影响PCR的主要因素

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作,PCR自动热循环中影响因素很多,对不同的DNA样品,PCR反应中各种成份加入量和温度循环参数均不一致。现将几种主要影响因素介绍如下。 一、温度循环参数 在PCR自动热循环中,最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示,其变性、退火、延伸的条件是:94℃60s, 37℃60s, 72℃120s,共25~30个循环,扩增片段500bp。在这里,每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪内由混合液原温度变至所要求温度的时间需要30~60s,这一迟滞时间的长短取决于几个因素,包括反应管类型、壁厚、反应混合液体积、热源(水浴或加热块)以及两步骤间的温度差,在设置热循环时应充分给以重视和考虑,对每一仪器均应......阅读全文

影响PCR的主要因素

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作,PCR自动热循环中影响因素很多,对不同的DNA样品,PCR反应中各种成份加入量和温度循环参数均不

影响电泳的主要因素

影响电泳的主要因素为:1.电泳介质的pH值溶液的pH值决定带电物质的解离程度,也决定物质所带净电荷的多少.对蛋白质,氨基酸等类似两性电解质,pH值离等电点越远,粒子所带电荷越多,泳动速度越快,反之越慢。因此,当分离某一种混合物时,应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值,以利于各种蛋白质的有

影响PCR的主要因素(温度循环参数、引物设计与DNA聚合...3

4.RTth逆转录酶(rTth Reverse Transcriptase)目前逆转录-PCR(RT-PCR)的发展很快,所以对耐热的依赖于RNA的DNA多聚酶的研究也有进展。有实验表明Taq DNA多聚酶有依赖于RNA的DNA聚合酶活性,但活性较弱。Cetus公司于1991年推出一种rTt

影响PCR的主要因素(温度循环参数、引物设计与DNA聚合...1

PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析。引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工作,PCR自动热循环中影响因素很多,对不同的DNA 样品,PCR反应中各种成份加入量和温度循环参

影响PCR的主要因素(温度循环参数、引物设计与DNA聚合...2

1.Taq DNA聚合酶用Taq DNA聚合酶代替大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段是使PCR普及应用的关键。Klenow片段不能耐受95℃的双链DNA变性温度,所以每次循环都要加入新酶;而Taq DNA聚合酶可以耐受93~95℃的高温,避免了不断补加多聚酶的繁琐操作,同时使退火和

影响差热分析的主要因素

(1)气氛和压力的选择气氛和压力可以影响样品化学反应和物理变化的平衡温度、峰形。因此,必须根据样品的性质选择适当的气氛和压力,有的样品易氧化,可以通入N2、Ne等惰性气体。(2)升温速率的影响和选择升温速率不仅影响峰温的位置,而且影响峰面积的大小,一般来说,在较快的升温速率下峰面积变大,峰变尖锐。但

影响差热分析的主要因素

  差热分析操作简单,但在实际工作中往往发现同一试样在不同仪器上测量,或不同的人在同一仪器上测量,所得到的差热曲线结果有差异。峰的最高温度、形状、面积和峰值大小都会发生一定变化。其主要原因是因为热量与许多因素有关,传热情况比较复杂所造成的。一般说来,一是仪器,二是样品。虽然影响因素很多,但只要严格控

影响酶反应的主要因素

1、抑制剂的影响抑制剂是对酶反应速度有十分重要的影响。抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制。常用的抑制剂中不可逆抑制剂有2种,一种是专一地和特定(侧链氨基酸)基团反应的试剂;另一种是根据酶的作用机制修饰酶的特定位点的专一性试剂。2、pH值的影响酶反应是在一定的条件下进行的,酸、碱既能影响酶的稳定性,也能直

影响臭氧浓度的主要因素

   影响臭氧浓度的主要因素有   1、臭氧发生器的结构和加工精度;   2、冷却方式和条件;   3、驱动电压和驱动频率;   4、介电体材料;   5、原料气体中氧的含量及洁净和干燥度。   6、发生器电源系统的效率(效率高,热量转化少。);   臭氧是一种氧化性极强的不稳定气体,

影响血液粘度的主要因素

①内在因素:(1) 红细胞数量(2) 红细胞大小、形态(3)红细胞的变形能力:是由于高切变率是红细胞以个体形式存在。(4)红细胞的聚集性:是由于低切变率是红细胞主要以群体方式存在。(5)白细胞、血小板因素(6) 血浆因素②外在因素:温度、性别、年龄、渗透压、抗凝剂等。

