多酚氧化酶(PPO)的分离提取
一、原理与目的多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶,植物受到机械损伤和病菌侵染后,PPO催化酚与O2氧化形成醌,是组织形成褐变,以便损伤恢复,防止或减少感染,提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用,所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应,因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多酚氧化酶也可与细胞内其他底物氧化相偶联,起到末端氧化酶的作用。PPO的存在是水果、蔬菜褐变及营养丧失的主要原因之一。PPO氧化内源的酚类物质生成邻醌,邻醌再相互聚合成醌或蛋白质、氨基酸等作用生成高分子络合物而导致褐色素的生成,色素分子量愈高,颜色愈暗。多酚氧化酶活性高低也是马铃薯解除休眠的指标之一。本实验将采用马铃薯为主要材料,通过组织细胞破碎匀浆、过滤、离心、硫酸铵沉淀、透析等步骤获得PPO的粗酶液。通过本项实验,学习和了解蛋白质的提取、分离的基本原理和方法,掌握相关仪器设备的操作使用,以及蛋白质的提取、分离的系统技术。二、材料与试......阅读全文
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材UV-1206UV-1
植物体内多酚氧化酶活性的测定实验
实验方法原理 多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使一元酚和二元酚氧化产生醌。用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算出多酚氧化酶的活力和比活性。反应式如下:.实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 聚乙烯吡咯烷酮磷酸缓冲液磷酸缓冲液和度硫酸铵儿茶酚三氯乙酸仪器、耗材 UV-1206
紫外可见分光光度计检测多酚氧化酶酶活性
多酚氧化酶(PPO)是一类由核基因编码在细胞质中合成的含铜质体的金属酶,其作用机理在于铜的氧化-还原作用。大麦中的多酚物质经过PPO的催化氧化后,具有单宁性质,易和蛋白质起交联作用而沉淀出来,进而影响啤酒的色泽、泡沫、风味和非生物稳定性。大麦中部分PPO以“潜伏”状态存在,在浸麦过程中,可通过去除一
多糖多酚植物总RNA快速提取试剂提取水稻胚乳总RNA
实验概要采用TAKARA的试剂提取水稻胚乳,主要是后期的胚乳RNA量偏少,不易提取!实验步骤1. 称量100mg的新鲜或者超低温冻结的植物RNA提取样品,迅速转移至用液氮预冷的研钵中,用研杵研磨组织,其间不断加入液氮,直至研磨成粉末状。2. 向研钵中加入1000μL RNAiso-mate for
单宁酶及多酚氧化酶对饲料中抗营养因子的作用
单宁是水溶性多酚类物质。主要存在于高粱和豆科子实中。据报道,单宁与胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反应,降低蛋白质和碳水化合物的利用率。单宁也可以与金属离子等化合物形成沉淀,还可以与维生素B12形成络合物而降低其利用率。 单宁及棉酚是阻碍高粱和棉粕(饼)大量使用的主要因素。现在多用微生物发酵法去除单
单宁酶及多酚氧化酶对饲料中抗营养因子的作用
单宁是水溶性多酚类物质。主要存在于高粱和豆科子实中。据报道,单宁与胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反应,降低蛋白质和碳水化合物的利用率。单宁也可以与金属离子等化合物形成沉淀,还可以与维生素B12形成络合物而降低其利用率。 单宁及棉酚是阻碍高粱和棉粕(饼)大量使用的主要因素。现在多用微生物发酵法去除单
单宁酶及多酚氧化酶对饲料中抗营养因子的作用
单宁是水溶性多酚类物质。主要存在于高粱和豆科子实中。据报道,单宁与胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反应,降低蛋白质和碳水化合物的利用率。单宁也可以与金属离子等化合物形成沉淀,还可以与维生素B12形成络合物而降低其利用率。 单宁及棉酚是阻碍高粱和棉粕(饼)大量使用的主要因素。现在多用微生物发酵法去除单
棉酚的提取方法
冷浸法:称取棉根皮粉末5g,加入乙醚12。5ml,密封,冷浸12h,抽滤,滤渣再冷浸1h,用溶剂10ml,二次抽滤,合并滤液,减压浓缩至10ml。回流法:称取棉根皮粉末5g,加入乙醚12。5ml,回流提取4h,抽滤,减压浓缩至10ml。先冷浸后超声法:称取棉根皮粉末5g,加入乙醚12。5ml,先冷浸
PPO活性测定
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.
