时间分辨荧光技术原理
荧光和均相性分析理论上,荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移( FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而,在这些应用中,一些技术条件严重受限,包括低的调整幅度,来自于分析环境组分的的信号干扰,迅变的荧光背景,以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中, FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定,能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对,距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性,可以将FRET作为一个光学标尺,来衡量生物大分子间的关系,这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文
实时荧光定量PCR技术2
qRT-PCR基因表达分析在384孔板上11ul/孔的总反应体积中,使用荧光Universal ProbeLibrary(UPL)探针(罗氏公司)和ABI 7900HT 实时仪器(美国应用生物系统公司)以及2X FastStart Universal Probe Master (Rox)PCR试剂(
X射线荧光分析技术简介
X光荧光分析又称X射线荧光分析(XRF)技术,即是利用初级x射线光子或其他微观粒子激发待测样品中的原子,使之产生荧光(次级x射线)而进行物质成分分析和化学形态研究的方法。
流式荧光技术的应用介绍
白血病是严重威胁人类健康的恶性疾病,既往的细胞形态学分型诊断符合率及正确率受检测者主观成分影响较大,近两年白血病分子特征的研究取得了明显进展,尤其是对染色体易位形成的融合基因,有一些已作为诊断不同类型白血病的分子生物学特异性标志和确定诊断的唯一依据。基于此,在流式荧光技术基础上推出的白血病融合基因检
双层免疫荧光技术介绍
中文名称双层免疫荧光技术英文名称double layer immunofluorescence定 义即用未标记的第一抗体结合特异性抗原,再以荧光标记的第二抗体与之反应,用于检测未知抗原或抗体的技术。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
免疫荧光技术操作步骤
基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少,相对使用标记抗体用量偏大。试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4荧光标记的抗体溶液:以 0.01mol/L,pH7.4 的 PBS 进行稀释缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油
酶标仪中的荧光检测技术
1.概述室温下,大多数分子处于基态的zui低振动能级,处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态,激发态不稳定,将很快衰变到基态,以光的形式放出能量,这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光,磷光,化学发光,生物发光等。受到光照时发光,光照切断时发光立即消失的叫荧光,光照切断
荧光抗体技术的应用介绍
荧光抗体技术在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。标本材料可以是培养物、感染组织、病人分泌排泄物等。荧光间接染色法测定血清中的抗体,可用于流行病学调查和临床回顾诊断。免疫荧光用于梅毒螺旋体抗体的检测是梅毒特异性诊断常用方法之一。免疫荧光技术
免疫荧光技术的应用
一、标本的制作免疫荧光技术在实际应用上主要有直接法和间接法。直接法是在检测样品上直接滴加已知特异性荧光标记的抗血清,经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。免疫荧光直接法可清楚地观察抗原并用于定位标记观察。间接法是在检测样品上滴加已知的细菌特异性抗体,待作用后经洗涤,再加入荧光标记的第二抗体。如研制成的抗沙
免疫荧光层析技术
免疫层析技术因其简单、方便、易操作、快速,价格相对低廉,已广泛应用于即时检测(POCT)。随着POCT检测项目的增多和对已有项目检测定量、灵敏度、特异度等要求提高。 1免疫层析技术简介 免疫层析技术是在20世纪60年代在发达国家兴起并被用于检测血清蛋白的一种结合了免疫技术和色谱层析技术的快速
间接荧光抗体技术的概念
中文名称间接荧光抗体技术英文名称indirect fluorescence antibody technique定 义一种免疫标记技术。即应用荧光标记的二抗,通过与第一抗体结合而检测未知抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
荧光抗体技术的应用介绍
荧光抗体技术在临床检验上已用作细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。在细菌学检验中主要用于菌种的鉴定。标本材料可以是培养物、感染组织、病人分泌排泄物等。荧光间接染色法测定血清中的抗体,可用于流行病学调查和临床回顾诊断。免疫荧光用于梅毒螺旋体抗体的检测是梅毒特异性诊断常用方法之一。免疫荧光技术
免疫荧光技术——间接法
实验方法原理基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合,再用荧光素标记的二抗与特异性抗体相结合,形成抗原-特异性抗体-标记荧光抗体的复合物。因为在复合物上带有比直接法更多的荧光标记物,所以比直接法更敏感。实验材料抗体试剂、试剂盒PBS伊文氏兰仪器、耗材显微镜实验步骤1. 标本固定后,PBS洗涤3
荧光免疫法的技术特点
该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。荧光免疫法按反应体系及定量方法不同,还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比,荧光免疫法无放射性污染,并且大多操作简便,便于推广。国外生产的TDM用试剂盒,有相当一部分
荧光偏振技术的相关概述
