时间分辨荧光技术原理
荧光和均相性分析理论上，荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此，很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振，淬灭，时间关联，荧光寿命改变以及荧光共振能量转移（ FRET）已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而，在这些应用中，一些技术条件严重受限，包括低的调整幅度，来自于分析环境组分的的信号干扰，迅变的荧光背景，以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中， FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定，能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对，距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性，可以将FRET作为一个光学标尺，来衡量生物大分子间的关系，这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文
免疫荧光技术技术特点
该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比，荧光免疫法无放射性污染，并且大多操作简便，便于推广。国外生产的TDM用试剂盒，有相当一部分
荧光抗体技术的技术特点
荧光抗体技术是以荧光物标记抗体进行抗原定位的技术。本技术较其他鉴定细菌的血清学方法有速度快、操作简单、敏感性高等特点，它在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。
荧光抗体技术的技术应用
荧光抗体技术在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。标本材料可以是培养物、感染组织、病人分泌排泄物等。荧光间接染色法测定血清中的抗体，可用于流行病学调查和临床回顾诊断。免疫荧光用于梅毒螺旋体抗体的检测是梅毒特异性诊断常用方法之一。免疫荧光技术
荧光抗体技术的技术特点
本法较其他鉴定细菌的血清学方法速度快、操作简单、敏感性高，但在细菌实验诊断中，一般只能作为一种补充手段使用，而不能代替常规诊断。荧光抗体染色法对脑膜炎奈氏菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、布氏杆菌和炭疽杆菌等的实验诊断有较好效果。
免疫荧光技术技术分类
⑴ 荧光抗体技术抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。⑵ 免疫荧光测定抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法⑴荧光物质1)荧光色素许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染
流式荧光技术的技术特点
1、高通量：将许多种不同荧光编码的微球放在同一反应体系内，一次可同时检测2-500种生理病理指标，这与传统方法的逐个检测相比是质的飞跃。2、高敏感性：流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml，常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级，比后者检测的灵敏度提高10—100倍。3、线性范围
飞行时间质谱技术
质谱分析本是一种物理方法，其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离，生成不同荷质比的带正电荷的离子，经加速电场的作用，形成离子束，进入质量分析器。在质量分析器中，再利用电场和磁场使发生相反的速度色散，将它们分别聚焦而得到质谱图，从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家阿斯顿质谱仪开始主要是作为一
免疫荧光技术
基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l 磷酸盐缓冲盐水（PBS）：
荧光定量PCR技术
荧光定量pcr（也称taqmanpcr,以下简称fq-pcr）是美国pe（perkinelmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规pcr基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通pcr相比，fq-pcr具有许多优点。
荧光光谱技术
16世纪，西班牙科学家Nicholas Monardes观察到，贮放在由菲律宾紫檀木制成的杯中的水会发出一种神奇而迷人的蓝光。到17世纪，Boyle等其他科学家也观察并记载了类似的发光现象。1864年，英国物理学家George Stokes首先提出发光现象作为一种分析方法，他在1852年发表的关于发
免疫荧光技术
免疫荧光技术1） 直接法1．标本经固定后，PBS洗涤3×3分钟。2．加荧光素标记的抗体，湿盒内37℃孵育50分钟。3．PBS洗涤3×3分钟。4．0.1％伊文氏兰复染。5．PBS洗3次，蒸馏水洗2次，每次3分钟，以除去NaCl结晶。6．缓冲甘油封片，镜检。 2） 间接法1．标本固定后，PBS洗涤3
免疫荧光技术
实验方法原理 直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应，形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度，确定相应抗原的存在与否及其所在部位。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBS伊文氏兰仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本经固定后，PBS洗涤3×3 分钟；2. 加荧光素标记的抗体，湿
免疫荧光技术
免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种．它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展，该技术已相当成熟。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的
荧光免疫技术介绍
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantib
荧光光谱技术
