时间分辨荧光技术原理
荧光和均相性分析理论上,荧光是最灵敏的检测手段。由于许多分子间和分子内的变化会改变标记物的荧光发射。因此,很早就把它作为均相分析技术可能的新的手段。偏振,淬灭,时间关联,荧光寿命改变以及荧光共振能量转移( FRET)已经被广泛应用在对分子间作用的研究中 1-5 。然而,在这些应用中,一些技术条件严重受限,包括低的调整幅度,来自于分析环境组分的的信号干扰,迅变的荧光背景,以及在分析环境中由蛋白、分子以及聚合物导致的光的散射。在这些技术中, FRET是项令人很感兴趣的技术。 Foster假定,能量传输速率是依赖于激发态供体与附近的受体分子间的距离 6 。对于已知的供受体对,距离 R 0 (传输效率为50%的距离)在1-7nm的宽度。利用这些特性,可以将FRET作为一个光学标尺,来衡量生物大分子间的关系,这一点已经通过Stryer等人的先驱性工作 14 以及随后开展起来的研究证实了它的可行性 8-10 。对于研究溶液中分子间距离和相互......阅读全文
操作时间分辨荧光免疫分析仪时的注意事项
1. 使用环境:将仪器置于水平、稳固、洁净的地方。自然环境中稀土离子存在十分广泛,如空气灰尘和烟雾中,均有不同程度的含量,尤以北方地区为甚,所以应建立一个相对无尘的操作环境,防止器材、试剂和操作者在操作中不慎可能造成的污染。 2. 操作时按照实验室安全工作准则,戴手套穿工作服,不得戴首饰,以避
超分辨率荧光显微技术的意义
利用超高分辨率显微镜,可以让科学家们在分子水平上对活体细胞进行研究,如观察活细胞内生物大分子与细胞器微小结构以及细胞功能如何在分子水平表达及编码,对于理解生命过程和疾病发生机理具有重要意义。
免疫荧光技术技术原理
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。直接法将标记的特异性
流式荧光技术的技术原理
将荧光标记后的单细胞(或颗粒)悬液进入吸样管,进而随鞘液进入流动室。进入流动室之前的管道变细,迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室,在外加压力的作用下由下向上(或由上向下)直线流动。鞘液充满流动室将样品裹挟,当二者通过流动室喷嘴流出时,压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。在检测区
在读板机上进行基于时间分辨荧光标记的Western-...(一)
在读板机上进行基于时间分辨荧光标记的Western Blot蛋白检测和定量摘要蛋白检测在制药和临床研究领域是一项非常重要的项目,而Western Blot(WB)检测则是众多蛋白检测方法中最常见的一种。目前,检测转印到WB膜上蛋白的技术众多,包括荧光标记、银染和化学发光法等。可是,每一种技术都有
在读板机上进行基于时间分辨荧光标记的Western-...(二)
灵敏度和动态检测范围使用GST进行灵敏度和动态检测范围测试,使用1X上样液三倍梯度稀释GST,然后加到4-20%梯度胶中跑胶30min,然后转印到Immobilon FL膜上,使用生物素标记的兔抗-GST标记2小时,之后与Eu-标记的链霉素孵育1小时,然后洗膜,晾干使用SpectraMax
荧光定量PCR技术原理
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增
流式荧光的技术原理
将荧光标记后的单细胞(或颗粒)悬液进入吸样管,进而随鞘液进入流动室。进入流动室之前的管道变细,迫使鞘液从四周、样本在中心进入流动室,在外加压力的作用下由下向上(或由上向下)直线流动。鞘液充满流动室将样品裹挟,当二者通过流动室喷嘴流出时,压力迫使鞘液包裹的液滴包含单一细胞或颗粒垂直通过检测区。在检测区
荧光PCR技术的原理
是荧光定量PCR吧荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧
Nature:高分辨率荧光显微技术专题
近二十年来,荧光显微技术有了长足的进步,近日Nature,Science杂志就高分辨率荧光显微技术分别发文,聚焦了这一领域的重要进展。 荧光显微技术是一种分析分子生物学,细胞生物学的重要工具,这一方法能帮助科研人员了解细胞和活体生物的空间结构。通过一些荧光标记,比如GFP等,研究人员就能观测到蛋白
高分辨率荧光显微技术的发展
近二十年来,荧光显微技术有了长足的进步,上周Nature,Science杂志就高分辨率荧光显微技术分别发文,聚焦了这一领域的重要进展。 荧光显微技术是一种分析分子生物学,细胞生物学的重要工具,这一方法能帮助科研人员了解细胞和活体生物的空间结构。通过一些荧光标记,比如GFP等,研究人员就能观测到蛋
免疫荧光技术的技术原理
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看
时空分辨单细胞测序技术的原理
时空分辨单细胞测序技术的原理通常包括以下几个关键步骤:单细胞分离和捕获利用微流控技术、激光捕获切割或荧光激活细胞分选等方法,从组织样本中分离并捕获单个细胞,同时尽量保持细胞的完整性和生物活性。空间定位标记通过特定的标记方法,如给组织切片进行区域划分、使用特定的条码标记或成像技术,记录每个细胞在原始组
飞行时间质谱技术的技术原理
表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术于2002年由诺贝尔化学奖得主田中发明,刚刚产生便引起学术界的高度重视。SELDI技术是蛋白质组学研究中比较理想的技术平台,其全称是表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-tof)。其方法主要如下:通常情况下将样品经过简单的预处理后直接滴加到表面经过特
飞行时间质谱技术的技术原理
表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术于2002 年由诺贝尔化学奖得主田中发明,刚刚产生便引起学术界的高度重视。SELDI 技术是蛋白质组学研究中比较理想的技术平台,其全称是表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-tof)。其方法主要如下:通常情况下将样品经过简单的预处理后直接滴加到表面经
采购公告:东南大学时间分辨瞬态荧光光谱模块采购更正
一、项目基本情况 原公告的采购项目编号:JSHC-2022030098C7 原公告的采购项目名称:东南大学电子科学与工程学院时间分辨瞬态荧光光谱模块采购 首次公告日期:2022年03月23日 二、更正信息 更正事项:采购公告 更正内容: 开标时间更正为2022年5月12日14点30
荧光剂面膜怎么分辨
眼睛好使的,直接关灯,在暗处看色辨别,含过量荧光粉面膜会呈现出绿色或蓝色光;有验钞灯就更方便了,荧光粉在紫光照射下会明显反光。荧光剂进入体内会产生有害物质记者查询发现,国内对化妆品中的荧光增白剂的使用,没有禁用添加,也没有限制添加。此前,有美容医学专家表示,荧光增白剂在很多产品里都有,一般都是在膏霜
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
荧光定量PCR技术的原理
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
免疫荧光技术的原理
免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
荧光偏振技术的原理简介
将磷酸化底物进行荧光标记,蛋白激酶产生的磷酸化产物不进行荧光标记。让两种磷酸化产物与抗丝氨酸抗体(丝氨酸和苏氨酸是最常见的磷酸化位点,因为其结构末端含有羟基,羟基很活泼,可以与磷酸基团结合)相竞争结合。当反应液中没有蛋白激酶产生的磷酸化产物时,荧光标记的磷酸化物与抗体相结合形成复合体,由于复合体
荧光抗体技术的原理和技术特点
荧光抗体技术,用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面,滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗,干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与