影响颜色检测的主要因素

影响颜色检测的主要因素,颜色对于纺织产品来说是至关重要的,测定纺织品之间的色差在生产中有着重要的意义,尤其是印染厂中生产样与来样之间的色差质量管理的重要指标。过去颜色的检测和评定都是由丰富辨色经验的质量检验人员靠视觉来判定,有很大的主观因素在其中,经常会在供需双方间发生争执。从本世纪三十年代测色仪问

碳受影响的主要因素

碳受影响的主要因素:a.分析气流量流量的稳定性对红外碳硫仪是至关重要的,特别是对于碳数据的影响。一般碳结果高低与流量呈以下规律:流量值变低,碳数据就偏高,释放曲线偏低偏胖;流量值变高,碳数据就偏低,释放曲线偏高偏瘦。影响流量值变化的主要因素有:氧气压力的稳定性、气路通畅性(灰尘多少)、是否漏气及流量

影响差热分析的主要因素

差热分析操作简单,但在实际工作中往往发现同一试样在不同仪器上测量,或不同的人在同一仪器上测量,所得到的差热曲线结果有差异。峰的最高温度、形状、面积和峰值大小都会发生一定变化。其主要原因是因为热量与许多因素有关,传热情况比较复杂所造成的。一般说来,一是仪器,二是样品。虽然影响因素很多,但只要严格控制某

影响差热分析的主要因素

  (1)气氛和压力的选择   气氛和压力可以影响样品化学反应和物理变化的平衡温度、峰形。因此,必须根据样品的性质选择适当的气氛和压力,有的样品易氧化,可以通入N2、Ne等惰性气体。   (2)升温速率的影响和选择   升温速率不仅影响峰温的位置,而且影响峰面积的大小,一般来说,在较快的升

影响湿热灭菌的主要因素

  影响湿热灭菌的主要因素有:微生物的种类与数量、蒸汽的性质、药品性质和灭菌时间等。  (1)流通蒸气灭菌法:是指在常压条件下,采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法,灭菌时间通常为30-60分钟。该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌,但不能保证杀灭所有芽孢,是非可靠的灭菌方法。  (2)间歇

影响酶反应的主要因素

1.1、抑制剂的影响  抑制剂是对酶反应速度有十分重要的影响。抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制。常用的抑制剂中不可逆抑制剂有2种,一种是专一地和特定(侧链氨基酸)基团反应的试剂;另一种是根据酶的作用机制修饰酶的特定位点的专一性试剂。    1.2、pH值的影响  酶反应是在一定的条件下进行的,酸、碱既

影响差热分析的主要因素

(1)气氛和压力的选择 气氛和压力可以影响样品化学反应和物理变化的平衡温度、峰形。因此,必须根据样品的性质选择适当的气氛和压力,有的样品易氧化,可以通入N2、Ne等惰性气体。(2)升温速率的影响和选择 升温速率不仅影响峰温的位置,而且影响峰面积的大小,一般来说,在较快的升温速率下峰面积变大,峰变尖锐

影响密度测定的主要因素

   同种烃类,密度随沸点升高而增大。当沸点范围相同时,含芳烃越多,其密度越大;含烷烃越多,其密度越小。胶质的相对密度较大,其范围是1.01-1.07,因此石油及石油产品中,胶质含量越高,其相对密度就越大。    影响油品密度测定的因素主要是温度及体积的合理控制和正确测定,此外仪器的选用及不当操作

影响发酵的主要因素有哪些

酸度①一般需要在发酵前加酸或促进发酵产酸,否则有害微生物将大量繁殖;②含酸食品有一定的防腐能力,但有氧存在时表面也会有霉菌生长将酸消耗掉将失去防腐能力;③食品中酸度也会因蛋白质分解产生氨类物质而下降。酒精①具有防腐作用,主要取决于其浓度,按容积计12-15%发酵酒精能抑制微生物的生长。②一般发酵饮料

影响纯水质量的主要因素

 影响纯水质量的主要因素有三个,即空气、容器、管路。  在实验室中制取纯水,不难达到纯度指标。一经放置,特别是接触空气,其电导率会迅速下降。例如用铝酸按法测磷及纳氏试剂法测氨,无论用蒸馏水或离子交换水只要新制取的纯水都适用。一旦放置,空白值便显著增高,主要来自空气和容器的污染。  玻璃容器盛装纯水可

