多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗,使用染料二氨基联苯胺染色显示棕褐色,分析存档中的石蜡包埋

低分子量细胞角蛋白免疫组化试剂盒的存放以及注意事项

  ELISA试剂盒收到后立即储存于2-8℃下:效期见试剂盒标签;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。运用前:一切试剂平衡至室温:不同批次的试剂不能交流运用。    1.停止液:1瓶:12ml:0.5M硫酸:储存于2-8℃至有效期 。    2. 胎球蛋白A示踪抗体:1瓶:0.6 ml:浓缩:HRP

免疫组化操作

 (一)、仪器设备1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉.2. 水浴锅(二)、试 剂1. PBS缓冲液(pH7.2―7.4)2.0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,pH6.0,1000ml)3. 3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制4. 风裱剂:a. 甘油和0.5mm

免疫组化步骤

1。4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)中过夜。蜡块制作。切片,贴片。0.01MKPBS清洗5min×3后; 2。加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MKPBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5m

免疫组化流程

实验步骤 第一天:1、组织切片置于60℃烘烤1hr2、二甲苯1、2 分别浸泡15min,脱蜡3、水化:100% Etoh 10min X 295% Etoh 5min X 185% Etoh 5min X 170% Etoh 5min X 1注:以下步骤切勿让组织处于干燥状态!4、将切片置于修复盒,

免疫组化实验

实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水

旋振筛安装前的准备

  1、检查电机标牌是否与要求相符。  2、用500伏兆欧表测量绝缘电阻,其值应对定子绕组进行干燥处理,烘干温度不能超过120℃。  3、检查电机各紧固件,谨防松动。  4、检查电机表面有无损坏、变形。  5、检查是否转动灵活,若有异常,应排除。  6、检查电源,是否缺相,并空载运行5分钟。  安装

克隆载体的准备实验

            试剂、试剂盒 氯仿-异戊醇 酚:氯仿-异戊醇(25:24:1) 氯化锂 (LiCl 10mol L) 酚(Tris-饱和) TE 缓冲液

克隆载体的准备实验

试剂、试剂盒 氯仿-异戊醇酚:氯仿-异戊醇(25:24:1)氯化锂 (LiCl10mol L)酚(Tris-饱和)TE 缓冲液乙醇碱性磷酸酶平末端限制性内切酶和反应缓冲液克隆载体仪器、耗材 水浴锅真空干燥机 琼脂糖凝胶电泳设备和试剂实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿-异戊醇(24:1)酚

GSP融合蛋白的准备

GST Fusion Protein PrepItalics indicate optional steps especially useful for the analysis of untested proteins.GROWTH AND HARVESTING OF BACTERIAAdd 10

GST融合蛋白的准备

Preparation of Glutathione-S-Transferase (GST) Fusion ProteinsMargret B. Einarson and Elena N. Pugacheva Foxx Chase Cancer Center, Philadelphia, PA 19

克隆载体的准备实验

许多载体及其衍生物被开发出来用于克隆 PCR 产物,其中包括典型的 pBluescript 类载体。它们具有多克隆位点和简化的多克隆位点,PCR-Script Direct 质粒也是这样。简化的多克隆位点允许使用者把常用的限制酶位点整合到 PCR 引物中,同时还避免了相同的目标序列同时出现在质粒载体

免疫组化的操作步骤

1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,

免疫组化的操作步骤

1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,

免疫组化的操作步骤

一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加

免疫组化的判定分析

  从实验结果而言,免疫组化技术服务主要涉及抗体实验结果的描述与分析,图片的确定与选取,相关数据的提供,上述工作是免疫组化工作的重点内容,只有严格的实验设计,标准的实验操作,专业化的结果分析才能更好的满足客户的要求,这点对于形式为腹水,上清,培养液之类的抗体显得更为重要。关于上述服务内容应该在实验开

免疫组化的操作流程

实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程,主要有:脱蜡和水化,抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位

免疫组化的操作流程

实验概要本文介绍了免疫组织化学实验操作流程,主要有:脱蜡和水化,抗原修复及免疫组织化学染色等步骤。实验原理免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位

免疫组化的作用介绍

  标本  实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。  其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组

免疫组化的操作步骤

  一 免疫组化(SP法)操作步骤  1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行  2.缓冲液洗 3min/2 次。  3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。  4. 缓冲液洗 5min/

免疫组化的操作步骤

一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加

TOFD全解析08检测前准备硬件准备

  TOFD全解析-08-检测前准备-硬件准备   如果希望了解往期内容,请关注我们,在“往期回顾”中即可找到   前面把TOFD技术的基本概念介绍的差不多了,后面将针对检测对象进行合适的检测前准备。   1   主机的准备:   前面讲到了,采样率的概念,也提到了一个说法就是合理的采样率

TOFD全解析08检测前准备硬件准备

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TOFD全解析08检测前准备硬件准备

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ELISA试剂盒分析移液器使用时漏液的原因和验前准备工作

ELISA试剂盒为您介绍移液器使用时漏液的原因:(1)弹簧活塞是否正常。(2)枪头是否匹配。(3)如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题,可以先吸放几次液体,然后再移液。(4)如不使用,要把移液枪的量程调至zui大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。(5)定期清洗移液