PPO活性测定
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.
PPO活性测定
一、原理与方法PPO催化各种酚与O2氧化为醌。本实验是采用邻苯二酚为底物,在0.2M磷酸氢二钠-0.1M柠檬酸缓冲液PH5.8的反应体系中,PPO催化邻苯二酚形成褐色的醌,在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化,通过OD值上升的读数变化确定PPO的酶活大小。其方法是:在含有4mlPH5.
紫外可见分光光度计在食品酶分析中的应用
酶对食品加工的影响 酶是生物活细胞产生的一类具有催化功能的蛋白质。酶除了具有高的催化效率特性外,还具有很高的专一性,利用它能选择性地将个别食品组分改性,而不影响到其它组分。因此,酶在食品科学中相当重要,通过酶的作用能引起食品原料的品质发生变化,也能在比较温和的条件下加工和改良食品。 2.紫外-可见分
白度测定仪测面粉白度与灰分的比例关系
白度和灰分是衡量面粉品质的最重要指标。通常情况下, 灰分越高, 面粉色泽越差[。一般来说, 灰分与白度成反比, 与面粉色泽成反比[10 ]。 从白度测定仪研究可知, 面粉颜色不仅与品种特性有关, 而且与白度和灰分的比例也有很大关系。 从品种特性来说, 一般认为多酚氧化
单萜的-提取分离方法
环烯醚萜苷的提取,一般采用溶剂法,提取时常在植物材料中拌入碳酸钙或氢氧化钡以抑制酶的活性和中和植物酸,常用水、甲醇、乙醇、稀丙酮溶液、正丁醇、乙酸乙酯等作为提取溶剂。可采用冷渗液法和热回流提取法。在同一植物中,往往含有多种结构相似的环烯醚萜苷,欲进一步分离单一成分,可采用硅胶、氧化铝等制备性薄层或柱
核酸分离提取的原则
核酸分离提取的原则核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的
核酸分离提取的原则
核酸分离提取的原则核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的
超声波辅助提取黄花菜中多酚类物质工艺的优化
黄花菜即金针菜,又名忘忧草、萱草,是百合科萱草属多年生宿根草本植物的花蕾,色黄,形似金针,蒸熟晒干即为黄花菜。黄花菜其根是我国民间常用的中药材,具有清热凉血和利尿通淋的作用,用于治疗水肿、小便不利、淋浊带下、黄疸、便血合崩漏等症。黄花菜条长肥厚、富含糖、蛋白质、氨基酸、维生素和矿物质等人体必需成分,
多酚的生理功能
氧化损伤是导致许多慢性病,如心血管病,癌症和衰老的重要原因。多酚的抗氧化功能可以对这些慢性病起到预防作用。巧克力中的多酚是很强的抗氧化剂。它可以抑制LDL胆固醇氧化(LDL胆固醇,即“坏胆固醇”是血中的“杂质”。它可以引起动脉硬化、冠心病和心肌梗死等疾病。巧克力中的多酚还可以延长人体内其它抗氧化剂,
多酚的基本信息
拉丁学名Plant Polyphenol别 名植物单宁界植物界中文学名多酚存 在植物体内本 质Plant Polyphenol作 用具有潜在促进健康作用英 文polyphenol
多酚的常见类型介绍
可可多酚具有增强免疫力的功效,它还有与阿司匹林相似的抗炎作用,在一定浓度下可以降低血小板活性,转移自由基在血管壁上的沉积,并能降低血液中的胆固醇水平,因而具有预防心脑血管疾病的功能。葡萄多酚降低低密度脂蛋白胆固醇,抑制血管内皮细胞增殖,保护血管平滑肌细胞,抑制血小板凝集,促进纤维蛋白溶解,从而起到防
多酚的来源和作用
