蛋白共沉淀检测实验_备择用GST融合蛋白
实验材料全细胞抽提物试剂、试剂盒谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液（用于 SDS-PAGE 胶）仪器、耗材20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤1. 按照蛋白 A/G-琼脂糖浆所述的方式准备两份样本（见「用蛋白A/G-琼脂糖」步骤 1），不加抗体。2. 4℃ 下最大速度离心 10 min，沉淀非特异性聚集。转移上清到新的离心管中。3. 加 30 μl 谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆（25～30 μl 珠子体积）。确保在加到样本中之前琼脂糖浆均匀悬浮。4. 旋转样本，沉淀然后洗谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆，并且进行SDS- PAGE电泳和免疫印迹分析（见「用蛋白A/G-琼脂糖」步骤 5～10）。展开......阅读全文
蛋白共沉淀检测实验_备择 用GST融合蛋白
实验材料全细胞抽提物试剂、试剂盒谷胱甘肽-琼脂糖或者谷胱甘肽-琼脂糖浆抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液（用于 SDS-PAGE 胶）仪器、耗材20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤1. 按照蛋白 A/G-琼脂糖浆所述的方式准备两份样本（见「用蛋白
GST 融合蛋白沉降实验
实验材料 细胞裂解液其中蛋白质 35S 用标记试剂、试剂盒 裂解缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶探针GST 蛋白仪器、耗材 沸水浴翻转祥品旋转仪谷胱甘肽琼脂糖球珠实验步骤 材料缓冲液和溶液将缓冲液稀释到适当浓度。裂解缓冲液20 mmol/LTris-Cl(pH8.0)200 mml/L NaCl1 mm
GST 融合蛋白沉降实验
GST 沉降实验与 far western(方案 2) 相比有—个优点：探针蛋白是在更自然的环境下与可能的搭档蛋白孵育，因而增强了相互作用的有效性。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料细胞裂解液其中蛋白质 35S 用标记试剂、试剂盒裂解
GST 融合蛋白沉降实验
实验材料 细胞裂解液 其中蛋白质 35S 用标记 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 SDS 聚丙烯酰胺凝胶
用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验
实验材料 结合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白 试剂、试剂盒 碱性缓冲液 封闭缓冲液 相
用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验
GST 融合蛋白作为在细菌中表达的重组蛋白，从它们被介绍以来，已用于成千上万个研究项目中（Smith and johnson 1988)。它们常常被用于制备抗体，这些抗体可用于研究蛋白质-蛋白质相互作用以及分析生化反应。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W
用 GST 融合蛋白检测蛋白质-蛋白质相互作用实验
实验材料 结合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白试剂、试剂盒 碱性缓冲液 封闭缓冲液 相互作用缓冲液PK 缓冲液还原型谷胱甘肽于 Tris-Cl中洗涤缓冲液 1 洗涤缓冲液 2蛋白酶蛋白激酶 A[y-32P]ATP仪器、耗材 与待筛选蛋白结合的膜或滤膜Sephadex G-50 转柱实验步骤 材
GST融合蛋白的亲和纯化实验
实验方法原理琼脂糖颗粒和诱饵蛋白复合体在洗涤时并不会损失而且所有反应都含有等量的诱饵蛋白。为了证明在洗涤期间没有任何材料损失，应使用 1/10 的 GST 融合体加样做平行 SDS-PAGE 凝胶电泳并染色以便更确切地比较 GST 融合体蛋白带。另外，融合蛋白的降解可能导致诱饵蛋白的量减少，尤其是当
GST融合蛋白的亲和纯化实验
GST 共结合纯化法 实验方法原理 琼脂糖颗粒和诱饵蛋白复合体在洗涤时并不会损失而且所有反应都含有等量的诱饵蛋白。为了证明在洗涤期间没有任何材料损失，应使用
GST融合蛋白的亲和纯化实验
实验方法原理 琼脂糖颗粒和诱饵蛋白复合体在洗涤时并不会损失而且所有反应都含有等量的诱饵蛋白。为了证明在洗涤期间没有任何材料损失，应使用 1/10 的 GST 融合体加样做平行 SDS-PAGE 凝胶电泳并染色以便更确切地比较 GST 融合体蛋白带。另外，融合蛋白的降解可能导致诱饵蛋白的量减少