1. 瞬态光谱测试寿命的时候，如何避免误差，得到真实的实验结果，选择狭缝和激发功率有什么经验和技巧？另外测固体和液体寿命时候如何保持氮气氛围？HORIBA荧光寿命测试软件会在寿命测试结果中自动给出S.Dev，3倍的S.Dev是寿命结果的误差；在测试过程中保持a＜2%，减少堆积效应带来的测试结果偏短的
荧光分析新技术
常规的荧光分析技术主要是直接或间接对无机化合物、有机化合物等进行定性和定量分析，因其高灵敏度和选择性，得到了较为广泛的应用。然而，在实际情况中由于分析物质的复杂性、所处环境的多样性等，常规的荧光分析法收到了极大限制。许多新型的荧光技术，例如同步荧光分析、偏振荧光分析、三维荧光分析、时间分辨荧光分析、
荧光抗体技术介绍
荧光抗体技术，用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面，滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗，干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与
同步荧光扫描技术
根据激发和发射单色器在扫描过程中彼此间所保持的关系，同步扫描技术可以分为固定波长差、固定能量差以及可变角（可变波长）同步扫描。同步扫描技术具有使光谱简化、谱带窄化、提高分辨率、减少光谱重叠、提高选择性和减少散射光影响等优点。 固定波长差同步荧光光谱中，波长差的选择直接影响到同步荧光光谱的形状、带宽和
荧光抗体技术应用
荧光抗体技术在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。标本材料可以是培养物、感染组织、病人分泌排泄物等。荧光间接染色法测定血清中的抗体，可用于流行病学调查和临床回顾诊断。免疫荧光用于梅毒螺旋体抗体的检测是梅毒特异性诊断常用方法之一。免疫荧光技术
实时荧光PCR技术
实时荧光PCR（real-time PCR）因其全封闭扩增，简单快速，重复性好，无扩增后处理以及易于自动化等优点，广受大家欢迎。在分子诊断领域中，实时荧光PCR方法涉及的领域包括感染性疾病、肿瘤、遗传病等多方面。那么实时荧光PCR技术是如诞生的呢？下面，由小编带领大家一起了解大牛们是如何经过
血小板生存时间测定的原理
丙二醛（MDA）法或TXB2法：由于阿司匹林能不可逆性地抑制血小板AA代谢过程中环氧酶的活性，使其代谢产物MDA和TXB2生成减少。与此同时，因新生血小板未受阿司匹林的抑制，故其MDA和TXB2含量正常。根据病人口服阿司匹林后，血小板MDA和TXB2生成量的恢复曲线可推算出血小板的生存时间。MDA含
凝血酶原时间的原理
凝血酶原时间也是凝血系统的一个较为敏感的筛选试验。凝血酶原时间主要反映外源性凝血是否正常。其原理是在抗凝血中，加入足够量的组织凝血活酶（组织因子,TF）和适量的钙离子，满足外源性凝血条件，从加入钙离子到血浆凝固所需的时间即为PT。
荧光免疫技术的荧光物质有哪些？
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC)：呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200)：呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)：呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE)：呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物：其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围
荧光免疫技术荧光的基本知识
荧光的基本知识：1.荧光偏振。2.荧光寿命：荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。3.荧光：某些物质受到一定波长光的激发后，在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。4.激发光谱：固定检测发射光荧光波长，用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。5.发
荧光免疫技术荧光的基本知识
荧光的基本知识：1.荧光偏振。2.荧光寿命：荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。3.荧光：某些物质受到一定波长光的激发后，在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。4.激发光谱：固定检测发射光荧光波长，用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。5.发
荧光免疫技术的荧光物质有哪些？
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC)：呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200)：呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)：呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE)：呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物：其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围
疫荧光技术常用的荧光有哪些？
荧光素1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC:
实时定量PCR技术综述（原理、荧光标记、TaqMan－Probes和...1
一．实时定量PCR基本原理1.PCR反应动力学右图为PCR反应曲线（横坐标为循环数，纵坐标表征产物量），不同的曲线代表初始模板量不同的 PCR反应。PCR反应的动力学公式为：Cn=C0(1+E)n其中C0和Cn分别为初始模板和n循环的拷贝数，n为循环数，E为扩增效率（0≤E≤1），理想状态下（即每个
倒置荧光显微镜技术参数、构造及成像原理
倒置荧光显微镜是近代发展起来的新式荧光显微镜，特点是激发光从物镜向下落射到标本表面，即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器，它与光铀呈45。角，激发光被反射到物镜中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，反回到双色
实时定量PCR技术综述（原理、荧光标记、TaqMan－Probes和...2
下表列出了部分文献报道的TaqMan Probes技术所使用的酶和其它相关参数。 Target P1 P2 Probe Enzyme 退火温度 延伸温度 HCV 19