DNAMarker产品选择指南
1.Marker选择标准 (1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。 (2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2.常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳缓冲液陈旧。电泳缓冲液多次使用后,离子浓度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果,建议经常更换电泳缓冲液;3. 电泳条件不合适。电泳时电压应不超过20V/cm,温度应低于30℃;4. marker上样量过多。请根据说明书选用合适上样量;5. 凝胶质量不好。建议使用质量较好的琼脂糖;此外,凝胶凝固......阅读全文
什么是自在DNA?
中文名称自在DNA英文名称selfish DNA定 义除能复制自身外,不具有其他功能的DNA片段。泛指间隔DNA及卫星DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
DNA纯化的方法
DNA纯化首先利用琼胶电泳将不同分子量的DNA片段分开,将某一特定分子量区域的琼胶切下,利用DNA extraction kit将DNA从琼胶中溶出并浓缩.实验材料( 6X gel-loading dye:15% Ficoll 400, 0.25% bromophenol blue,0.25% xy
DNA包装的定义
中文名称DNA包装英文名称DNA packaging定 义常指对病毒的核酸核心用蛋白质外壳进行包裹形成成熟的病毒颗粒的过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
DNA杂交的意义
分类学上不同物种的DNA分子之间可以进行分子杂交,但是,远缘物种的DNA分子之间进行杂交分子的可能性远比近缘物种的要小得多。例如,细菌与真核细胞DNA分子之间形成杂交分子的可能性很小;不同细菌的 DNA分子之间杂交时,能形成某些互补片段;人的DNA分子与小鼠的 DNA分子之间杂交时,只有少量的人
DNA合成仪简介
设计用于合成结构上类似DNA或RNA的寡核苷酸的自动化仪器。一般应用于固相合成法,每次将一个核苷酸加到所接长的寡核苷酸链上,加入每一个核苷酸都利用相同的化学反应与相应的嘌呤或嘧啶碱基衍生物作用。所用化学反应和操作细节随不同的仪器而改变,最广泛应用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
血液DNA的提取
Part A: Purifying nuclear pellets.1) Add 50-60μl fresh, packed red blood cells (RBC) to 700μl PBS. Mix by inversion.2) Add 700-800μl Lysis buffer. Clo
互补-DNA的定义
中文名称互补 DNA英文名称complementary DNA;cDNA定 义利用反转录酶以mRNA为模板合成的DNA。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞化学(二级学科)
端粒DNA主要组成
端粒DNA是由简单的DNA高度重复序列组成的,染色体末端沿着5'到3' 方向的链富含 GT。在酵母和人体中,端粒序列分别为C1-3A/TG1-3和TTAGGG/CCCTAA,并有许多蛋白与端粒DNA结合。端粒DNA主要功能有:第一,保护染色体不被核酸酶降解;第二,防止染色体相互融合;
DNA定点突变实验
DNA定点突变可用于:(1)研究蛋白质相互作用位点的结构、改造酶的不同活性或者动力学特性;(2)改造启动子或者DNA作用元件;(3)提高蛋白的抗原性或者是稳定性、活性、研究蛋白的晶体结构,以及药物研发、基因治疗等等方面。实验方法原理定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以
线粒体DNA的特性
线粒体DNA是线粒体中的遗传物质,线粒体能为细胞产生能量(ATP),是在细胞线粒体内发现的脱氧核糖核酸特殊形态。线粒体是为细胞提供能量(ATP)的细胞器。一个线粒体中一般有多个DNA分子。
无用DNA的概念
中文名称无用DNA英文名称junk DNA定 义基因组中不表达的因而功能不明的DNA。但已有证据表明这些无用DNA是有其各种不同功能的。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
DNA电泳(agarose胶)
DNA琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场
开环DNA的定义
如果质粒DNA两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,形成松弛型的环状分子,称开环DNA(Open circular DNA, 简称 ocDNA)。
结合DNA的酶
