Cosmid提取技术
Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol stocks.Grow cultures for 12 hours(do not let go for more than 14 hrs.)Day TwoSpin down cultures in 250 ml bottles in Beckman JA-17 rotor at 6,000 rpm for 15 min.Pour off sups, freeze pellets at -20°C for 10 min.Resuspend in 10 ml GET solution + 1 mg/ml lysozyme each, tr......阅读全文
分子蒸馏技术在芦荟维生素提取中的应用
维生素是与人们生活息息相关的产品,现已成为医药与保健品市场的主要大宗产品之一。维生素E用量,其次是维生素A、维生素C、维生素D等。随着经济的增长和人们生活水平的提高,维生素类产品的需求也会进一步增长,人们对其质量和档次的要求也会进一步提高,因此,作为许多种维生素生产中的重要分离技术--分子蒸馏技术也
免疫球蛋白提取技术:IgG的分离与提纯1
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数
免疫球蛋白提取技术:IgG的分离与提纯2
⑴ 区带电泳:玻片琼脂或醋酸纤维膜电泳均可。加样电泳后,只在γ—球蛋白的迁移部位出现一条带。操作时,同时可用全血清样品,不同浓度 (NH4)2SO4盐析样品进行电泳,以资比较。⑵ 琼脂双相双扩散鉴定:预先准备该IgG免疫异种动物所获的抗IgG血清。将IgG与抗 IgG血清进行双相双扩散,如IgG提纯
高速逆流色谱分离提取天然产物技术研究进展
摘 要:高速逆流色谱是最近20 多年发展起来的一项液- 液分配技术,由于其具有不需任何固态支撑的特点,在分离提取天然产物方面具有很多优势,因此被广泛应用。本文介绍了高速逆流色谱的原理和特点,对其分离提取天然产物有效成分的应用及其进展进行了综述。关键词:高速逆流色谱;天然产物;分离提取 自从上世
DNA提取方法-影响提取质量的因素-提高提取质量的方法
一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚
质粒提取
一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA,这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载
质粒提取
一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA,这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长),然后从中纯化质粒,质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载
RNA提取
RNA提取(主要内容如下)Tips for Handing RNA Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum Basic Procedures for Handing
组织破碎提取法的提取方法比较
提取方法优点缺点煎煮法经济、安全、易行选择性差、成分易破坏、后期处理困难回流法选择性好、收率高受热长、效率低、成分易破坏浸泡法简单、投资小、安全效率低、耗时长、易变质蒸馏法选择性强、处理方便适用范围窄、需要专用设备渗漉法室温、简单、节能费时、有污染连续回流法省溶剂、效率高受热长、规模小、成分易破坏超
多克隆抗体提取实验——批量提取法
由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。主要用于(1)批量提取多个抗体(2)为进一步验证抗体的作用进行基础操作。实验方法原理由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗
核酸提取-基因组DNA的提取
DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作,如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在DNA提取过程中应做到1,根据不同研究需要,保证结构的相应完整性;2,尽
动物RNA提取实验——Trizol试剂提取法
实验方法原理Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70
粗脂肪提取—索氏(Soxhlet)提取法
原理本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量。该法适用于固体和液体样品,通常将样品浸于脂肪溶剂,如乙醚或沸点为30-60度的石油醚,借助于索氏提取管进行循环抽提。本法提取的脂溶性物质为脂肪类似物的混合物,其中含有脂肪,游离脂肪酸,磷脂,酯,固醇,芳香油,某些色素及有机酸等,因此,称为粗脂肪。用该
常用的溶剂提取样品提取方法
同一溶剂中,不同物质具有不同的溶解度。利用混合物中各物质溶解度的不同将混合物组分完全或部分分离的过程称为萃取,也称提取。 常用方法有以下几种: 1.浸提法: 浸提法又称浸泡法。用于从固体混合物或有机体中提取某种物质,所采用的提取剂,应既能大量溶解被提取的物质,又要不破坏被提取物质的性质。为
蛋白质提取(水溶液提取法和有机溶剂提取法)
蛋白质的提取工作是将经过处理或破碎的细胞,置于一定的条件和溶液中,让被提取物充分释放出来的过程。影响提取的因素主要是被提取物质在提取的溶液中溶解度的大小及由固相扩散到液相的难易程度。某一物质在溶剂中溶解度大小与该物质的分子结构及溶剂理化性质有关,一般遵守“相似相溶”的原则。扩散作用对蛋白质的提取有一
重组DNA的分离、克隆与测序实验手册7
