DNAMarker产品选择指南

1.Marker选择标准 (1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。 (2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2.常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;3. 电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm,温度应低于30℃;4. marker上样量过多。请根据说明书选用合适上样量;5. 凝胶质量不好。建议使用质量较好的琼脂糖;此外,凝胶凝固......阅读全文

DNA电泳(agarose胶)

实验材料 DNA样品试剂、试剂盒 琼脂糖 电泳缓冲液溴化乙锭 上样缓冲液仪器、耗材 电泳仪电泳漕 透射紫外灯 胶带纸 紫外成像仪

卫星DNA的概念

卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在

ELECTROPHORESIS-OF-DNA-IN-POLYACRYLAMIDE-GELS

ELECTROPHORESIS OF DNA IN POLYACRYLAMIDE GELSGel SizesSmall:             165 x 130 mmMedium:         165 x 200 mmLarge:            165 x 260 mm5% Anal

胸腺DNA的制备

实验概要本实验介绍了浓盐法小牛胸腺DNA制备的原理及操作步骤。实验原理DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的,因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物(DNP)后,必须将其中的蛋白质除去。小牛胸腺,鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA,可作为提取DNA的良好材料。动物和植物组织的脱氧核糖核蛋

互补-DNA的定义

中文名称互补 DNA英文名称complementary DNA;cDNA定  义利用反转录酶以mRNA为模板合成的DNA。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞化学(二级学科)

DNA突变的种类

  基因突变可以是自发的也可以是诱发的。自发产生的基因突变型和诱发产生的基因突变型之间没有本质上的不同,基因突变诱变剂的作用也只是提高了基因的突变率。  按照表型效应,突变型可以区分为形态突变型、生化突变型以及致死突变型等。这样的区分并不涉及突变的本质,而且也不严格。因为形态的突变和致死的突变必然有

质粒DNA的纯化

聚乙二醇沉淀法质粒DNA氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取质粒DNA1)将核酸溶液所得]转入15mlCorex 管中,再加3ml 用冰预冷的5mol/L LiCl溶液,充分混匀,用合适转头于4℃下以10 000转/分离心10分钟。LiCl可沉淀高分子RNA。2)将上

分支DNA的定义

中文名称分支DNA英文名称branched DNA定  义特指一种人工合成的、由于在结构上整合了带有被保护羟基的核苷衍生物而形成的分支状的寡脱氧核糖核酸。基于分支DNA信号放大的检测法可用于对感染病毒的个体进行病毒量试验,以定量检测RNA或DNA的水平。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸

DNA-labeling-by-nick-translation

DNA labeling by nick translationreagents: DNA for labeling (concentration c > 150 ng/µl) modified nucleotides: Biotin-16-dUTP, Digoxigenin-11-dUTP, co

DNA杂交的意义

分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人DN

DNA配对的概念

中文名称DNA配对英文名称DNA pairing定  义一种由寡脱氧核苷酸单链与靶DNA的互补链杂交形成异源双链DNA的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

什么是DNA解旋酶?

DNA解旋酶(DNA helicase)通常为流体蛋白环,通过ATP水解产生的能量由解旋酶装载器装载到DNA单链上(单链穿过环中央),有3‘--5’或5‘--3’方向极性,该极性就是它结合的单链的极性。它像DNA聚合酶一样具有延伸性。与解旋酶装载器结合,装载到单链DNA上之前,DNA解旋酶是没有活性

质粒DNA提取实验

实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子,是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作,进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步:①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒

DNA纯化手册2

Key points to observe: a. Use a endA1- E. coli strain for plasmid propagation and isolation whenever possible. The instability of plasmids isolated fr

DNA修饰的概念

中文名称DNA修饰英文名称DNA modification定  义DNA合成后,通过一系列化学加工使其结构发生某些改变。如DNA的甲基化等。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

dna胶怎么配

就是琼脂糖凝胶,要是分子量大的DNA就配1%的胶,就是取1g琼脂糖+100ml的TAE缓冲液,微波炉高火加热至沸腾(沸腾2-3次),降温到50℃左右时加入EB,混匀后倒入制胶架中,一小时以后就可以使用了。琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂

线状DNA的定义

中文名称线状DNA英文名称linear DNA定  义DNA的一种构象。同时具有游离3`端和5`端的线性长链DNA分子。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

什么是DNA测序?

DNA测序(DNA sequencing,或译DNA定序)是指分析特定DNA片段的碱基序列,也就是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)与鸟嘌呤(G)的排列方式。快速的DNA测序方法的出现极大地推动了生物学和医学的研究和发现。在基础生物学研究中,和在众多的应用领域,如诊断,生物技术,法医生物学,

DNA-复制的过程

DNA 复制是一个复杂而精细的过程,主要包括以下几个阶段:起始在复制起点,一些特殊的蛋白质识别并结合到特定的 DNA 序列上,形成复制起始复合物。解旋酶解开双螺旋结构,将两条链分开,形成“复制叉”。单链结合蛋白(SSB)结合到单链 DNA 上,防止单链重新形成双螺旋,并保持其伸展状态,以利于复制。延

质粒DNA的提取

实验概要        通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。实验原理         碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA

DNA-序列分析技术

DNA序列分析技术可用于:(1)分析物种的遗传多样性;(2)鉴定新的物种;(3)用于比较基因组学。实验方法原理本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDe

DNA发卡结构特点

发卡结构(hairpin structure):这些结构是由于DNA单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇,形成氢键结合而成的,称为发卡结构。又译:发夹结构。

动物DNA提取实验

标签:                                    动物肝脏                                    DNA                                    提取动物肝脏DNA提取可以:(1)用于法医学鉴定;(2)

卫星DNA的用途

体细胞克隆卫星DNA可以把某一个体的遗传物质完整地传递下去,因而它对于保存并传播优良个体和珍稀濒危动物的基因组具有重大意义。确定异种重构胚的核是否来自于供体的核就显得异常关键。中国科学院昆明动物研究所丁波、张亚平等人建立了一种从早期囊胚中提取DNA以进行核内和核外DNA分析的方法。用这种方法从异种克

DNA序列测定技术

DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam-Gilbert DNA化学降解法测序策略目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都是同样生成互相独立的若干

DNA电泳(agarose胶)

DNA琼脂糖凝胶电泳             实验方法原理 利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场

DNA的提取实验

            实验方法原理 酚为有效的蛋白质变性剂,并且饱和的酚与水相有效的分开.因此,在含核酸的样品加入酚,可将样品中的蛋白质变性后形成沉淀层,位于水相与有机相的界画,从而达到纯化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚层中含有10-15%的水

DNA重排的概念

DNA重排,是基因活性调节的一种方式。这种调节主要是根据DNA片段在基因组中位置的变化,即从一个位置变换到另一个位置,从而改变基因的活性。

变性DNA的定义

中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定  义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

DNA浓度怎么测

一般最简单的方法是用比如nanodrop这样的紫外分光法进行检测,还有用染料法的比如qubit,还有荧光定量的,但是这个是要特定DNA的。