激光扫描共焦显微镜技术及应用
l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文
激光共焦拉曼光谱仪的作用
激光共焦拉曼光谱仪是用来分析物质组分﹑结构等的一种有效光谱分析手段,其原理是入射激光会引起分子(或晶格)产生振动而损失(或获得)部分能量,致使散射光频率发生变化对散射光的分析,即拉曼光谱分析,可以探知分子的组分,结构及相对含量等。
激光共聚扫描显微镜的技术原理
从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。 共焦显微镜[Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichr
激光扫描共聚焦显微镜技术原理
光学显微镜作为细胞生物学的研究工具,可以分辨出小于其照明光源波长一半的细胞结构。随着光学、视频、计算机等技术飞速发展而诞生的激光扫描共聚焦显微镜 (Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),则使现代显微镜有能力研究和分析细胞在变化过程中的结构。特别是
双光子共焦显微镜有何优点
双光子共焦显微镜具有许多突出的优点:双光子共焦显微镜可以采用波长比较长的、在生物组织中穿透能力比较强的红外激光作为激发光源,因此可以解决生物组织中深层物质的层析成像问题。由于双光子荧光波长距离发光波长,因此双光子共焦显微镜可以实现暗场成像。双光子可以避免普通成像中的荧光漂白问题和生物细胞的光致毒
激光扫描共聚焦显微镜技术的主要应用范围有哪些
激光扫描聚焦扫描显微镜应用广泛,在生命科学、医学研究中日益受到重视。● 原位鉴定细胞或组织里的生物大分子、观察细胞或亚细胞形态结构原位检测核酸;检测蛋白质、抗体及其他大分子;检测细胞凋亡;细胞器的观察和测定(线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体);检测细胞融合;观测细胞骨架;检测细胞间隙连接通讯;检测细
激光显微共焦拉曼光谱仪的发展
1928年,印度物理学家C.V. Raman在研究CCl4光谱时发现,当光与分子相互作用后,一部分光的波长会发生改变(颜色发生变化),通过对于这些颜色发生变化的散射光的研究,可以得到分子结构的信息,因此这种效应命名为Raman效应。 以拉曼效应为基础发展起来的光谱学称为拉曼光谱学,属于分子振动
扫描电子显微镜技术原理及应用
1938 年德国的阿登纳制成了第一台扫描电子显微镜,1965 年英国制造出第一台作为商品用的扫描电子显微镜,使扫描电子显微镜进入实用阶段。近 20 年来,扫描电子显微镜发展迅速,多功能的分析扫描电镜(即扫描电镜带上能谱仪、波谱仪、荧光仪等)既能做超微结构研究,又能做超微结构分析,既能做定性、定量分析
激光器应用——激光扫描共聚焦显微
iFLEX激光器应用——激光扫描共聚焦显微1,什么是激光扫描共聚焦显微共聚焦显微技术是近十几年迅速发展起来的一项高新研究技术,目前应用领域扩展到细胞学、微生物学、发育生物学、遗传学、神经生物学、生理和病理学等学科的研究工作中,成为现代生物学微观研究的重要工具。激光扫描共聚焦显微镜的主要是利用激光扫描
共聚焦的共焦显微
共焦显微技术是由美国科学家M.Minsky在1957年提出的,当时的主要目的是消除普通光学显微镜在探测样品时产生的多种散射光。20世纪60年代通过提高扫描精度突破了普通宽场成像的分辨率限制,在20世纪80年代研制成商用共焦显微镜。共焦显微镜分为普通光照明激发和激光照明激发两种类型,而以后者应用最为广
激光共聚焦显微镜的分辨率是多少
真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同.1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光.其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的.由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,
为什么激光共聚焦显微镜拍出来的是灰度图
真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同。1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光。其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的。由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,
激光共聚焦显微镜与真实色共聚焦显微镜的区别
真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同。1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光。其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的。由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,
实验动物技术:激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意...
