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GST融合蛋白的准备

Preparation of Glutathione-S-Transferase (GST) Fusion ProteinsMargret B. Einarson and Elena N. Pugacheva Foxx Chase Cancer Center, Philadelphia, PA 19111Jason R. Orlinck Brigham & Women's Hospital, Boston, MA 02115Excerpted from Protein: Protein Interactions, Second EditionEdited by Erica A. Golemis and Peter D. AdamsABSTRACTGlutathione-S-Transferase (GST) fusion proteins have a wide range of a......阅读全文

相互作用克隆实验

实验方法原理 它需要一种编码诱饵蛋白的基因和用噬菌体表达载体,如 λgt 11 构建的适当的表达文库。编码诱饵蛋白的基因常用于在中合成重组融合蛋白。重组融合蛋白使用具放射性的 [32P] 作标记。由于 cAMP 依赖蛋白质激酶(蛋白质激酶 A,PKA)的识别位点被引入重组融合蛋白质,从而可通

相互作用克隆实验

相互作用克隆             实验方法原理 它需要一种编码诱饵蛋白的基因和用噬菌体表达载体,如 λgt 11 构建

相互作用克隆实验

实验方法原理它需要一种编码诱饵蛋白的基因和用噬菌体表达载体,如 λgt 11 构建的适当的表达文库。编码诱饵蛋白的基因常用于在中合成重组融合蛋白。重组融合蛋白使用具放射性的 [32P] 作标记。由于 cAMP 依赖蛋白质激酶(蛋白质激酶 A,PKA)的识别位点被引入重组融合蛋白质,从而可通过 PKA

GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒产品说明书

  GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   YIJI GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂是一种旨在使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白

GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒使用说明

主要用途YIJI GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂是一种旨在使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase K),标记纯化的目标融合蛋白,成为敏感探针的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适合于各

如何阅读基因载体图谱

  基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。   一、载体分类及载体组成元件   载体分类   1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体   病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细

如何阅读基因载体图谱

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小鼠β-actin基因的克隆表达(3)

(2)质粒的提取及酶切鉴定分析   质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行,然后进行双酶切鉴定。   管号 ① ② 质

Gateway技术:克隆、表达新方法

Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达一、一种更好的克隆方法Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)。这项强大的体

如何阅读基因载体图谱?(二)

二、选择和准备载体选择载体主要依据构建的目的,同时还要考虑载体中应有合适的限制酶切位点等。如果构建的目的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体。选用哪种载体,还是要结合目的基因及载体特点以实验目的为准绳。 载体选择主要考虑下述3点: 1、构建DNA重组体的目的,克隆扩增/表达表达,选择合适的

蛋白共沉淀检测实验

用蛋白A/G-琼脂糖 备择 用GST融合蛋白             实验方法原理实验材料 全细胞抽提物 试剂、试剂盒

如何做原核表达(prokaryotic expression)(一)

人们合成与生物相关的物质是从尿素开始的,1828年,德国化学家维勒人工合成了存在于生物体的这种有机物。在1960年我国科学家采用化学方法首次成功地合成了具有生物活性的蛋白质——胰岛素。随着内切酶的发现和基因工程技术的发展,人们发现用各种不同的载体在原核、真核系统中进行蛋白表达更为行之有效。而这其中大

蛋白纯化经验指南-3

56) 向您请教一个问题,我用pET28载体、宿主菌BL21(DE3)表达目的蛋白,目的蛋白的两端都带His-tag,蛋白的大小为37kD,在利用Ni-NTA纯化时总是在目的蛋白带旁边伴随一条带去除不了,请问有什么高招可以解决这个问题?!!!此外,该表达产物为包涵体,请问这种产物可不可以直接用来制备

核糖体失活展示系统实验

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实验材料 RTA 基因试剂、试剂盒 结合(或漂洗)缓冲液生物素琼脂糖洗脱缓冲液仪器、耗材 RNeasy™mini 试剂盒实验步骤 这里介绍的方法概括了表达载体的构建以及筛选功能蛋白的 RIDS 循环系统的构建。3.1 RIDS 表达载体的构建首先,需要准备含编码 T7 启动子、蛋白质文库、连接子

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