核酸酶和连接酶:核酸酶是能够切割DNA链的酶,因为它们催化磷酸二酯键的水解。从位于DNA链末端的核苷酸开始水解DNA的核酸酶称为核酸外切酶。另一方面,直接切入DNA链的那些是内切核酸酶。分子生物学中使用最广泛的核酸酶,称为限制性内切酶,以切割特定序列的DNA。在自然界中,这种酶通过在进入细菌细胞时消
DNA-EXTRACTION-PROCEDURE--GENERAL
Grow cells overnight in 500 ml broth medium.Pellet cells by centrifugation, and resuspend in 5 ml 50 mM Tris (pH 8.0), 50 mM EDTA.Freeze cell suspensi
松弛DNA的定义
中文名称松弛DNA英文名称relaxed DNA定 义呈非超螺旋状态的环状双链DNA分子。如质粒或病毒DNA基因组,通常是超螺旋结构,在酶或者物理化学因子的作用下双链核酸分子中一条单链出现断裂并导致超螺旋结构破坏,形成带切口的松弛DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学
DNA的提取方法
一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,
DNA螺距的定义
中文名称DNA螺距英文名称DNA pitch定 义DNA分子中双螺旋沿螺旋轴旋转一周所平移的直线距离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
Preparation-of-Sonicated-Human-DNA
Purpose:To break up high molecular weight human placental DNA into fragment sizes of 500 bp or less which can be used as competitor DNA in Southern an
植物DNA提取实验
实验方法原理 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化出DNA。实验材料 幼嫩的植物材料试剂、试剂盒 液氮CTAB抽提缓冲液NaACTris-HCl EDTA氯仿异戊醇TE buffer仪器、耗材 瓷研钵离心管离心机实验步骤 一
几种DNA定量方法
Quantitation of DNAFluorescent quantitationWear gloves and goggles protecting from EtBr and UV lightWith an EDP (dilute mode) pick up 9 µl TE and 1 µl
大型海豚DNA研究
弗林德斯大学的综合研究呼吁更多的保护和政策努力来保存适应性DNA多样性,并协助这些海豚群体之间的连接。这将支持长期的基因流动和适应不断变化的栖息地——包括受气候变化和人类企业影响的海洋条件。弗林德斯大学的研究人员安Andrea Barceló——该研究的第一作者,刚刚发表在BMC Ecology a
接头DNA的定义
接头DNA(adaptor DNA):一段短的含酶切位点并能与钝性末端或粘性末端匹配的人工合成DNA片段。
质粒DNA的转化
实验概要本实验将人Bcl-2重组质粒转化DH5α扩增菌,转化后在含Amp的培养基上进行筛选,生长的菌落即为含重组质粒的工程菌。含人Bcl-2重组质粒的DH5α菌用于质粒DNA的扩增,获得的质粒将作为限制性内切酶的酶切底物DNA。实验原理转化是将外源DNA分子导入到受体细胞,使之获得新的遗传特性的一种
Molecular-Analysis-and-Results--DNA
Theory of CGHComparative genomic hybridization (CGH) is a fairly new molecular cytogenetic technique that allows detection of DNA sequence copy number
DNA-序列分析技术
实验方法原理 本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDeoy TM Terminator
DNA序列测定技术
DNA序列测定技术序列测定的技术和策略Sanger双脱氧链终止法Maxam-Gilbert DNA化学降解法测序策略目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化学降解法。虽然其原理大相径庭,但这两种方法都是同样生成互相独立的若干
DNA-Extraction-from-Tissue
实验概要DNA extraction from tissue.主要试剂Extraction buffer100 mM Tris-HCl (pH 8.0) 100 mM EDTA (pH 8.0) 100 mM Na-Phosphate (pH 8.0) 1.5 M NaCl1% CTAB
植物DNA提取原理
通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三
DNA裂解分析实验
琼脂糖凝胶电泳 个体核的PI荧光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 实验材料 细胞