实验动物技术:激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluoresce
激光显微共焦拉曼光谱仪的激光器相关介绍
激光器主要提供激发光源。激光器用作拉曼光谱的激发光源对拉曼光谱术的快速发展起到了至关重要的作用。由于拉曼散射很弱,要求的光源强度大,而激光器提供的激发光源具有极高的亮度、方向性强、谱线宽度十分狭小以及发散度极小,可传输很长的距离而保持高亮度。因此,一般用激光器提供激发光源。 激光器种类很多,常
聚焦激光扫描显微镜
聚焦激光扫描显微镜(confocallaser scanning microscopy,CLSM)是生物医学实验室中重要的仪器设备,可以检测细胞甚至分子水平的改变,1995年美国学者在传统共聚焦激光扫描显微镜基础上加上在体扫描装置,实现了皮肤上的在体共聚焦成像,这是一种在皮肤原位、无创、细胞水平的成
激光共聚焦显微镜技术的应用
最近需要做成骨细胞培养的实验,师兄给个建议,说是可以做激光共聚焦显微镜 检测。关于这个我还真不知道该如何下手设计这个实验,网上搜集了一些资料,分享给大家,供参考。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世纪80年代发展起来的一项具
激光显微共焦拉曼光谱仪的样品装置
样品装置包含在外光路系统中。样品架的设计要保证使照明最有效和杂散光最少,尤其要避免入射激光进入光谱仪的入射狭缝。为此,对于透明样品,最佳的样品布置方案是使样品被照明部分呈光谱仪入射狭缝形状的长圆柱体,并使收集光方向垂直于入射光的传播方向。 拉曼样品主要有:透明液体、透明固体、不透明固体、加温样
激光共聚扫描显微镜的应用领域简介
激光共聚焦显微镜系统应用领域: 涉及医学、动植物科研、生物化学、细菌学、细胞生物学、组织胚胎、食品科学、遗传、药理、生理、光学、病理、植物学、神经科学、海洋生物学、材料学、电子科学、力学、石油地质学、矿产学。 应用范围: 细胞形态学分析(观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网
共聚焦激光扫描显微镜的应用pH值
pH值正常细胞胞浆内的pH一般在6.8~7.4的范围,而某些细胞器如溶酶体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、S
共聚焦激光扫描显微镜的应用pH值
pH值正常细胞胞浆内的pH一般在6.8~7.4的范围,而某些细胞器如溶酶体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、S
扫描探针显微镜的最新技术进展及应用
扫描探针显微镜(SPM s )是用来探测表面性质的仪器家族,是由B inn ig 和Roh rer 等人最早于1982年发明[1]。虽然SPM 在目前可以测量许多表面的其它性质,但是揭示表面形貌一直是它的主要应用目的。SPM 是我们这个时代中最为有力的表面测量工具,其测量表面特征的尺寸可以从原子间距
激光扫描共聚焦显微镜在生物及医学研究中的应用
在生物及医学研究中的应用 随着激光共聚焦扫描技术的不断发展和完善,LSCM 在生物学及医学相关领域的应用越来越广泛和深入,已经渗透到分子生物学、基因组学、细胞生物学、病毒学、细菌学、组织生物学、胚胎学、免疫学、病理学、流行病学、皮肤病学、肿瘤等相关分支领域。通过它可以直接观测到细胞形态学的
激光扫描共聚焦显微镜.技术发展优势
.技术发展优势 2.1 更高的清晰度和分辨率 LSCM 最基本的优势在于利用激光代替传统场光源,通过空间过滤技术消除了聚焦平面以外的次级荧光等信号干扰,可对较厚的样本进行显微 CT,整体对比度提高,从而使得分析区域内的图像更为清晰。同时,ZOOM 功能可使其在不改变物镜的前提下对样本进行放
当共焦显微镜横向扫描间距为1nm时能否实现横向超分辨
共聚焦技术主要是在光路中引入了针孔。针孔可以有效的控制聚焦深度,防止杂质信号的干扰。我觉得问题应该在题主想的太理想了,正如题主所说“ 但是共焦是分时扫描的,就是说我先观察到艾里斑A,扫描到下一处时就对应艾里斑B”;也许实际测量过程中并不一定像题主所说的通过扫描从艾里斑A到艾里斑B,很有可能这两个艾里
简介激光显微共焦拉曼光谱仪的滤光器
激光波长的散射光(瑞利光)要比拉曼信号强几个数量级,必须在进入检测器前滤除,另外,为防止样品不被外辐射源(例如:房间的灯光,激光等离子体)照射,需要设置适宜的滤波器或者物理屏障。安置滤光部件的主要目的是为了抑制杂散光以提高拉曼散射的信噪比。在样品前面,典型的滤光部件是前置单色器或干涉滤光片,它们
简介激光显微共焦拉曼光谱仪拉曼位移
在透明介质散射光谱中,入射光子与分子发生非弹性散射,分子吸收频率为ν0 的光子,发射ν0-ν1的光子,同时电子从低能态跃迁到高能态(斯托克斯线);分子吸收频率为ν0的光子,发射ν0+ν1的光子,同时电子从高能态跃迁到低能态(反斯托克斯线)。靠近瑞利散射线的两侧出现的谱线称为小拉曼光谱;远离瑞利散
激光显微共焦拉曼光谱仪的拉曼效应
光散射是自然界常见的现象。晴朗的天空之所以呈蓝色、早晚东西方的空中之所以出现红色霞光等,都是由于光发生散射而形成了不同的景观。拉曼光谱是一种散射光谱。在实验室中,我们通过一个很简单的实验就能观察到拉曼效应。在一暗室内,以一束绿光照射透明液体,例如戊烷,绿光看起来就像悬浮在液体上。若通过对绿光或蓝
激光扫描共聚焦显微镜的应用功能简介
激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激光荧光探针,利用计算机进行图像处理,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、
激光扫描共聚焦显微镜在医学领域的应用
在大脑和神经科学中的应用 激光扫描共聚焦显微镜分层扫描发现神经轴突的内部结构连续性好。用激光扫描共聚焦显微镜能观察到脑干组织中神经轴突的正常走向,可排除在荧光显微镜下由此造成的一些病理假象。并且激光扫描共聚焦显微镜能观察神经轴突的三维结构,因此应用 CLSM 有可能观察到普通光镜下未能发现的神
光学显微镜技术的新发展以及各自的突出优点
荧光显微镜,是在光镜水平上对细胞内特异的蛋白质、核酸、糖类、脂质以及某些离子等组分进行定性定位研究的有力工具。 激光扫描共焦显微镜,成像清晰,分辨率高,在研究亚细胞结构与组分的定位及动态变化等方面的应用越来越广泛,荧光共振能量转移技术、荧光漂白恢复技术以及单分子成像技术等都离不开激光扫描共焦显