对流免疫电泳
实验概要本实验介绍了对流免疫电泳(counter immune electrophoresis)的原理及操作流程。实验原理对流免疫电泳又叫反向免疫电泳或免疫电渗电泳。其原理为:在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电渗作用,故在电泳时,反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质常带较强的负电荷,分子又较小,所以泳动快,虽然由于电渗作用泳动速度减慢,但仍能向正极泳动。如将抗原置阴极,抗体置阳极,电泳时,两种成分相对泳动,一定时间后抗原和抗体将在两孔之间相遇,并在比例适当的地方形成肉眼可见的沉淀线。这样由于电泳的作用,不仅帮助抗体定向移动,因而加速了反应的出现,而且也限制了琼脂扩散时,抗原抗体向四周自由扩散的倾向,因而也提高了敏感性,本法比琼脂扩散法的灵敏度要高10~16倍。实验步骤1. 制备琼脂板: 1) 首先配制pH值8.6,μ=0......阅读全文
免疫电泳实验_免疫电泳
实验材料待检抗原试剂、试剂盒抗体琼脂巴比妥缓冲液仪器、耗材电泳仪载物玻片打孔器玻璃铸型微量进样器实验步骤1. 取载物玻片(7.5ⅹ2.5厘米)加上3.5毫升1.5%琼脂凝胶,制成2毫米厚的琼脂板。2. 按图位置,在琼脂板未凝固时,放入抗血清槽铸型,注意勿使铸型全部浸入琼脂中,待凝固时再打孔。3.
单向定量免疫电泳(火箭免疫电泳)
实验原理单向定量免疫电泳又称火箭电泳(rocket immunoelectrophoresis)。在琼脂内掺入适量的抗体,在电场作用下,定量的抗原泳动遇到琼脂内的抗体,形成抗原—抗体复合物沉淀下来。走在后面的抗原继续在电场作用下向正极泳动,遇到琼脂内沉淀的抗原—抗体复合物,抗原量的增加造成抗原过
免疫电泳
实验概要本实验介绍了免疫电泳(immunoelectrophoresis,IE)实验原理及操作流程。蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有自己的等电点。在等电点时,蛋白质所带的正负电荷相等。在pH值大于等电点的溶液中,羧基解离多,此时蛋白质带负电荷,带负电荷的蛋白质在电场中
免疫电泳
一、操作步骤1.取一块干净的玻璃板,用少量75%乙醇冲洗,晾干后置于水平台,将1%琼脂糖融化,56℃水浴中保温。2.将琼脂糖铺于玻璃板上,厚度约为1㎜。凝固后,打孔。3.在孔内加入抗原,其中一孔内加电泳指示剂。4.将凝胶板放在电泳槽中进行电泳,确定电泳时间。5.电泳后在凝胶板上沿电泳方向平行挖2㎜宽
免疫电泳
实验概要蛋白质是一种两性电解质,它同时具有游离氨基和羧基。每种蛋白质都有自己的等电点。在等电点时,蛋白质所带的正负电荷相等。在pH值大于等电点的溶液中,羧基解离多,此时蛋白质带负电荷,带负电荷的蛋白质在电场中向正极移动;在pH值小于等电点的溶液中,氨基解离多,此时蛋白质带正电荷,在电场中向负极移动。
对流免疫电泳实验——对流免疫电泳
对流免疫电泳实质上是定向加速度的免疫双扩散技术,其基本原理是:在琼脂板上打两排孔,左侧各孔加人待测抗原,右侧孔内放人相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。通电后,带负电荷的抗原泳向阳极抗体侧,而抗体借电渗作用流向阴极抗原侧,在两者之间或抗体的另一侧形成沉淀线。实验方法原理对流免疫电泳是在琼脂扩散基础
免疫电泳实验
溶液的准备 倒胶 打孔与加样 电泳 检测 试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液
免疫电泳实验
试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤 1. Tris-巴比妥缓冲液贮液2.24 g 二乙基巴比妥酸,4.43 g Tris,0.053 g 乳酸钙,0.065 g 叠氮钠,用双蒸水溶解后,在容量瓶中定容至 100 ml。2. 电极缓冲液用双蒸水稀释 4 倍。3. 1%
免疫电泳简介
免疫电泳(immune electrophoresis)是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。由Grabar与Williams于1953年创立。此项技术由于既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,是广泛应用于生物医学领域的一项免疫学基本
免疫电泳实验
实验方法原理 免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,
免疫电泳法
免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状,以分析标本中所含组分的性质,本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊
免疫电泳试验
实验方法原理 免疫电泳试验是凝胶电泳与双向免疫扩散相结合的免疫化学技术。应用琼脂进行免疫电泳试验可分为以下二个步骤:琼脂电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离,由于各种可溶性蛋白分子的颗粒大小、质量与所带电荷不同,在电场的作用下,其带电分子的运动速度(迁移率)具有一定规律,因此通过电泳
免疫电泳试验
免疫电泳试验 实验方法原理 免疫电泳试验是凝胶电泳与双向免疫扩散相结合的免疫化学技术。应用琼脂进行免疫电泳试验可分为以下二个步骤:1.琼脂电泳 将待检的
免疫电泳实验
实验方法原理免疫电泳的基本原理是将电泳和琼脂免疫扩散结合起来应用,即先将蛋白质抗原在琼脂内进行电泳,使分离成不同的电泳区带,然后在一定距离的抗体槽内加入抗血清,使进行免疫扩散沉淀反应,这样,每一电泳区带又可能产生一个以上的沉淀线条。因而此法克服了单纯琼脂扩散方法中的沉淀线重叠成束,不易鉴别的缺点,大
火箭免疫电泳
实验概要本文介绍了火箭免疫电泳的基本原理和主要操作流程。实验原理火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到
