时间分辨荧光技术原理

荧光和均相性分析理论上,荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移( FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而,在这些应用中,一些技术条件严重受限,包括低的调整幅度,来自于分析环境组分的的信号干扰,迅变的荧光背景,以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中, FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定,能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对,距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性,可以将FRET作为一个光学标尺,来衡量生物大分子间的关系,这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文

免疫荧光染色技术

抗原物质固定剂固定条件(min)蛋白质抗原95%~100%乙醇室温3~10酶、激素丙 酮4℃ 30免疫球蛋白四氯化碳病 毒丙酮、四氯化碳、无水乙醇室温5~10或4℃ 30~60多糖、细菌等微火加热,甲醇、10%甲醛、丙酮室温5~10或4℃ 30~60类 脂 (异嗜性抗原)10%甲醛,10%佛茂尔(F

荧光素标记抗体技术

(一) 原理  目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力

荧光抗体技术的概念

荧光抗体技术,用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面,滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗,干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物;阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与抗

荧光显微技术检测方法

(一)直接法:用特异荧光抗体直接滴加于标本上,使之与抗原发生特异性结合。本法操作简便,特异性高,非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低,且每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。(二)间接法:可用于检测抗原和抗体。本法有两种抗体相继作用,第一抗体为针对抗原的特异抗体,第二抗体(荧光抗体)为针对第一抗

免疫荧光技术简介

  免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)   1941年,Coons等于首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。该技术的主要特点是:特异性强、敏

荧光免疫测定技术

荧光免疫测定技术的概念:将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记,试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术,称为免疫荧光测定技术。荧光免疫测定技术分类:荧光抗体技术(荧光显微镜技术):抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。免疫荧光测定技术:抗原抗体反应后,利用特

免疫荧光技术简介

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)1941年,Coons等于首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性

流式荧光的技术特点

1、高通量:将许多种不同荧光编码的微球放在同一反应体系内,一次可同时检测2-500种生理病理指标,这与传统方法的逐个检测相比是质的飞跃。2、高敏感性:流式荧光技术最高的检测下限可达0.01 pg/ml,常规的酶联免疫吸附试验(ELISA)仅为μg级,比后者检测的灵敏度提高10—100倍。3、线性范围

时荧光定量PCR技术

   时荧光定量PCR技术即是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR避免了传统PCR以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的 mRNA

免疫荧光技术简介

免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)又称荧光抗体技术,根据抗原抗体反应的原理,将荧光素偶联到已知的抗原或抗体上制成荧光探针,与血清或体液、细胞、组织中存在的相应抗体(或抗原)结合,从而对这些组织中存在的抗原或抗体进行定性、定量和(或)定位的检测。抗体的选择

原子荧光联用技术

联用技术离子色谱-蒸气发生/原子荧光及高效液相色谱-蒸气发生/原子荧光联用技术应用于砷、汞元素形态分析的新进展。国际上对食品和环境科学中有毒、有害有机污染物高度重视,且在有机污染物的监测分析有了很大发展。人们已越来越认识到砷、汞、硒、铅、镉等元素不同化合物的形态其作用和毒性存在巨大的差异。例如砷是一

ATP-荧光检测技术介绍

1. 什么是ATP?ATP,即三磷酸腺苷,是一种不稳定的高能化合物,在活体细胞中,与ADP相互转化实现贮能和放能,从而保证细胞各项生命活动的能量供应。2.ATP与微生物数量、环境卫生的关系ATP浓度与细胞数量成正比杂菌悬液与ATP浓度的关系细胞内ATP含量受细菌种类,生长状态,周围环境的影响。3.A

光控荧光染料的超分辨成像研究获新进展

  近日,华东理工大学费林加诺贝尔奖科学家联合研究中心与中科院上海药物研究所、国家蛋白质中心、美国得克萨斯大学奥斯丁分校以及英国巴斯大学合作,在酶激活型光控荧光染料的超分辨成像研究中取得重要进展,研究成果以“光致变色荧光探针策略实现生物标志物超分辨成像”为题发表于《美国化学会志》。 酶是人体不可