荧光偏振(FP)检测技术是一种以荧光标记的检测技术,它把荧光物质标记在特定物质上,使原本微弱的反应信号转化成较强的荧光信号,起到信号增强的作用。与此同时,在检测系统中加上起偏器和检偏器,当从光源发出的一束光线经垂直起偏器后成为垂直偏振光, 样品被垂直偏振光激发而产生偏振荧光, 此荧光经检偏器后可
免疫荧光技术——直接法
免疫荧光技术可应用于:(1)研究特异蛋白抗原在细胞内分布;(2)对抗原进行细胞定位;(3)对特定抗原进行定量检测。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)实验方法原理直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存
实时荧光定量PCR技术简介
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入
X射线荧光分析技术分类
X射线荧光分析技术可以分为两大类型:波长色散X射线荧光分析(WDXRF)和能量色散X射线荧光分析(EDXRF);而能量色散型又根据探测器的类型分为(Si-PIN)型和SDD型。在不同的应用条件下,这几种类型的技术各有其突出的特点。目前,X射线荧光分析不仅材料科学、生命科学、环境科学等普遍采用的一
生物芯片技术荧光探针
目前用荧光探针作为检测信号的仪器,主要是考虑荧光标记所要检测的DNA的效率,以及荧光探针本身的发光效率和光谱特性。PCR过程中的DNA标记1.末端标记:在引物上标记有荧光探针,在DNA扩增过程时,使新形成的DNA链末端带有荧光探针。2 .随机插入:选择四种缄机基,使其中一种或几种挂有荧光探针,在PC
酶标仪中的荧光检测技术
1.概述室温下,大多数分子处于基态的zui低振动能级,处于基态的分子吸收能量(光能、化学能、电能或热能)后跃迁至激发态,激发态不稳定,将很快衰变到基态,以光的形式放出能量,这种现象称为“发光现象”。分子发光包括荧光,磷光,化学发光,生物发光等。受到光照时发光,光照切断时发光立即消失的叫荧光,光照切断
讲解实时荧光定量PCR技术
实时荧光定量PCR (real time fluorogenetic quantitative PCR, FQ-PCR),是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术。它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时检测整个PCR过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该
间接荧光抗体技术的定义
中文名称间接荧光抗体技术英文名称indirect fluorescence antibody technique定 义一种免疫标记技术。即应用荧光标记的二抗,通过与第一抗体结合而检测未知抗原。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
荧光原位杂交技术的技术优势
与其他原位杂交技术相比,荧光原位杂交具有很多优点,主要体现在:①FISH不需要放射性同位素标记,更经济安全。②FISH的实验周期短,探针稳定性高,特异性好,定位准确,能迅速得到结果。③FISH通过多次免疫化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与放射性探针相当。④多色FISH通过在同一个核中显
叶绿素荧光技术植物逆境高温胁迫测量技术
随着全球变暖,植物高温胁迫研究受到越来越多的关注,研究手段也越来越丰富,其中包括植物荧光测量:NPQ, Fv/Fm, OJIP, and Quantum Photosynthetic Yield。本文将着重介绍如何高效、快速简便地测量这些荧光参数。非光化学淬灭(NPQ)测量非光化学淬灭(NPQ)测量
Nature-Methods“修图”技术遭质疑:低分辨率变成高分辨率
科学家们利用一种人工智能技术,将低分辨率的细胞显微照片转化为使用超高分辨率技术才能得到的高质量图像。 这一研究成果公布在12月17日的Nature Methods杂志上,新技术有助于研究人员利用标准台式显微镜获得高质量的图像。文章作者,加州大学洛杉矶分校Aydogan Ozcan表示, “(超
原子荧光检测项目有哪些?原子荧光原理详解
原子荧光光谱仪按色散型及非色散型划分。由于原子荧光光谱设备简单、具有高灵敏度、抗光谱干扰、工作曲线线性范围宽等优势,常用于检测环境科学、地质、石油、冶金、生物医学及地球化学等项目领域。 一、什么是原子荧光? 原子荧光定义:在气态自由原子吸收特征波长辐射后,原子的外层电子从基态或低能级跃迁到高能级
冷冻电镜技术突破原子分辨率障碍
如果想绘制出蛋白质最微小的部分,科学家通常选择不多:使数百万个单个蛋白质分子排列成晶体,然后用X射线晶体学分析它们;或者快速冷冻蛋白质的副本,然后用电子轰击它们,这是一种低分辨率的方法,叫做冷冻电镜技术。 据《科学》报道,现在,科学家们第一次将冷冻电镜的分辨率提高到原子水平,以精确定位各种蛋白质
显微角分辨光谱仪的技术指标
技术指标 1.测量模式:9种 具体包括:①FAR全角度入射反射模式,②FAT全角度入射透射模式,③CAR定角度入射反射模式,④CAT定角度入射透射模式,⑤Rad发光模式,⑥FrS前散射模式⑦BaS背散射模式⑧FrA自由角度模式⑨Pgm编程模式自动采谱。 2.波段范围380~1100nm(可见)
单细胞测序技术如何提升时空分辨率?
单细胞测序技术可以通过以下几种方法来提升时空分辨率:改进样本处理和标记技术开发更精细的组织切片和细胞捕获方法,例如使用激光捕获显微切割(LCM)技术精确获取特定区域的细胞。采用新型的荧光标记或同位素标记策略,对细胞进行时空特异性标记。结合空间转录组学技术如使用空间条形码(Spatial Barcod
新的DNA成像技术达到纳米分辨率
斯坦福大学的研究人员近日开发出一种新的DNA成像技术,它基于单分子显微镜,可在纳米水平观察DNA链。在上周发表于《Optica》杂志的一篇文章中,研究小组介绍了这种新技术,并获得了数千个荧光染料分子与DNA链结合的超分辨率图像和方位测定。 研究人员认为,这种成像技术能在纳米水平提供DNA本身的
超分辨光学显微成像技术的新进展
从17世纪开始,现代生物学的发展就与显微成像技术紧密相关。然而,由于受光学衍射极限的影响,传统光学显微成像分辨率最小约为入射光波长的一半。因此,科学家们一直在不断努力,试图寻找突破光学显微镜分辨极限的方法。在超分辨显微技术飞速发展的同时,现有成像技术的缺陷也日益显现,例如成像分辨率和成像时间不可兼得