III. Methods for DNA isolationA. Large scale double-stranded DNA isolationThe method used for the isolation of large scale cosmid and plasmid DNA is a
俄开发研究从酿造啤酒废料中提取生物燃料技术
据《西伯利亚科学》报道,俄罗斯科学院西伯利亚分院博列斯科夫催化研究所开发出利用酿造啤酒废水中培养微藻提取生物燃料的技术。 俄科院西伯利亚分院催化研究所助理研究员亚历山大.皮利格耶夫介绍称,该所实验室主要研究方向之一是从微藻中提取生物燃料,微藻在土壤、淡水和咸水中广泛分布,富含脂质,从中可以
超声波技术在中药有效成分提取中的应用
①提取中的物理作用 利用超声波产生的空化现象可细化各种物质以及制造乳浊液,加速植物中的有效成分进入溶剂,使其进一步提取,以增加有效成分的提出率。还可以运用超声波的许多次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也都有利于使植物中的有效成分的转移,并充分和溶剂混合,促进提取的进行。 ②超声波
中国高校攻克提取技术难题-研发“海水提铀”新材料
哈尔滨工程大学28日对外发布,该校“先进海洋材料协同创新中心”研发出高效“海水提铀”新材料,引发国际关注。 该创新中心通过酯化与聚合反应对某种植物纤维进行表面改性,研发出高吸附容量、高选择性的铀吸附剂,并攻克了铀的吸附、脱附与分离纯化一体化的提取技术难题。 铀是重要的核电原料,而中
海口核酸提取技术暨前处理应用技术交流会圆满结束
随着时代的进步以及分析水平的提高,对检测的瓶颈越来越多的体现在前处理领域。根据国际LC-GC杂志对世界100多个实验室进行的统计,样品前处理所花费的时间占整个分析过程的61% 。而检测误差的90% 出现在前处理领域。因此,前处理的好坏直接关系到检测的效率以及结果的准确性。尤其是前处理
超声提取-台式恒温超声波提取机
超声提取这一技术在被发现50多年后真正走向产业化应用。在基础上,不断完善配套系统,开发出药材物料输送及控制系统、提取溶媒流量及温度控制系统、药渣挤干及烘干处理系统、提取药液渣液分离系统、提取管段搅拌系统、提取管段加热保温系统、在线清洗(WIP)系统、集中电气操作控制等系统,构成一套功能齐全的机电一体
茶多酚提取设备应用的提取方法有那些
从茶叶中制备茶多酚的传统方法主要分为以下三类。溶剂提取法 将茶叶用极性溶剂浸渍,然后把浸取液进行液—液萃取分离,最后浓缩得到产品。目前工业化生产主要采用此法。产品收率5%~10%,产品纯度为80%~98%。所用溶剂有丙酮、乙醚、甲醇、已烷及三氯甲烷等。该法生产成本高,且易造成污染。离子沉淀法 用金属
关于碳醇提取的要求和提取介绍
1、碳-醇提取的要求: 质量能保证的纯工业用醇,可用于提取乙醇。如没有乙醇,也可以用试剂纯的甲醇。要取1升溶剂蒸馏并蒸干,来检查它的杂质含量。只要残渣小于5毫克,这种溶剂就可以用。 2、碳-醇提取的乙醇提取: 从碳中除去残存的氯仿的方法,是往碳上吹入已预净化的温热空气(在索氏提取器内)并通
微波提取法提取叶黄素的方法介绍
微波是一种瞬时穿透式加热方式,在微波场的作用下破碎植物细胞壁,从而加快了萃取速率和有效地提高了产品得率。微波提取技术在天然色素提取方面也取得了良好的效果。其优点是既降低了设备投资和运行成本,又符合环保要求 。
溶剂提取法提取白藜芦醇的介绍
溶剂提取法是一种国内外应用最广泛的提取方法。常用的溶剂提取法主要包括3种:渗漉法、浸提法和回流法。回流提取白藜芦醇的常用溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯等,其中以60%~90%乙醇水溶液对白藜芦醇原植物进行回流提取最为常用,其他溶剂由于效率低或毒性相对较大,故很少使用。
核酸提取仪核酸提取仪种类、优势、特点
酸提取仪,是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提取几千个同一种类标本,所以真正得
热水提取法提取胶原蛋白的方法介绍
热水提取法是将原料经过除杂蛋白等前处理之后,在一定条件下直接用热水浸提已经变性了的胶原蛋白或胶原蛋白水解物,使用的温度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃
脂肪检测—索式提取器提取法详解
原理样品经前处理后,放入圆筒滤纸内,将滤纸筒置于索式提取管中,利用YM或石油醚在水浴中加热回流,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为脂肪(粗脂肪)。采用这种方法测出游离态脂,此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质,所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。适用范围与特点索氏提
总RNA提取实验——氯化锂提取法
实验方法原理用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA 酶,用氯化锂选择沉淀RNA ,其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA ,具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高,小RNA 片断丢失的缺陷。实验材料微生物动物细胞植物组织试剂、试剂盒氯化锂尿素Tris-HCLEDTASDS仪器、
提取胡萝卜素提取的方法介绍
一、胡萝卜素的萃取法提取: 1、原理:胡萝卜素易溶于有机溶剂。 2、萃取剂的选择:萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。最佳萃取剂为石油醚。 3、影响萃取的因素 二、主要因素:萃取剂的性质和使用量。 三、次要因素:原材料颗粒的大小、紧密程度、含