蛋白浓缩方法
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2,免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析) 选择硫酸按是因为:盐析有效性,pH范围广,溶解度高,溶液散热少,经济! 4,(低温)有机溶剂沉淀法:强调低温(0-4度以下)是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2+离子,pH值 5,聚乙二醇沉淀法:使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性!他溶解是散热低,形成沉淀的平衡时间短,通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀! 6,超滤法:主要针对小体积蛋白质溶液(几ml)此法更不易引起变性......阅读全文
蛋白浓缩方法
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2,免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3,硫酸铵沉淀法:利用高浓
蛋白的浓缩方法
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析)选择
蛋白浓缩方法基本
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2,免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3,硫酸铵沉淀法:利用高浓
蛋白质沉淀浓缩方法
在生化制备中,沉淀主要用于浓缩目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂: 1.盐析法 多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。 2.有机溶剂沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。 3.等电点沉淀法 用于氨基酸、
蛋白浓缩(protein-concentration)基本方法
蛋白浓缩方法基本有:丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1.丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2.免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3.硫酸铵沉淀法
蛋白质的浓缩方法
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂
蛋白浓缩(protein-concentration)方法详解
1,透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30%-40%浓度的溶液,将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用
蛋白质的浓缩方法
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂
蛋白质的浓缩技术方法
(一)浓缩胶浓缩法 浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被
蛋白质的浓缩技术方法
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂
蛋白质的浓缩技术方法
(一)浓缩胶浓缩法浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被浓缩
蛋白质的浓缩技术方法
(一)浓缩胶浓缩法 浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被
蛋白质的浓缩技术方法
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用zui广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸
蛋白质沉淀浓缩方法原理及详细解析
在生化制备中,沉淀主要用于浓缩目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂:1.盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。2.有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。3.等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物
如何用蛋白浓缩管
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤
蛋白质的浓缩技术
实验概要蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。实验步骤1. 透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6000-12000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。
蛋白质的浓缩技术
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸
常用浓缩方法介绍
在一些实验中,一些被测物经分离、净化后,样液的量比较多,被测定成分含量极其微小。例如痕量测定实验,在测定前需要浓缩样液,提高浓度,这样能提高分析的灵敏度。但是存在于这些被测物中的污染物存在性质不稳定,易氧化分解,浓缩过程一定应注意防止氧化分解,尤其是在浓缩至近干的时候,极易发生氧化、分解,这时需要在
miVac样品浓缩仪可实现蛋白溶液的高效预先浓缩
蛋白溶液的高效预先浓缩 对于蛋白分离(尺寸排阻色谱法、电泳)或分析(x 射线晶体分析法)前的预先浓缩,Genevac公司的 miVac样品浓缩仪可实现高效,低成本,且可替代传统膜离心技术。 通常,采用膜离心技术会因为蛋白质附着在膜上而导致一些昂贵样品的损失。 相比较使用miVac 样品浓缩仪,即使蛋
蛋白质浓度很低,应该用什么方法来浓缩?
蛋白质的浓缩有很多方法。大致有超滤法,沉淀法和透析法。超滤比较温和,对蛋白质不会有修饰和改变,蛋白的种类一般不会有丢失。它的缺点是总样品的量可能会减少(被膜所吸附)。另外超滤对样品的要求比较高。甘油,去垢剂都会堵塞滤膜,影响超滤的效果。沉淀法比较快速,容易操作,对盐,甘油,去垢剂的耐受性好。缺点是可
有机溶剂浓缩蛋白质
蛋白质浓缩有多种方法,有盐析,超滤,离子交换,有机溶剂沉淀等方法有机溶剂沉淀法在多肽分离中用的特别多,现简要说明如下,希望对各位新虫有所帮助有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低溶液的电解常数,从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力,导致溶解度的降低;另外,有机溶剂与水的作用,能破坏蛋白质的水化膜,故蛋白质在一
马铃薯中优质浓缩蛋白的提取
硫酸铵沉淀与等电点沉淀提取马铃薯浓缩蛋白的比较研究 中国农科院供图 中国农业科学院农产品加工研究所薯类加工与品质调控创新团队研究发现,利用硫酸铵沉淀与等电点沉淀的方法可从马铃薯加工浆液中提取得到功能特性、理化性质和营养品质良好的浓缩蛋白。相关论文发表在International Jour
蛋白质浓缩、干燥及贮存
一、样品的浓缩生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的: 减压加温蒸发浓缩 通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。 空气流动蒸发浓缩 空
Amicon®-Pro蛋白纯化浓缩操作指南
蛋白从克隆表达到纯化脱盐浓缩,一路经过千山万水,宝贵的活性蛋白产量是很多人的“命根子”。然鹅,努力的我们还是苦恼的时候多,欣喜的时候太少太少~~ 纯化黑科技,是时候放大招了 有没有什么好方法能让操作步骤少一点、再少一点,而同时蛋白的活性及产量损失也少一点、再少一点?? 让我们看看那些蛋白操作高手的
蛋白质沉淀(Protein-Precipitation)浓缩方法原理及详细解析3
二.生成盐复合物沉淀法1.金属复合盐法许多有机物质包括蛋白在内,在碱性溶液中带负电荷,能与金属离子形成沉淀。根据有机物与它们之间的作用机制,可分为羧酸、胺及杂环等含氮化合物类,如铜锌镉;亲羧酸疏含氮化合物类,如概镁铅;亲硫氢基化合物类,如汞银铅。蛋白质-金属离子复合物的重要性质是它们的溶解度对溶液的
蛋白质沉淀(Protein-Precipitation)浓缩方法原理及详细解析2
二.硫酸铵的使用硫酸铵中常含有少量的重金属离子,对蛋白质巯基有敏感作用,使用前必须用H2S处理:将硫酸铵配成浓溶液,通入H2S 饱和,放置过夜,用滤纸除去重金属离子,浓缩结晶,100℃烘干后使用。另外,高浓度的硫酸铵溶液一般呈酸性(PH=5.0左右),使用前也需要用氨水或硫酸调节至所需PH。硫酸
蛋白质沉淀(Protein-Precipitation)浓缩方法原理及详细解析1
在生化制备中,沉淀主要用于浓缩目的,或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂:1.盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。2.有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化,有时也用于蛋白质沉淀。3.等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物
浓缩胶的配制方法
一般同工酶可选择7?5%~10%的胶(过氧化物酶和酯酶7?5%较合适,超氧化物歧化酶用10%,可溶性蛋白可根据需要配制)。将配制好的凝胶液置真空干燥器中,抽气10Min,再加入TEMED15μl;混匀后用一细玻棒引流,沿无凹槽的玻板缓缓注入胶室中,注胶过程要防止气泡产生。胶液加到离凹槽3CM处为止,
批量层析法浓缩蛋白质实验
实验方法原理 批量层析的特点在于层析用树脂不放在柱中,而是放在烧杯或瓶子的容器中;通过搅拌或摇动而混内层析;以过滤或离心的办法分出层析液。实验材料 蛋白质溶液仪器、耗材 离子交换层析装置实验步骤 1. 在烧杯或锥形瓶中平衡树脂,不断搅拌以促进平衡;2. 倾泻掉大部分溶液,保留的溶液置要使树脂能轻松的
批量层析法浓缩蛋白质实验
批量层析法 实验方法原理 批量层析的特点在于层析用树脂不放在柱中,而是放在烧杯或瓶子的容器中;通过搅拌或摇动而混内层析;以过滤或离心的办法分出层析液。