蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段，如层析、叫泳等。 1.1 高效液相色谱（HPLC） HPLC的出现为肽类物质的分离提供了有利的方法手段，因为蛋白质、多肽的HPLC应用与其它化合物相比，在适宜的色谱条件下不仅可以在短时间内完成分离目的，更重要的是HPLC能在制备规模上生产具有生物活性的多肽。因此在寻找多肽类物质分离制备的最佳条件上，不少学者做了大量的工作。如何保持多肽活性、如何选择固定相材料、洗脱液种类、如何分析测定都是目前研究的内容。 1．1．1 反相高效液相色谱（RP-HPLC） ......阅读全文
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方
蛋白质、多肽提取分离
1 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物
蛋白质与多肽提取分离方法2
1.1.7 灌注层析（Perfusion Chromatography，PC）PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法，固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多，适合于不同分子量的多肽分离
蛋白质与多肽提取分离方法3
1．3．4胶束电动毛细管层析（Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC）MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂，如SDS，使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽，阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之
蛋白质与多肽提取分离方法1
1 分离方法采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析
细胞总蛋白质的分离提取
细胞器是一种动态的结构，如内质网、细胞核和高尔基体等，其蛋白质组成除了驻留蛋白质之外，还包括穿梭蛋白质和瞬间相互作用的蛋白质。对于这些组成成分的研究，即亚细胞蛋白质组研究将有助于对这些蛋白质做全面的挖掘，从而对细胞器的功能作深入的阐述。蛋白质提取与制备具体操作方法如下：一、材料的选择早年为了研究的方
现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用
摘要：蛋白质是生物体的重要组成部分，在现代生物制药领域有着重要的作用，本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词：蛋白质 反胶束萃取 双水相萃取 电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展，尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生
蛋白质的提取及粗分离实验
分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提取及初步分离。实验方法硫酸铵盐析法实验方法原理分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行
蛋白质的提取及粗分离实验
硫酸铵盐析法 实验方法原理 分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白。本实验以新型基因
解析多肽分离实验
CE 分离来自复合体混合物如蛋白酶解产物的特定多肽尤其有用。以下的方案阐述使用低压样品注射的 P/ACE 5000 CE 仪器（Beckman） 的用法。但其他仪器也可以依据制造商的操作指南进行同样的分离。实验材料多肽混合物试剂、试剂盒0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(p
解析多肽分离实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 多肽混合物
解析多肽分离实验
实验方法原理 实验材料 多肽混合物试剂、试剂盒 0.05 mol／L 和 0.25 mol／L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol／L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器实验步骤 1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管：10 倍柱体积的 0.1 m
反相高效液相层析实验_多肽和蛋白质的分离
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用10~15
蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞，上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆，上部1/4容积
蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞，上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆，上部1/4容积
关于分离纯化多肽、蛋白质的分析方法亲和层析的介绍
AC 是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲和性而分离物质的层析方法。自1968 年Cuatrecasas 提出亲和层析概念以来，在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合，如抗原-抗体、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸与其互补链等等。对多肽类物质分离目前主要应
蛋白质多肽Iodogen碘化法
1．原理 用Iodogen为氧化剂，对蛋白质和多肽抗原进行碘化标记，把125I直接引进分子中的酪氨酸残基上。标记过程中被标记样品不与Iodogen混合，标记后取出样品即停止反应，不使用任何还原剂。 2．方法 （1）标记之前，先把Iodogen溶于有机溶剂，涂于管底，并使之干燥。 （2）标记时，
多肽和蛋白质的区别
一方面是多肽中氨基酸残基数较蛋白质少，一般少于50个，而蛋白质大多由100个以上氨基酸残基组成，但它们之间在数量上也没有严格的分界线，除分子量外，还认为多肽一般没有严密并相对稳定的空间结构，即其空间结构比较易变具有可塑性，而蛋白质分子则具有相对严密、比较稳定的空间结构，这也是蛋白质发挥生理功能的基础
多肽与蛋白质的区别
多肽：通常由10~100氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，它们的分子量低于10，000Da（Dalton，道尔顿），能透过半透膜，不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽（小分子肽）；10~50个氨基酸组成的肽称为多肽；由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质。蛋
自动多肽/蛋白质测序仪
2007年实验室对蛋白质测序仪的需求 Edman降解法是测定蛋白质序列的经典方法，该方法由瑞士生物化学家佩尔·维克托于1950年创立。Edman降解法通常是以周期的形式来表征。对于一个完整的周期，异硫氰酸苯酯标记上指定肽段的N末端，环化，之后被标记的氨基酸在酸性条件下从肽链中游离出
核酸提取分离方法
核酸提取分离方法核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。传统的方法一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。商业化试剂盒方法提取核酸，比较经典的是采用离心柱法，将硅胶膜固定在离心管中，通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜，核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用还能避免试剂污
胰酶分离提取
一、原理与目的提取制备酶的经典方法，多采用硫酸铵分级沉淀，胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀，其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取，最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定，可在低温下储存较长的时间而不失活；低与此PH酶易变性；高于PH5时，酶易自溶而失活
中药提取分离方法
为提高中药质量、改变传统中药剂型“大、黑、粗”的状态、让中药步入国际市场,一些现代高新工程技术正在不断地被借鉴到中药生产中来,一方面使中药生产加符合传统的中医药理论,确保用药的质量要求,另一方面也提高了现有中草药资源的利用率。笔者拟对几种研究和应用较多且发展前景广阔的中药提取分离技术作一综述。1 中
mRNA提取、分离纯化
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
核酸－活性多肽及递质的提取方法
核酸分为两大类：一类为核糖核酸（RNA），另一类为脱氧核糖核酸（DND）。核酸的分子量极大，人数万致亿万。核酸是两性化合物，在一定的等电点。溶于水，其水溶液呈酸性，不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别，有一定浓
核酸－活性多肽及递质的提取方法
核酸分为两大类：一类为核糖核酸（RNA），另一类为脱氧核糖核酸（DND）。核酸的分子量极大，人数万致亿万。核酸是两性化合物，在一定的等电点。溶于水，其水溶液呈酸性，不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别，有一定
蛋白质的单向SDS凝胶电泳实验——用Tris缓冲液分离多肽
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDSTris·Cl仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1. 参照“Laemmli凝胶电泳法”步骤1~4，配制并灌制分离胶。2. 参照“Laemmli凝胶电泳法”步骤5~7，配制并灌制积层胶，但在移去分离胶顶层覆盖的异丁醇 时，以2×Tris·Cl/SDS，pH8.8而不用1
蛋白质分离实验_分离未知－pI－蛋白质
用 CE 进行 IEF分离是选择随后用于在非衍生毛细管柱上分离蛋白的缓冲液系统的有效的第一步。如果没有检测到蛋白质，可能是被吸收到柱的硅表面。在离子去垢剂如 SDS 存在的情况下重复分离过程，这样就会用负电荷包被蛋白质从而阻止吸收。但是，这意味着蛋白质只能依据大小的不同而进行分离。知道蛋白质的 pI
蛋白质的提取及粗分离实验——硫酸铵盐析法
分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提取及初步分离实验方法原理分离纯化蛋白质，首先要从原材料中提取目的蛋白，然后通过粗分离的方法除去大量杂质，最后进行精细分离，得到目的蛋白
多肽物质分离与分析方法研究（二）
1.2 亲和层析(Affinity Chromatography,AC) AC是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲合性而分离物质的层析方法。自1968年Cuatrecasas提出亲和层析概念以来，在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合，如抗原-抗体、酶-催化底物