荧光免疫技术的荧光物质有哪些?
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于时间分辨荧光免疫测定。2.酶作用后产生荧光的物质:4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷本身无荧光,受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光。其他如碱性磷酸酶的底物是4-甲基伞酮磷酸盐。辣根过氧化物酶的底物是对羟基苯乙酸等。......阅读全文
荧光免疫技术的荧光物质有哪些?
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围
荧光免疫技术的荧光物质有哪些?
(一)荧光色素1.异硫氰酸荧光素(FITC):呈现明亮的黄绿色荧光。2.四乙基罗丹明(RB200):呈橘红色荧光。3.四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC):呈橙红色荧光。4.藻红蛋白(R-RE):呈明亮的橙色荧光。(二)其他荧光物质1.镧系螯合物:其中以Eu3+应用最广。Eu3+螯合物的激发光波长范围
免疫荧光技术的常见荧光剂有哪些?
1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它
免疫荧光技术的常用酶作用生物质有哪些?
酶 底物 产物 激发光 发射光Β-G MUG MU 360 450AP MUP MU 360 450HRP HPA 二聚体 317 414
免疫荧光技术的所需荧光物质介绍
⑴荧光物质1)荧光色素许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有:⑴异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂。
免疫荧光技术的特点有哪些?
该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。 荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广。国外生产的TDM用试剂盒,有相
免疫荧光技术的优点有哪些?
高灵敏度:免疫荧光技术对抗原的检测具有很高的灵敏度,即使在极微量的抗原存在下也能进行检测。 高特异性:由于抗体与抗原的特异性结合,免疫荧光技术可以准确地定位和检测特定的蛋白质或抗原。 可视化:该技术允许直接在细胞或组织中观察靶标抗原,提供了直观的视觉信息,有利于了解抗原的分布和定位。 双重
免疫荧光技术的缺点有哪些?
信号衰减:荧光信号会随时间衰减,尤其是在长时间曝光于激发光下,这要求在实验过程中及时捕获图像。 非特异性背景:可能会发生非特异性结合,需要通过适当的封闭和对照实验来减少背景信号。 荧光淬灭:在某些条件下,荧光标记可能会淬灭,影响结果的可靠性。 需要特殊设备:免疫荧光显微镜和相关设备相对昂贵
免疫荧光技术的优缺点有哪些?
优点: 高灵敏度:免疫荧光技术对抗原的检测具有很高的灵敏度,即使在极微量的抗原存在下也能进行检测。 高特异性:由于抗体与抗原的特异性结合,免疫荧光技术可以准确地定位和检测特定的蛋白质或抗原。 可视化:该技术允许直接在细胞或组织中观察靶标抗原,提供了直观的视觉信息,有利于了解抗原的分布和定位
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质有哪些?
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。
免疫荧光技术在哪些领域有应用?
医学研究:在基础医学研究中,免疫荧光技术被用于研究细胞结构、功能以及不同蛋白质在细胞中的定位。此外,这项技术也被用于研究疾病的发病机制,如癌症、神经退行性疾病和自身免疫疾病等。 临床诊断:在临床诊断中,免疫荧光技术被用于检测和诊断各种病原体,如病毒、细菌和寄生虫等。此外,它也被用于自身免疫疾病
荧光免疫技术常用荧光色素有哪些?
①异硫氰酸荧光素,呈现明亮的黄绿色荧光。②四乙基罗丹明,呈橘红色荧光。③四甲基异硫氰酸罗丹明,呈橙红色荧光。④藻红蛋白,呈明亮的橙色荧光。
荧光免疫技术常用荧光色素有哪些?
①异硫氰酸荧光素,呈现明亮的黄绿色荧光。②四乙基罗丹明,呈橘红色荧光。③四甲基异硫氰酸罗丹明,呈橙红色荧光。④藻红蛋白,呈明亮的橙色荧光。
荧光免疫测定的缺点有哪些?
非特异性干扰:FICA可能受到样品中非特异性物质的干扰,影响检测结果的准确性。 荧光猝灭:荧光信号可能因多种原因而减弱,称为荧光猝灭,这可能导致信号减弱和灵敏度降低。 需要特殊设备:FICA需要特殊的荧光检测设备,如荧光显微镜或荧光酶标仪。 背景噪音:可能会有一定的背景荧光,影响检测结果的
荧光免疫测定的优点有哪些?