多酚是在植物性食物中发现的、具有潜在促进健康作用的化合物。多酚类物质主要存在于蔬果、坚果、大豆、茶、可可、酒类之中 ,赋予巧克力独特魅力的成份就是多酚。它是存在于可可豆中的天然成份。与其它食物相比,可可豆中多酚的含量特别高。多酚的抗氧化功能可以对这些慢性病起到预防作用。
多酚的常见类型介绍
可可多酚具有增强免疫力的功效,它还有与阿司匹林相似的抗炎作用,在一定浓度下可以降低血小板活性,转移自由基在血管壁上的沉积,并能降低血液中的胆固醇水平,因而具有预防心脑血管疾病的功能。葡萄多酚降低低密度脂蛋白胆固醇,抑制血管内皮细胞增殖,保护血管平滑肌细胞,抑制血小板凝集,促进纤维蛋白溶解,从而起到防
核酸提取分离方法
核酸提取分离方法核酸提取分为传统方法和商业化试剂抽提。传统的方法一般会采用酚/氯仿抽提及乙醇沉淀来提取核酸。商业化试剂盒方法提取核酸,比较经典的是采用离心柱法,将硅胶膜固定在离心管中,通过离心力或者负压让液体通过硅胶膜,核酸就留在膜上。在经过洗涤、洗脱的步骤得到核酸。商业化试剂盒的应用还能避免试剂污
mRNA提取、分离纯化
从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之
中药提取分离方法
为提高中药质量、改变传统中药剂型“大、黑、粗”的状态、让中药步入国际市场,一些现代高新工程技术正在不断地被借鉴到中药生产中来,一方面使中药生产加符合传统的中医药理论,确保用药的质量要求,另一方面也提高了现有中草药资源的利用率。笔者拟对几种研究和应用较多且发展前景广阔的中药提取分离技术作一综述。1 中
胰酶分离提取
一、原理与目的提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活
关于外植体的所处状态和存活条件介绍
外植体取材的不同状态具体表现为外植体生理状态、取材部位、取材时期、外植体的大小及受伤程度、外植体预处理等。幼龄材料比成龄材料褐变轻, 这可以用幼龄材料的酚类化合物含量少, 而成龄材料多来解释。平吉成在研究小金海棠、八楞海棠和山定子刚生成的实生苗上切取茎尖进行组培的试验中, 发现接种后褐变很轻。高
蓝莓中可萃取多酚与不可萃取多酚对巨噬细胞的研究
多酚是植物体内复杂的酚类次生代谢产物,具有多元酚结构,主要存在于植物的皮、根、叶、壳及果肉中。蓝莓中含有大量多酚类物质,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。传统的多酚提取方法主要集中在可萃取多酚(EPP),而忽视了不可萃取多酚(NEPP)。本文研究了蓝莓中EPP和NEPP的提取、分离纯化方法和组成,并进
蓝莓中可萃取多酚与不可萃取多酚对巨噬细胞的研究
多酚是植物体内复杂的酚类次生代谢产物,具有多元酚结构,主要存在于植物的皮、根、叶、壳及果肉中。蓝莓中含有大量多酚类物质,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。传统的多酚提取方法主要集中在可萃取多酚(EPP),而忽视了不可萃取多酚(NEPP)。本文研究了蓝莓中EPP和NEPP的提取、分离纯化方法和组成,并进
福林酚法检测提取物的总酚含量的原理
多酚类化合物在碱性溶液中,钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化,自身被还原(使W6+变为W5+)生成蓝色的化合物,蓝色的深浅程度与含酚基团的数目成正比。如果试样中含有其它分类化合物或其他还原物质,也会被同时测定。