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对流免疫电泳

【原理】 对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis,CIEP)是指在适宜缓冲液和电场条件下,抗原和相应抗体在琼脂凝胶中,由于电泳和电渗作用抗原,抗原向正极移动,抗体向负极移动。将抗原放负极端,抗体放正极端,则抗原抗体相向移动,在两孔之间相遇,在比例合适时形成沉淀线。以Sm和RNP(核糖核蛋白)等可提取性抗原(extractable nucleat antigen,ENA)检测相应抗Sm和RNP为例。 【材料】 1. Sm/RNP抗原制备 将新鲜或冻存于-30℃的小牛胸腺除去脂肪与结缔组织后,用0.004 mol/L 氯化钙-0.28 mol/L蔗糖溶液洗净,切碎。每50 g胸腺加上述含钙0.28 mol/L蔗糖450 ml。于匀浆器中慢......阅读全文

对流免疫电泳

实验概要本实验介绍了对流免疫电泳(counter immune electrophoresis)的原理及操作流程。实验原理对流免疫电泳又叫反向免疫电泳或免疫电渗电泳。其原理为:在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电

常见的免疫检测技术!

  (一)皮内试验 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原体刺激后,体内产生亲细胞性抗体(IgE和IgG4)。当其与相应抗原结合后,肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒,释放生物活性物质,引起注射抗原的局部皮肤出现皮丘及红晕,以此便可判断体内是否某有种特异性抗体存在。   (二)免疫

常见的免疫检测技术

(一)皮内试验 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原体刺激后,体内产生亲细胞性抗体(IgE和IgG4)。当其与相应抗原结合后,肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒,释放生物活性物质,引起注射抗原的局部皮肤出现皮丘及红晕,以此便可判断体内是否某有种特异性抗体存在。 (二)

对流免疫电泳

对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果,故可用于快速诊断,敏感性比双向扩散技术高10~15倍。【实验目的】通过本实验的学习,复习巩固免疫学的基本知识,了解对流免疫电泳的基本原理及其用途,并掌握对流免疫电泳的操作步骤及技能。【实验原理】抗原抗

三种常用免疫电泳技术

免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反映的结合产物。这种技术有两大优点,一是加快反应的速度,二是将某些蛋白组分利用其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应,以此做更细微的分析。免疫电泳技术的种类有很多,这里仅将常用的技术介绍如下: 一、放射免疫电泳技术 将放射性元素标记的抗体(或抗原)

电泳仪基本知识

基本知识电泳仪:专为进行电泳提供外加电场的直流电源,其输出电压或电流或功率要求相对稳定或按特定规律变化。 电泳仪分类根据电泳仪原理、电泳仪功能、电泳仪的使用方法、电泳仪的用途不同可以为:琼脂糖凝胶电泳、毛细管电泳、凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳、高效毛细管电泳、琼脂糖电泳、

C3 裂解产物(C3 Split product,C3SP)测定的医学意义

C3 裂解产物(C3 Split product,C3SP)测定的医学意义:C3 裂解产物(C3SP) 是C3 激活后裂解形成的具有不同分子结构和生物学活性的片段。包括C3a、C3b、C3bi、C3c、C3dg、C3d、C3e、C3g。其过程是, 补体通过CP 或A P活化时,C3 分子的α链在C3

抗核抗体检测方法

ANA的检测方法 由于ANA的复杂性及多样性,故测定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹技术等。 1.免疫荧光法检测血清总ANA最常用的方法是荧光免疫组化法。多用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质,结果比较稳定可靠,在荧光显微镜下见到

沉淀反应实验:琼脂扩散(agar diffusion)实验

琼脂扩散实验琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时,便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时,便依各自扩散速度的差异,在适当部位形成独立的沉淀线,因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原

电泳仪基本类型

电泳仪有纸电泳仪、醋酸纤维素薄膜电泳仪、薄层电泳仪、凝胶电泳仪、等电聚焦电泳仪、等速电泳仪、免疫电泳仪、电泳转移仪、双向电泳仪和毛细管电泳仪等类型。一、纸电泳仪:1、方法:以滤纸作为支持载体,水平架在两个装有缓冲液的容器间,样品点于滤纸中央。当滤纸被缓冲液润湿后盖上绝缘密封罩,即可输入直流电进行电泳

