激光扫描共焦显微镜技术及应用

l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文

激光扫描荧光显微镜

探测装置比较典型。方法是将杂交后的芯片经处理后固定在计算机控制的二维传动平台上,并将一物镜置于其上方,由氩离子激光器产生激发光经滤波后通过物镜聚焦到芯片表面,激发荧光标记物产生荧光,光斑半径约为5-10μm。同时通过同一物镜收集荧光信号经另一滤波片滤波后,由冷却的光电倍增管探测,经模数转换板转换为数

激光片层扫描显微镜

激光片层扫描显微镜(Light SheetFluorescence Microscopy)是一种新型显微系统,具有成像速度快、多视角成像、成像视野大、观察时间长等优点,可以对斑马鱼、果蝇、线虫、拟南介等荧光标记的模式生物进行长时间观察;同时,该设备具有光损伤小、光毒性和光漂白性小等特点,适合胚胎形成

激光共聚焦扫描显微镜

对比激光共聚焦扫描显微镜与传统光学显微镜在高放大倍率下的成像效果。结果显示,激光共聚焦扫描显微镜在高放大倍率下,其成像景深大的优点对于获取高质量的图像有很大的帮助。同时通过激光共聚焦扫描显微镜的激光光源实现单色光成像,可以清晰观察到溅镀了消影层的ITO玻璃。

激光扫描共聚焦显微镜

激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning ConfocalMicroscopy,简称LSCM),在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光,利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,捕捉到微弱的信号或追踪高效的进程以及在亚细胞水平上观察诸如

激光扫描共聚焦显微镜的扫描模块

  扫描模块主要由针孔光栏(控制光学切片的厚度)、分光镜(按波长改变光线传播方向)、发射荧光分色器(选择一定波长范围的光进行检测)、检测器(光电倍增管)组成。荧光样品中的混合荧光进入扫描器,经过检测针孔光栏、分光镜和分色器选择后,被分成各单色荧光,分别在不同的荧光通道进行检测并形成相应的共焦图象,同

激光共聚焦显微镜与传统光学显微镜的区别

 激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前较先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。  激光共聚焦显微镜原理:利用放置在光源后的照明针孔,和放置在检测器前的探测针孔,实现点照明和点

激光扫描共聚焦显微镜现有技术存在的问题

现有技术存在的问题  3.1 快速扫描与高分辨率之间的矛盾      LSCM 通过单个像素扫描获取图像,点扫描特性所依赖的机械构造注定该技术是部相对缓慢的扫描仪器,对于一幅典型的 1024*1024 像素的图像,用一个常用的 2 微秒每个像素点停留时间,仅形成一幅图像的时间就长达超过 2秒。其检测

科研中的尖兵利器浅析——共聚焦篇(上)

在科研的战场上,你是否还在苦于寻找更出色的成像技术与手段?你是否还在纠结观察到的实验现象能否真实的反映样品的情况?你是否还在为图像质量差而不能发表高质量的论文而苦恼?“工欲善其事必先利其器”,共聚焦将为你更好的解决这些问题。与传统的宽场成像相比,共聚焦作为一种高端的显微成像术,以其出色的成像质量及三

MEMS激光扫描投影技术

你能想象现在的科学技术已经可以把之前几十公斤重的激光雷达塞进一块比指甲盖还小的芯片中而且还能完成同样的工作吗?利用新世纪的集成电路和 3D 加工技术,一块小小的芯片能够承载比我们以往任何时代都多的功能,而这一技术的潜在应用领域也让芯片业巨头挤破了头去收购相关技术。  2012 年,微机电系统(MEM

细胞骨架的荧光探针标记方法

细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微丝(microfilament, MF),中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组

激光共焦显微拉曼光谱仪相比传统有什么优势

激光共焦显微拉曼光谱仪比传统的色散型拉曼光谱仪在工作效率,运行速度、分辨率、灵敏度和微量样品分析诸方面都有了很大的提高。它采用先进的光学系统设计及全息滤光片,CCD探测器等先进技术,使仪器的灵敏度及数据采集速度大大提高,总效率(信号/功率!时间)比传统仪器提高了近3个数量级。利用共焦显微拉曼光谱仪作

激光共聚焦扫描显微镜在覆铜板行业检测应用

目前覆铜板检测标准以IPC-TM-650为主,检测内容分为:外观、尺寸、电性能、物理性能、化学性能、环境性能六大类。其中外观检测中要求对金属箔面凹坑、划痕、褶皱、针孔、气泡、树脂点等进行检测分析。OLYMPUS LEXT OLS系列激光共聚焦扫描显微镜常用于材料加工表面轮廓与形状的全面三维表征的微米

激光扫描共聚焦显微镜应用细胞间通讯的研究

动物和植物细胞中缝隙连接介导的胞间通信在细胞增殖和分化中起着重要作用。 激光扫描共聚焦显微镜可通过观察细胞缝隙连接分子的转移来测量传递细胞调控信息的一些离子、小分子物质。 该技术可以用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用,也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在

扫描电镜技术原理及应用

扫描电镜一种新型的多功能的,用途最为广泛的电子光学仪器。数十年来,扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、冶金学等学科的领域中,促进了各有关学科的发展。关键词:扫描电镜;应用1938 年德国的阿登纳制成了第一台扫描电子显微镜,1965 年英国制造出第一台作为商品用的扫描电镜,使扫描电镜进入实用阶段。近

