多酚氧化酶(PPO)的分离提取

一、原理与目的多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶,植物受到机械损伤和病菌侵染后,PPO催化酚与O2氧化形成醌,是组织形成褐变,以便损伤恢复,防止或减少感染,提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用,所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应,因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联,起到末端氧化酶的作用。PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌,邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨基酸等作用生成高分子络合物而导致褐色素的生成,色素分子量愈高,颜色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。本实验将采用马铃薯为主要材料,通过组织细胞破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得PPO的粗酶液。通过本项实验,学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法,掌握相关仪器设备的操作使用,以及蛋白质的提取、分离的系统技术。二、材料与试......阅读全文

PPO粗酶液的纯化

一、原理1.葡聚糖凝胶Sephadex G-200凝胶柱层析 利用大分子不能进入凝胶颗粒内部 最先流出柱外,而小分子物质进入凝胶颗粒内部,流速慢而最后流出柱外,凝胶层析法能将不同分子大小的物质分离开。(G-200能分离800-80000D分子量的蛋白质)2.利用离子交换法,选取DEAE-阴离子纤维素

关于外植体的所处状态和存活条件介绍

  外植体取材的不同状态具体表现为外植体生理状态、取材部位、取材时期、外植体的大小及受伤程度、外植体预处理等。幼龄材料比成龄材料褐变轻, 这可以用幼龄材料的酚类化合物含量少, 而成龄材料多来解释。平吉成在研究小金海棠、八楞海棠和山定子刚生成的实生苗上切取茎尖进行组培的试验中, 发现接种后褐变很轻。高

福林酚法检测提取物的总酚含量的原理

多酚类化合物在碱性溶液中,钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化,自身被还原(使W6+变为W5+)生成蓝色的化合物,蓝色的深浅程度与含酚基团的数目成正比。如果试样中含有其它分类化合物或其他还原物质,也会被同时测定。

酶的提取和分离纯化

(一)细胞破碎处理 许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指

酶的提取和分离纯化

  (一)细胞破碎处理  许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用

叶绿体色素的提取与分离

植物叶绿体色素主要有三类:1)叶绿素 2)类胡萝卜素 3)藻胆素。高等植物叶绿体中含有前两类,藻胆素仅存在于藻类植物中。实验方法原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(

酶的提取和分离纯化

  (一)细胞破碎处理   许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法

叶绿体色素的提取与分离

一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等

叶绿体色素的提取与分离

一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等

胶原蛋白的提取分离介绍

由于胶原是细胞外间质成分,在体内以不溶性大分子结构存在,并与蛋白多糖、糖蛋白等结合在一起,因此胶原的制备包括材料的选择、预处理、酸碱酶盐水法提取、不同类型胶原的分离和纯化。

叶绿素的提取和分离方法

提取叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里,室温保持在25℃。提取步骤如下:(1) 取1000克新鲜的绿叶,在韦氏搅切器中粉碎。(2) 将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取,直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。(3) 将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100

蓝莓中可萃取多酚与不可萃取多酚对巨噬细胞的研究

多酚是植物体内复杂的酚类次生代谢产物,具有多元酚结构,主要存在于植物的皮、根、叶、壳及果肉中。蓝莓中含有大量多酚类物质,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。传统的多酚提取方法主要集中在可萃取多酚(EPP),而忽视了不可萃取多酚(NEPP)。本文研究了蓝莓中EPP和NEPP的提取、分离纯化方法和组成,并进

蓝莓中可萃取多酚与不可萃取多酚对巨噬细胞的研究

多酚是植物体内复杂的酚类次生代谢产物,具有多元酚结构,主要存在于植物的皮、根、叶、壳及果肉中。蓝莓中含有大量多酚类物质,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。传统的多酚提取方法主要集中在可萃取多酚(EPP),而忽视了不可萃取多酚(NEPP)。本文研究了蓝莓中EPP和NEPP的提取、分离纯化方法和组成,并进

不同冻结方式对南美白对虾品质的影响美国FTC质构仪

  本研究选取新鲜的南美白对虾,通过 4 种不同冻结方式( 静止空气冻结、液体浸渍冻结、真空包装联用静止空气冻结和真空包装联用液体浸渍冻结) 处理,研究不同冻结方式对南美白对虾品质的影响,探索适合南美白对虾的冻结工艺。   实验样品:南美白对虾购于浙江宁波象山某海水养殖场,选取体表无损伤,长( 1

使用白度测定仪探索提高面粉白度的新途径

一直以来,面粉的白度被认为是面粉品质的一个重要指标,也可以利用它来反映小麦的加工精度,小麦的白度可以使用白度测定仪来进行测定,因此提高面粉的白度,对于小麦的生产来说,是非常重要的事情。在小麦粉的实际加工过程中,人们使用白度测定仪检测发现,优化制粉工艺、面粉组分及后处理和原粮品种的选育等,都可以帮助提

卵清蛋白分离提取

一、实验目的与原理鸡卵粘蛋白存在于鸡蛋清中,对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,高纯度的鸡卵粘蛋白抑制胰蛋白酶的分子酶的分子比为1:1。鸡卵粘蛋白在中性或酸性溶液中对热和高浓度的脲都是相当稳定的,而在碱性溶液中较不稳定。由于鸡卵粘蛋白对胰蛋白酶有强烈的抑制作用,因此可以用鸡卵粘蛋白做亲和配基配制纯化胰酶的亲