影响发酵的主要因素有哪些

酸度①一般需要在发酵前加酸或促进发酵产酸,否则有害微生物将大量繁殖;②含酸食品有一定的防腐能力,但有氧存在时表面也会有霉菌生长将酸消耗掉将失去防腐能力;③食品中酸度也会因蛋白质分解产生氨类物质而下降。酒精①具有防腐作用,主要取决于其浓度,按容积计12-15%发酵酒精能抑制微生物的生长。②一般发酵饮料

影响花药培养的主要因素

花药培养是用植物组织培养技术,把发育到一定阶段的花药,通过无菌操作技术,接种在人工培养基上,以改变花药内花粉粒的发育程序,诱导其分化,并连续进行有丝分裂,形成细胞团,进而形成一团无分化的薄壁组织——愈伤组织,或分化成胚状体,随后使愈伤组织分化成完整的植株。影响花药培养的因素包括以下5个方面。1、基本

影响PAM絮凝作用的主要因素

1) 絮凝剂的用量:最佳的絮凝剂用量是絮凝剂全部被吸附在固相粒子表面上,且絮块的沉降速度达到最大值。最佳用量随着絮凝剂的离子性质、分子量、悬浮液的pH值而变化,可用试验方法确定。当絮凝剂超过最佳用量时,絮凝效果反而下降。2) 絮凝剂分子量对絮凝的影响:絮凝剂分子量越大,絮凝效果越好。但分子量太大,难

影响基线平直度的主要因素

摘要: 滤光片或光学元件上有灰尘,会产生散射,而引起基线平直度变坏。 (l)滤光片或光学元件上有灰尘    滤光片或光学元件上有灰尘,会产生散射,而引起基线平直度变坏。(2)滤光片未安装好  因为不同波段要采用不同的滤光片,所以滤光片切换时会产生噪声,使基线平直度变坏。(3)光源(氘灯、钨灯)切

影响旋光仪的主要因素

旋光仪是测定物质旋光度的仪器。通过对样品旋光度的测量,可以分析确定物质的浓度、含量及纯度等。广泛应用于制药、药检、制糖、食品、香料、味精以及化工、石油等工业生产,科研、教学部门,用于化验分析或过程质量控制。溶剂的影响旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光

影响面筋品质的最主要因素

面筋常被人们做成各种各样的美食,吃起来美味可口。不知道大家有了解过这么好吃的面筋是怎么制作出来的吗?在面粉中加入适量水、少量的盐,搅匀搅拌,形成面团,再用清水反复搓洗,把面团中的淀粉和其它杂质全部搓出,剩下的部分就是面筋。其工艺其实非常简单,但要做出好吃的面筋就跟很多方面有关了,比如面粉的品质,搓揉

影响差热分析的主要因素介绍

  差热分析操作简单,但在实际工作中往往发现同一试样在不同仪器上测量,或不同的人在同一仪器上测量,所得到的差热曲线结果有差异。峰的最高温度、形状、面积和峰值大小都会发生一定变化。其主要原因是因为热量与许多因素有关,传热情况比较复杂所造成的。一般说来,一是仪器,二是样品。虽然影响因素很多,但只要严格控

影响密度测定的主要因素

  同种烃类,密度随沸点升高而增大。当沸点范围相同时,含芳烃越多,其密度越大;含烷烃越多,其密度越小。胶质的相对密度较大,其范围是1.01-1.07,因此石油及石油产品中,胶质含量越高,其相对密度就越大。   影响油品密度测定的因素主要是温度及体积的合理控制和正确测定,此外仪器的选用及不当操作都会影

影响气浮效果的主要因素

  气浮主要用于去除密度与水相近、无法自然沉降又难于自然上浮的悬浮杂质,具有分离效率高、设备简单等优点。气浮效果对出水水质至关重要,要想得到好的气浮效果,就必须认清气浮过程,全面分析能够引起出水水质变化的因素。图片来源于网络  1、污水流量  污水流量对处理效果的影响是不容忽视的,在溶气气浮机运行时

影响PCR及荧光PCR-的因素

   引物的设计和选择符合荧光PCR的探针并进行设计对于实时荧光PCR尤其重要。可以说,不合理的设计意味着绝对的失败。但是,好的设计并不等于好的实验结果,影响PCR和荧光PCR的因素非常多,下面择其重要进行介绍。    3.1 引物退火温度    引物的一个重要参数是熔解温度(Tm)。这是当50%的