免疫电泳(Immunoelectrophoresis)
【原理】 免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状,以分析标本中所含组分的性质,本实验常用于抗原分析及
免疫电泳试验
免疫电泳试验是凝胶电泳与双向免疫扩散相结合的免疫化学技术。应用琼脂进行免疫电泳试验可分为琼脂电泳,琼脂扩散。实验方法原理免疫电泳试验是凝胶电泳与双向免疫扩散相结合的免疫化学技术。应用琼脂进行免疫电泳试验可分为以下二个步骤:1.琼脂电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离,由于各种可溶性蛋白分
免疫电泳实验_检测
检测 试剂、试剂盒 Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液 实验步骤 如用考马斯亮蓝染色,先用生理盐水洗去没有反应的蛋白。为了加速染色步骤,将凝胶压干。(将凝胶放在玻璃板上,先用蒸馏水湿润。在小孔中注入双蒸水,以防止凝胶压扁时,小孔中的空气使凝胶破裂。用一张湿滤纸和
免疫电泳的介绍
免疫电泳(immune electrophoresis)是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。由Grabar与Williams于1953年创立。此项技术由于既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,是广泛应用于生物医学领域的一项免疫学基本
什么是免疫电泳?
免疫电泳(immune electrophoresis)是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。由Grabar与Williams于1953年创立。此项技术由于既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,是广泛应用于生物医学领域的一项免疫学基本技术
免疫电泳实验_电泳
试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤电泳时温度可控制在 10~15℃,同前述电泳的方法一样,先在冷却板上铺一层煤油,再铺胶。电极芯与凝胶的边缘接触 5~10 mm,并保持平行,电泳时的电场强度约为 20 V/cm。
什么是免疫电泳
免疫固定电泳技术( IFE )是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其它体液。免疫固定电泳技术( IFE )已在医学研究、法医学、基因诊断和临床实验室操作中得到了广泛的应用。
免疫电泳(immunoelectrophoresis-)实验
免疫电泳(immunoelectrophoresis )是将电泳和琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定型方法,具有灵敏快速的优点。该实验可分为如下两个步骤:1.电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离。由于各种可溶性蛋白分子的大小、质量与所带电荷不同,在电场的作用下,其带电分子的运动速度
微量免疫电泳实验
实验方法原理免疫电泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学检测技术(双向扩散)结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短等优点, 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临床诊断方面也有
微量免疫电泳实验
实验方法原理 免疫电泳法(immunoelect rophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学检测技术(双向扩散)结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短等优点, 是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临
对流免疫电泳
实验概要本实验介绍了对流免疫电泳(counter immune electrophoresis)的原理及操作流程。实验原理对流免疫电泳又叫反向免疫电泳或免疫电渗电泳。其原理为:在pH值8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白只带有微弱的负电荷,而且它分子又较大,所以泳动慢,受电渗作用的影响也大,往往不能抵抗电
对流免疫电泳
对流免疫电泳是在琼脂扩散基础上结合电泳技术而建立的一种简便而快速的方法。此方法能在短时间内出现结果,故可用于快速诊断,敏感性比双向扩散技术高10~15倍。【实验目的】通过本实验的学习,复习巩固免疫学的基本知识,了解对流免疫电泳的基本原理及其用途,并掌握对流免疫电泳的操作步骤及技能。【实验原理】抗原抗
对流免疫电泳
【原理】 对流免疫电泳(counter immunoelectrophoresis,CIEP)是指在适宜缓冲液和电场条件下,抗原和相应抗体在琼脂凝胶中,由于电泳和电渗作用抗原,抗原向正极移动,抗体向负极移动。将抗原放负极端,抗体放正极端,则抗原抗体相向移动,在两孔之间相遇,在比例合适时形成沉淀线。以
免疫电泳法简介
免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状,以分析标本中所含组分的性质,本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊断。
免疫电泳实验_倒胶
试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤为使琼脂糖溶液均匀铺层和得到重复的结果,玻璃板必须水平放置。为便于在免疫电泳中从第一向到第二向的转移,最好使用琼脂糖凝胶支持膜。12 ml 琼脂糖溶液在 84 cm X 94 cm 上的凝胶厚度为 1.5 mm。倒胶后约 3 分钟凝固