激光扫描共聚焦显微镜简介

  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,简称CLSM)是近代生物医学图象仪器。它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。  利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,以及在亚细胞水平上

激光扫描共聚焦显微镜背景

  激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope)是20世纪80年代中期发展起来并得到广泛应用的新技术 ,它是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段渗透,并与传统的光学显微镜结合产生的先进的细胞分子生物学分析仪器,在生物及医学等领域的应用越来越广

激光扫描共聚焦显微镜共享

仪器名称:激光扫描共聚焦显微镜仪器编号:A23000005产地:日本生产厂家:Olympus型号:FV3000RS出厂日期:20230216购置日期:20230216所属单位:化学系>分析中心>光学显微成像放置地点:清华大学生命科学馆141固定电话:01062771139固定手机:131216495

激光扫描共聚焦显微镜展望

LSCM 有着独特的激光扫描成像方式及精确的计算机测量定位系统,是普通显微镜和电子显微镜的飞跃和补充,加上高分辨率、高灵敏度和灵活性空间结构观察的独特优势,其成为生命科学、医学以及材料科学相关的诸多重要分支领域的全新科研实验手段和必备研究工具之一,为许多研究者提供了有力的技术支持和新的探索思路。目前

Lightsheet激光片层扫描显微镜

Lightsheet激光片层扫描显微镜是一种适用于对大型样品长时间成像的新型显微系统。本次新装机的是蔡司的 Lightsheet Z.1,它既能提供大型样品的光学切片,又几乎无光毒性或光漂白性,同时还有非常高的时间分辨率。它具有出众的多视角激光片层成像系统,能够记录大型活体样品的发育过程,对样品低损

激光扫描共聚焦荧光显微镜的成像原理和基本结构

    激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。   成像原理   采用点光源照射标本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的

基因芯片检测原理(二)

1.荧光标记杂交信号的检测方法使用荧光标记物的研究者最多,因而相应的探测方法也就最多、最成熟。由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统

激光扫描共聚焦显微镜在细胞及分子生物学的应用

  激光扫描共聚焦显微镜应用照明针与检测孔共轭成像,有效抑制了焦外模糊成像并可对标本各层分别成像,对活细胞行无损伤的“光学切片”这种功能也被形象的称为“显微 CT”。CLSM 还可以对贴壁的单个细胞或细胞群的胞内、胞外荧光作定位、定性、定量及实时分析,并对胞内成分如线粒体、内质网、高尔基体、DNA、

齿轮激光淬火技术及应用前景

  齿轮激光淬火是一种先进的表面处理技术,它结合了激光技术和淬火技术的优点,为齿轮等机械零件提供了更高效、更精密的加工方法。激光淬火技术以其独特的优势在工业生产中得到了广泛的应用,为现代制造业注入了新的活力。  激光淬火的基本原理是利用高能激光束对材料表面进行快速加热和冷却,从而改变材料表面的组织和

膜厚三维形貌测量中是如何提高工作效率

需要在高度方向上做扫描,得到一系列的切片图,然后进行图像叠加并得到三维图像,从而提高景深范围。相对于传统的光学显微镜,激光共聚焦显微镜其横向分辨率提高40%以上,优秀可达120nm。激光共聚焦显微镜样品适用性强,非接触测试,无需样品制备和导电性处理,对样品无损伤(粉末、软性样品以及透明样品均可测试)

基因芯片检测原理

杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法,如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、化学发光、荧光各向异性等等,但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质,需要确定杂交信号在芯片上的位置,尤其是大规模DNA芯片由于

生物芯片的检测原理

  杂交信号的检测是DNA芯片技术中的重要组成部分。以往的研究中已形成许多种探测分子杂交的方法,如荧光显微镜、隐逝波传感器、光散射表面共振、电化传感器、 化学发光、荧光各向异性等等,但并非每种方法都适用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的结构及性质,需要确定杂交信号在芯片上的位置,尤其是大规模DNA芯

荧光标记杂交信号的检测方法

由于荧光显微镜可以选择性地激发和探测样品中的混合荧光标记物,并具有很好的空间分辨率和热分辨率,特别是当荧光显微镜中使用了共焦激光扫描时,分辨能力在实际应用中可接近由数值孔径和光波长决定的空间分辨率,而在传统的显微镜是很难做到的,这便为DNA芯片进一步微型化提供了重要的检测方法的基础。大多数方法都是在

去焦技术的应用和用途

去焦技术主要用于正置的双聚热磁质谱仪中,且用来测定离子源至静电场这无场区域的亚稳离子。静电场是以能量的大小来区分离子,亚稳离子的速度为v1,质最为m2,显然其能量是低于稳定离子的能量eV (V为加速电压)。亚稳离子的能量应为(m2/m1)eV,若要让该亚稳离子通过静电场,则必须提髙加速电压的值,使它

激光扫描共聚焦显微镜应用细胞物理化学测定

激光扫描共聚焦显微镜可对细胞形状、周长、面积、平均荧光强度及细胞内颗粒数等参数进行自动测定。 能对细胞的溶酶体、线粒体、内质网、细胞骨架、结构性蛋白质、DNA、RNA、酶和受体分子等细胞内特异结构的含量、组分及分布进行定量、定性、定时及定位测定。

激光扫描共聚焦显微镜在眼科研究中的应用

在眼科研究中的应用利用激光扫描共聚焦显微镜可以观察晶状体,角膜、视网膜、虹膜和睫状体的结构和病理变化。