酵母RNA提取与分离

一、目的:学习稀碱法提RNA的原理与技术。二、原理:由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也各异,一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验室最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中,向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析

概述多酚的基本功效

  氧化损伤是导致许多慢性病,如心血管病,癌症和衰老的重要原因。多酚的抗氧化功能可以对这些慢性病起到预防作用。  巧克力中的多酚是很强的抗氧化剂。它可以抑制LDL胆固醇氧化(LDL胆固醇,即“坏胆固醇”是血中的“杂质”。它可以引起动脉硬化、冠心病和心肌梗死等疾病。  巧克力中的多酚还可以延长人体内其

关于多酚的常见形式介绍

  可可多酚  具有增强免疫力的功效,它还有与阿司匹林相似的抗炎作用,在一定浓度下可以降低血小板活性,转移自由基在血管壁上的沉积,并能降低血液中的胆固醇水平,因而具有预防心脑血管疾病的功能。  葡萄多酚  降低低密度脂蛋白胆固醇,抑制血管内皮细胞增殖,保护血管平滑肌细胞,抑制血小板凝集,促进纤维蛋白

面粉白度测定仪分析面粉白度与面条白度的关系

  面粉白度测定仪分析面粉样品平均亮度值为89197,大于其他各时段面条及煮后面条的亮度值。面粉样品白度平均值为78.27,极差及变异系数均大于色彩色差仪测定得到的色泽L值。面片在静置0h、2h、24h的色泽依次变深,颜色逐渐变暗。面条制作后24hL值、b值和a值变异系数较大,主要因为面条放置过程中

鱼酚氧化酶(PO)酶联免疫分析(ELISA)

鱼酚氧化酶(PO)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定鱼血清,血浆,及相关液体样本中酚氧化酶(PO)的活性。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼酚氧化酶(PO)水平。用纯化的鱼酚氧化酶(PO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包

虾酚氧化酶(PO)酶联免疫分析(ELISA)

虾酚氧化酶(PO)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定虾血清,血浆,及相关液体样本中酚氧化酶(PO)的活性。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中虾酚氧化酶(PO)水平。用纯化的虾酚氧化酶(PO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包

中国热科院在胡椒过氧化物酶的分离、纯化及特性研究等方面取得新进展

近日,中国热科院香饮所在胡椒过氧化物酶(POD)的分离、纯化及特性研究等方面取得新进展,首次从胡椒鲜果中成功分离获得POD。研究发现,该酶对邻苯三酚具有较高的底物亲和力。此项研究为进一步解析POD的酶学性质和分子结构,以及探索其在生物技术和工业领域中的应用奠定了坚实基础。胡椒作为全球最重要的香料之一

小麦面粉白度相关问题解析

    小麦面粉白度与面制食品品质关系密切,是非常重要的品质指标。面条是中国北方人民的传统主食,消费数量极大。面条的色泽是面条感官品质评价的重要指标,评分中占很大的比重,色泽越白越好。面粉白度有专门的仪器进行测定,如白度测定仪。有研究报道影响面条白度的因素有蛋白质含量、面粉白度、面团吸水率、籽粒硬度

膜分离提取法提取黄酮类物质的介绍

  膜分离技术也是一种常用的辅助提取技术,其中超滤法作为唯一能用于分子级别的分离方法广泛的应用于黄酮类化合物的提取分离。利用超滤技术分离纯化黄酮化合物最大的优点是操作简便、无需加热、不破坏活性成分的结构,纯化和浓缩一步完成,超滤装置还可反复使用。于涛等利用膜分离方法在对影响超滤效果的工艺条件研究中,

白度仪对高白度小麦品种的研究培育

      面粉的白度关系到食品品质的问题,是面制食品重要的品质指标。但是,小麦面粉受很多因素的影响,比如小麦遗传规律和环境因素都是十分有影响力的影响因素。高白度小麦的选育和改良应在了解其遗传规律的基础上,收集和筛选高白度小麦种质资源,并结合现代生物技术进行选育和改良。同时,加强栽培措施的研究,使小

大鼠肝rRNA的提取与分离

试剂、试剂盒 大鼠肝脏 苯酚 -甲酚混合液 萘 1.5-二磺酸溶液 洗涤液 A 洗涤液 B 乙醇溶液 三异丙基萘磺酸钠 无水乙醇实验步骤 一 材料与设备1)大鼠肝脏 :大鼠用颈部击打法处死 ,取出肝脏 ,立即置于液氮屮 ,备用    2)苯酚 -甲酚混合液 :将 500 g 苯酚(须重结晶)及 70

大鼠肝rRNA的提取与分离

大鼠肝经匀浆,离心取上清液,用苯酚、m-甲酚混合液提取 RNA。在萘 1,5-二磺酸的存在下,可使 rRNA 与 mRNA 等分离,得到纯 rRNA试剂、试剂盒大鼠肝脏苯酚 -甲酚混合液萘 1.5-二磺酸溶液洗涤液 A洗涤液 B乙醇溶液三异丙基萘磺酸钠无水乙醇实验步骤一 材料与设备1)大鼠肝脏 :大

大鼠肝rRNA的提取与分离

            试剂、试剂盒 大鼠肝脏  苯酚 -甲酚混合液   萘 1.5-二磺酸溶液     洗涤液 A       洗涤液 B    

酶的提取和分离纯化方法

许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎开来。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