电泳概述

电泳是在溶剂中通过电场转移带电分子,任何带电的离子或者基团放置在电场中都将会迁移。除非在它们的等电点,大多数生物聚合物在任何pH值时都带有净电荷,它们将会以与电荷密度成比例的方式移动。分子在电场中的迁移取决于电场的强度、净电荷、分子的大小和形状、离子强度、粘度和分子移动介质的温度。作为一种分析工具,电泳简单、快速,并且具有高灵敏度。用来研究单一、带电荷的分子的特性,也用来作为一种分离技术。支持基质最常用的支持介质是聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶。它们作为多孔介质起作用,类似于一个筛子,延迟和阻碍大分子的运动,而允许小分子的自由地移动。过滤分子的范围最终取决于胶孔大小和迁移分子大小的接近程度。琼脂糖有一个相对较大的孔径,用来分离大分子例如核酸、大蛋白和蛋白复合物,聚丙烯酰胺形成孔径较小的胶,适合于分离大多数蛋白和小片段核酸。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 聚丙烯酰胺胶通过丙烯酰胺单体聚合成长链,同时通过双功能化合物例如甲叉双丙烯......阅读全文

电泳概述

电泳是在溶剂中通过电场转移带电分子,任何带电的离子或者基团放置在电场中都将会迁移。除非在它们的等电点,大多数生物聚合物在任何pH值时都带有净电荷,它们将会以与电荷密度成比例的方式移动。分子在电场中的迁移取决于电场的强度、净电荷、分子的大小和形状、离子强度、粘度和分子移动介质的温度。作为一种分析工具,

电泳技术概述

电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以

电泳技术概述

电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以

凝胶电泳概述

以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同工酶及其

电泳、转膜概述

转膜是把DNA 从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如 RFLP 分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。实验目的:掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤实验原理:1.转膜的方式:向上的毛细管转移向下的毛细管转移同时向两张膜

尿液蛋白电泳的概述

  尿蛋白电泳常用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE),亦称蛋白SDS盘状电泳。  SDS-PAGE是目前分析蛋白质亚基组成和测定其相对分子质量的最好方法。

电泳仪的概述

  电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类,自由界面电泳不需支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及

血清蛋白电泳概述

  新鲜血清经电泳后可精确地描绘出患者蛋白质的全貌,有助于许多临床疾病判断的参考医学教育|网,在各类教材书上已清晰的描述了各种病理现象所显现的图像,一般常见的是白蛋白降低,某个球蛋白区域升高,提示不同的临床意义。如球蛋白多克隆(poly-clonal)增高,β-γ融合的桥连现象,在γ区呈现细而密的寡

血清蛋白电泳概述

鲜血清经电泳后可精确地描绘出患者蛋白质的全貌,有助于许多临床疾病判断的参考,在各类教材书上已清晰的描述了各种病理现象所显现的图像,一般常见的是白蛋白降低,某个球蛋白区域升高,提示不同的临床意义。如球蛋白多克隆(poly-clonal)增高,β-γ融合的桥连现象,在γ区呈现细而密的寡克隆(oligoc

关于免疫电泳的概述

  免疫电泳(immune electrophoresis)是将琼脂电泳和双向琼脂扩散结合起来,用于分析抗原组成的一种定性方法。由Grabar与Williams于1953年创立。此项技术由于既有抗原抗体反应的高度特异性,又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力,是广泛应用于生物医学领域的一项免疫学基本

免疫电泳法的概述

  免疫电泳法是指利用凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术结合的实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数量、位置及形状,以分析标本中所含组分的性质,本实验常用于抗原分析及免疫性疾病的诊

双向蛋白电泳仪概述

  双向蛋白电泳仪是一种用于生物学、基础医学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2006年2月20日启用。  技术指标  最多可同时电泳12条IPG胶条(7-24厘米);1-d水平电泳最高电压10000V;成像扫描仪分辨率600DPI。  主要功能  该系统包括第一向水平电泳、第二向垂直电泳和扫

毛细管电泳概述

毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE), 是近年来发展 快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力

概述电泳仪的相关分类

  根据电泳中是否使用支持介质分为自由电泳和区带电泳。  自由电泳不使用支持介质,电泳在溶液中进行。这类电泳又分为非自由界面电泳和自由界面电泳两类。非自由界面电泳指悬浮在溶液中的带电粒子(如各种细胞)通电后全部移动,不出现界面,如显微电泳等。自由界面电泳中被分离物质集中在某一层,形成各自的界面而进行

电泳缓冲液的概述

  电泳缓冲液是核酸、蛋白质凝胶电泳系统的一个重要组成, 是电泳场中的导体,也是维持电泳系统恒定 pH值的必要条件。其成分及其离子强度影 响物质的电泳迁移率,应避免与被分离的样 品发生化学反应而改变样品的理化性质或使 其丧失生物活性。电泳缓冲液中的EDTA 可螯合Mg离子等二价阳离子,防止电泳时激