对流免疫电泳实验——对流免疫电泳

对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术,其基本原理是:在琼脂板上打两排孔,左侧各孔加人待测抗原,右侧孔内放人相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。通电后,带负电荷的抗原泳向阳极抗体侧,而抗体借电渗作用流向阴极抗原侧,在两者之间或抗体的另一侧形成沉淀线。实验方法原理对流免疫电泳是在琼脂扩散基础

对流免疫电泳技术(CIET)

一、原理在pH8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,在电泳时,由于电渗作用的影响,抗体球蛋白不但不能抵抗电渗作用向正极移动,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质带负电荷,将抗原置于负极,将血清抗体置于正极,电泳后则在两孔之间相遇,并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。本法由于抗原抗体分子在

化学发光免疫分析仪器与试剂

一、概述发光检测作为分析化学领域内一个强有力的技术手段,始终以其高灵敏度、低成本、简单快速的优势发挥着重要作用,对于某些特定化合物(如有机磷农药和神经毒剂)、某些酶活性、金属离子等的动态分析和现场检测具有不可替代的优势。从上世纪中叶开始,生物医学界一直在致力于将该技术体系应用于实验室研究中,并取得了

沉淀反应实验原理、材料和实验方法(2)

三 双向扩散 【 实验原理 】 双向免疫扩散是指抗原和抗体在同一凝胶内部扩散,彼此相遇后形成特 异性的沉淀线。该反应是将抗原和抗体加入同一凝胶中两个相隔一定间距的小孔内,使两者进行相互扩散。当抗原和抗体浓度之比相适宜时,彼此相遇形成一白色弧型沉淀线。 【 实验材料

沉淀反应实验原理、材料和实验方法(2)

三 双向扩散 【 实验原理 】 双向免疫扩散是指抗原和抗体在同一凝胶内部扩散,彼此相遇后形成特 异性的沉淀线。该反应是将抗原和抗体加入同一凝胶中两个相隔一定间距的小孔内,使两者进行相互扩散。当抗原和抗体浓度之比相适宜时,彼此相遇形成一白色弧型沉淀线。 【 实验材料

电泳技术基本原理和影响电泳速度的因素-1

电泳是指带电粒子在电场中向异性电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质,当溶液pH值大于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,反之则带正电荷,向负极移动。当蛋白质溶液pH值与蛋白质的等电点相等,静电荷为零则不移动。电泳技术常以有无支持物来分类。电泳中不用支持物在溶液中进行的电泳称为自

细菌感染的诊断

一、检测细菌或其抗原(一)直接涂片显微镜检查自病人标本直接涂片作染色镜检是简便而快速的方法之一。自一定部位采集标本作直接检查需考虑细菌的形态特征与可能存在的细菌数量。脑膜炎患者的脑脊液和瘀斑刺破涂片,常可显示在细胞内的革兰氏阴性肾形双球菌,有诊断价值。白喉患者咽部假膜涂片中可见典型的杆菌有时可有异染

细菌感染的临床诊断

细菌感染的临床诊断:一、检测细菌或其抗原(一)直接涂片显微镜检查自病人标本直接涂片作染色镜检是简便而快速的方法之一。自一定部位采集标本作直接检查需考虑细菌的形态特征与可能存在的细菌数量。脑膜炎患者的脑脊液和瘀斑刺破涂片,常可显示在细胞内的革兰氏阴性肾形双球菌,有诊断价值。白喉患者咽部假膜涂片中可见典

放射免疫对流电泳检测

(一)原理将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时,沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影,就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线,作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经过显影把“像”显示出来。这样,能检出肉眼看不见的沉淀线,从而提高反应的敏感性,这种方法可应用于凝胶

放射免疫对流电泳技术

(一)原理将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时,沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影,就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中 放出的射线,作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影,再经过显影把“像”显示出来。这样,能检出肉眼看不见的沉淀线,从而提高反应的敏感性,这种方法可应