新型超分辨显微镜测试荧光片特性与应用简介

介绍一种最新的超分辨显微镜测试荧光片  近年来,超高分辨率显微镜SIM,STED,dstorm显微镜越来越普及,高端荧光显微系统由于其高分辨,高灵敏度的特点,成像系统的校准显得尤为重要。最近德国GATTA公司发布了新的标准荧光样品片,KOSTER & GATTA 细胞系列标准荧光片。 此系列标准

山西大学最新文章;新型超分辨率荧光成像

  来自山西大学激光光谱研究所, 量子光学与光量子器件国家重点实验室的研究人员将荧光探针分子ALEXA647标记在仿生水凝胶的聚合物链上, 利用全内反射荧光显微镜进行荧光成像, 并采用超分辨率光学波动成像的方法(SOFI)对仿生水凝胶的荧光成像进行超分辨率成像分析。 通过SOFI成像及反卷积处理获得

硬核!大连化物所指导开发超分辨成像自闪荧光染料

  近日,大连化物所分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员团队与新加坡科技设计大学刘晓刚教授团队合作,发现罗丹明染料开关环物种稳态下的吉布斯自由能的差值(ΔGC-O)同开环比例具有优异的线性关系(R2=0.965)。此线性关系可以定量地指导设计特定开环比例的罗丹明染料。  单分子定位超分

紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢

紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形。紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢? 首先了解一下什么是荧光,荧光又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光

紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢

紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形。紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢? 首先了解一下什么是荧光,荧光又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光

紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢

紫外分析仪分为很多系列,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,不同的紫外分析仪有不同的用途。图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形。紫外分析仪是荧光技术的应用,荧光技术是什么呢? 首先了解一下什么是荧光,荧光又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光

荧光测硫仪工作原理

 荧光测硫仪工作原理  荧光硫测定仪是采用物理分析方法, 快速测定水泥中SO3的百分含量,能让水泥企业即时调整水泥中石膏的掺入量并预知用该种水泥生产的混凝土的凝固时间,还可以应用于需要分析SO3百分含量的其他场合,比水泥化学分析法和石膏化学分析法准确、快捷。适用范围  荧光测硫仪(硫含量测定仪)可广

荧光光谱仪原理

荧光分析法的基本原理处于基态的被测物质的分子在吸收适当能量,如光、化学、物理能后,其共价电子从成键分子轨道或非键分子轨道跃迁到反键分子轨道上去,形成分子激发态。分子激发态不稳定,将很快衰变到基态。在分子激发态返回到基态的同时常伴随着光子的辐射。这种现象就是发光现象。荧光则属于分子的光致发光现象。二、

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

自动光合荧光测量系统原理

气体分析器是光合作用测量系统的核心。分析器紧靠叶室,了测量的快速响应;对流经分析器的空气温度快速测量显著提升了数据的精度;转速提升使得气孔导度数据更加准确;腔室内壁使用高新材料涂层降低了CO2扩散和H2O吸附几率,确保测量的净光合速率和蒸腾速率更加准确;实现了对叶室环境的完自动控制,自动光合荧光测量

双荧光素酶实验原理

双荧光素酶实验原理:利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点,把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因(firefly luciferase)的上游,构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞,适当刺激或处理后裂解细胞,测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断性刺前后或不同刺激对感兴趣

荧光定量PCR:简介,原理,应用

荧光定量PCR简介 荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据

荧光原位杂交的原理

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。

荧光定硫仪反应原理

荧光定硫仪是采用荧光分析法与计算机控制技术相结合研制开发的新一代测定固体、液体及气体物料中总硫含量的分析系统。仪器采用新型电子元件设计的微电流放大器和微机控制数据采集与处理以及新颖光学系统构成。荧光定硫仪具有灵敏度高、噪音低、线性范围宽、抗干扰能力强以及操作简便、性能稳定等优点。广泛应用于石油、化工