脉冲场凝胶电泳(PFGE)概述

脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为:细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(low frequency cle

脉冲场凝胶电泳(PFGE)概述

脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为:细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(lowfrequencycleavager

概述双向凝胶电泳的技术应用

  凝胶中蛋白的检测  凝胶染色的目的是使其中的蛋白质能够被观察到。目前还没有通用的染色方法,只能在考虑多种因素如需要的灵敏度、线性范围、方便程度、费用、以及成像设备类型等基础上,结合实际进行选择。有时也可以将蛋白转膜后通过免疫印迹的方法来进行检测。  图像采集和分析  成像设备可以摄人图像,对凝胶

关于免疫固定电泳技术的概述

  免疫固定电泳技术是一种区带电泳与免疫沉淀反应相结合的技术。基本原理是待测蛋白质在凝胶介质上经电泳分离后,将抗血清加上己分离的蛋白质泳道上或将已加抗血清的滤纸贴于其上。经孵育后,在适当位置产 生抗原抗体复合物并沉淀下来。  固定后的电泳凝胶在洗脱液中漂洗除去未结合的蛋白质,仅保留抗原抗体复合物,经

临床蛋白电泳及进展/基本知识/概述

分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。蛋白质为两性电解质,在不同pH溶液中带不同的电荷,从而在直流电场中能够泳动,这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术,并成功地将血清蛋

临床蛋白电泳及进展/基本知识/概述

分散介质中的带电粒子在直流电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳(electrophoresis)。蛋白质为两性电解质,在不同pH溶液中带不同的电荷,从而在直流电场中能够泳动,这就是蛋白质的电泳现象。1937年瑞典化学家Tiselius首先建立了蛋白质的界面电泳技术,并成功地将血清

琼脂糖凝胶电泳技术概述

一、琼脂糖凝胶的特点天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与

DNA酶切及凝胶电泳之一:概述

一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶

概述血免疫固定电泳的临床意义

  1.单克隆免疫球蛋白增殖病  以单一克隆的浆细胞过度增高为特征,常导致某种免疫球蛋白或免疫球蛋白亚单位大量合成而其他正常免疫球蛋白水平下降。IFE能够确定这些蛋白质的单克隆属性。  2.本周氏蛋白和游离轻链病  本周氏蛋白是没有与免疫球蛋白分子中重链结合的单克隆κ或λ轻链。免疫固定电泳可确定本周

聚丙烯酰胺凝胶电泳概述

  聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis),是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过

概述免疫电泳(M蛋白鉴定)的临床意义

  免疫电泳用于M蛋白血症(如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、轻链病、重链病等)的诊断与分型。M蛋白血症可分为恶性与意义不明两类。恶性M蛋白血症主要包括多发性骨髓瘤(包括轻链病)、不完全骨髓瘤蛋白病(端基因缺陷)、重链病、巨球蛋白血症、半分子病、7SIgM病等。意义不明M蛋白血症又分为两种,一种是良性蛋

高效毛细管电泳仪检测器概述

          高效毛细管电泳仪(HPCE)除了比高效液相色谱仪(HPLC)具有效率更高、速度更快、样品和试剂耗量更少、应用面更广等优点外,其仪器结构也比HPLC简单。HPCE只需高压直流电源、进样装置、毛细管和检测器,前三个部件均易实现,困难之处在于检测器,特别是光学类检

概述毛细管电泳仪的广泛应用

  CE具有多种分离模式(多种分离介质和原理),故具有多种功能,因此其应用十分广泛,通常能配成溶液或悬浮溶液的样品(除挥发性和不溶物外)均能用CE进行分离和分析,小到无机离子,大到生物大分子和超分子,甚至整个细胞都可进行分离检测。它广泛应用于生命科学、医药科学、临床医学、分子生物学、法庭与侦 破鉴定

高效毛细管电泳仪检测器概述

    高效毛细管电泳仪(HPCE)除了比高效液相色谱仪(HPLC)具有效率更高、速度更快、样品和试剂耗量更少、应用面更广等优点外,其仪器结构也比HPLC简单。HPCE只需高压直流电源、进样装置、毛细管和检测器,前三个部件均易实现,困难之处在于检测器,特别是光学类检测器。由于HPCE溶质区带的超小体

固相pH梯度等电聚焦电泳色谱仪概述

固相pH梯度等电聚焦电泳色谱仪比载体两性电解质pH梯度等电聚焦电泳色谱仪具有更高的分辨率,更大的上样量,其分辨率可达0.001pH,是目前分辨率zui高的电泳仪之一。一、工作原理:蛋白质分子按照自己的pI位置在固相pH梯度中迁移,达到自己的等电点时停止迁移。二、固相pH梯度的介质:固相pH梯度(IP