IVD遇上分析测试——健康中国理想距你我更近一步

颜光涛主任谈BCEIA2019分析检测与体外诊断国际高峰论坛  分析测试百科网讯体外诊断(In Vitro Diagnosis, IVD)被称为“医生的眼睛”,它是指通过特定的仪器和试剂对来源人体的体液,如血液、尿液、粪便、组织等进行体外检测而获取临床诊断信息的产品和服务,帮助医生了解人体的疾病、感

免疫电泳技术的基本类型

免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反映的结合产物。这种技术有两大优点,一是加快反应的速度,二脸皮是将某些蛋白组分利用其带电荷的不同而将其分开,再分别与抗体反应,以此做更细微的分析。免疫电泳技术的种类有很多,基本类型有:1、免疫电泳2、放射免疫电泳3、对流免疫电泳4、 火箭免疫电泳 5、

江苏大学 检验医学专业实验-临床免疫学检验

  抗血清的制备  【原理】:用抗原刺激机体可以产生抗体,抗原的性质、纯度和活性影响其免疫动物后获得的抗体的的特异性和效价。在体外有目的的制备抗原,经初次、再次免疫的过程可以获得高质量的抗体。  【注意事项】  ①制备佐剂时,一定要顺着同一方向用劲磨。  ②检查油包水的方法:培养皿内加水,滴入混匀液

常用电泳仪的基本结构是什么?

    我们通常所说的电泳仪,实际由主要设备(分离系统)和辅助设备(检测系统)构成的,其中主要设备是指电泳仪电源、电泳槽。    1.电泳电源是建立电泳电场的装置,它通常为稳定(输出电压、输出电流或输出功率)的直流电源,而且要求能方便地控制电泳过程中所需电压、

沉淀反应实验原理、材料和实验方法(3)

五 对流免疫电泳 【 实验原理 】 当抗原和抗体在琼脂介质中电泳时 ,抗体的 PI 比较高,在适当的 pH 值下,抗体带正电荷而抗原带负电荷,故在电场中抗体向阴极方向移动而抗原向阳极运动,直至相遇后形成沉淀线,其原理与双向免疫扩散相同,但具有方法简便,快速及一次电泳可以检测多个样品等特

微生物学检验基本技术(1)

第一节 微生物形态学检查   细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一,它是细菌分类和鉴定的基础,可根据其形态、结构和染色反应性等,为进一步鉴定提供参考依据。 一、显微镜检查   由于细菌个体微小,肉眼不能看到,必须借助显微镜的放大才能看到。一般形态和结构可用光学显微镜观察,其内部的超微结构则需用电

微生物学检验基本技术(1)

随着现代医学及相关科学技术的发展,各学科相互交叉和渗透,医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平,许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术,准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物,并对引起感染的微生物进行耐药性监测,为临床对感

细菌感染的诊断

  一、检测细菌或其抗原  (一)直接涂片显微镜检查  自病人标本直接涂片作染色镜检是简便而快速的方法之一。自一定部位采集标本作直接检查需考虑细菌的形态特征与可能存在的细菌数量。脑膜炎患者的脑脊液和瘀斑刺破涂片,常可显示在细胞内的革兰氏阴性肾形双球菌,有诊断价值。白喉患者咽部假膜涂片中可见

微生物学的快速诊断

  微生物学的快速诊断是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助:  快速检测病原体成分主要是指特异性抗原和核酸检测。  特异性抗原检测包括免疫荧光技术、胶乳凝集试验、酶免疫技术、对流免疫电泳、化学发光免疫测定等。(免疫学检验技术)  核酸检测包括核酸探针

食品过敏原的常见检测技术

  免疫学检测技术  免疫吸附技术主要包括酶联免疫吸附技术和放射/酶联吸附抑制实验。酶联免疫技术是将抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化反应有机结合起来的一种检测技术,其原理是被酶标记的抗体与食品过敏原发生反应作用于底物后,其显色深浅能够反映待测样品中过敏原的含量。该技术特异性强,灵敏度高,操作简