高灵敏度:FICA具有很高的灵敏度,可以检测到微量的物质,包括抗原、抗体和半抗原。 宽线性范围:FICA的线性范围较宽,对于不同浓度的待测物,能够保持较好的线性关系。 标记物质稳定:用于标记的荧光素相对稳定,不易受到外界因素的影响。 适合自动化和标准化:FICA技术适用于自动化和标准化操作
荧光免疫组织化学技术的应用有哪些
1.在自身免疫性疾病中的应用:自身免疫性疾病患者,检测组织中的自身抗体。补体荧光法等可检测免疫复合物沉积在组织器官细胞上的位置,对于了解肾小球性肾炎、类风湿关节炎病变侵犯和病变基础与程度极有帮助。 2.细菌和病毒的快速鉴定:在细菌学诊断方面,可用于淋病双球菌、百日咳杆菌、梅毒螺旋体等的快速诊断
荧光免疫技术
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibod
荧光免疫测定的优缺点有哪些?
优点: 高灵敏度:FICA具有很高的灵敏度,可以检测到微量的物质,包括抗原、抗体和半抗原。 宽线性范围:FICA的线性范围较宽,对于不同浓度的待测物,能够保持较好的线性关系。 标记物质稳定:用于标记的荧光素相对稳定,不易受到外界因素的影响。 适合自动化和标准化:FICA技术适用于自动化和
荧光显微技术有哪些检测方法?
1.直接法:用特异荧光抗体直接滴加于标本上,使之与抗原发生特异性结合。本法操作简便,特异性高,非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低,且每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。2.间接法:可用于检测抗原和抗体。本法有两种抗体相继作用,第一抗体为针对抗原的特异抗体,第二抗体(荧光抗体)为针对第一抗体的
免疫荧光技术在法医学中的应用有哪些?
在法医学中,免疫荧光技术主要用于检测和鉴定各种生物样本中的特定蛋白质、抗体或抗原。这项技术可以帮助法医科学家确定死因、识别血迹中的特定蛋白质、检测毒品或毒物,以及进行DNA分析等。以下是一些具体的应用示例: 确定死因:通过检测组织样本中的特定毒素、药物或生物标志物,免疫荧光技术可以帮助确定死亡
免疫荧光标记最常用的荧光染料有哪些条件呢
用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件: 荧光染料应有较高的量子产额和消光系数; 荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收; 发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差; 容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。 1.异硫氰酸荧光素(FITC):可产生亮绿色荧光。F
荧光免疫技术荧光的基本知识
荧光的基本知识:1.荧光偏振。2.荧光寿命:荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。3.荧光:某些物质受到一定波长光的激发后,在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。4.激发光谱:固定检测发射光荧光波长,用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。5.发
荧光免疫技术荧光的基本知识
荧光的基本知识:1.荧光偏振。2.荧光寿命:荧光物质被激发后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间称为荧光寿命。3.荧光:某些物质受到一定波长光的激发后,在极短时间内发射出的波长大于激发光波长的光。4.激发光谱:固定检测发射光荧光波长,用不同波长的激发光照射样品所记录到的相应的荧光发射强度谱图。5.发
荧光底物有哪些
(一)荧光色素 许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素.只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料.常用的荧光色素有: 异硫氰酸荧光素2.四乙基罗丹明 3.四甲基异硫氰酸罗丹明4.藻红蛋白(二)其他荧光物质 1.酶作用后产生荧光的物质:某
免疫荧光技术
基本原理 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l 磷酸盐缓冲盐水(PBS):
免疫荧光技术
免疫荧光技术1) 直接法1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。3.PBS洗涤3×3分钟。4.0.1%伊文氏兰复染。5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。6.缓冲甘油封片,镜检。 2) 间接法1.标本固定后,PBS洗涤3
免疫荧光技术
实验方法原理 直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在部位。实验材料 抗体试剂、试剂盒 PBS伊文氏兰仪器、耗材 显微镜实验步骤 1. 标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;2. 加荧光素标记的抗体,湿
免疫荧光技术
免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展,该技术已相当成熟。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的
荧光免疫技术介绍
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantib
疫荧光技术常用的荧光有哪些?
荧光素1)FITC2)RB2003)TRITC4)镧系:Eu、Tb5)PE6)其它常见荧光素的特性1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光。2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧光。3)TRITC: