新一代蛋白研究工具――抗体芯片
蛋白组学研究是即基因组学研究后的生命科学发展的一个大方向之一。蛋白质的结构和功能最终直接影响着生命活动的变化,基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化,而真正发挥功能的蛋白要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调控才能形成,因而对蛋白质的直接研究才能真实的解释各种生命现象。但是目前研究蛋白质的手段和方法还没有很大的发展,所以寻找有效、快捷的蛋白分析技术成为了至关重要的一个环节。 蛋白芯片技术的出现给蛋白组学研究带来新思路。蛋白组学研究中一个主要的内容就是要研究在不同生理状态或病理状态下蛋白水平的量变,微型化,集成化,高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具,它也是蛋白芯片中发展最快的芯片,而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展,比如肿瘤标志物抗体芯片等,还有很多已经用在研究的各个领域里。 第一张商品化的抗体芯片是由美国BD Clontech公司推出的。这是一张用于研究......阅读全文
新一代蛋白研究工具――抗体芯片
蛋白组学研究是即基因组学研究后的生命科学发展的一个大方向之一。蛋白质的结构和功能最终直接影响着生命活动的变化,基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化,而真正发挥功能的蛋白要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调控才能形成,因而对蛋白质的直接研究才能真实的解释各种生命现
抗体芯片——新一代的蛋白分析手段
蛋白质是一切生命活动的基础,受基因表达的调控,因而以检测样品中的mRNA为基础的cDNA芯片是当今研究中倍受关注的研究手段。但是,由于存在着转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等多种调节机制,基因的表达,或者说mRNA的水平并不必然代表蛋白质产物的水平。因此,以微阵列技术对生物样品作整体蛋白质表达分析
糖蛋白标志物研究工具——凝集素芯片
糖基化是Z为广泛和复杂的蛋白质共翻译或翻译后修饰之一,它是通过糖基转移酶,在新生多肽或者成熟蛋白质的特定氨基酸上添加多个单糖的过程,通俗的理解就是在细胞器内“出厂”的蛋白质上添加各种糖链“标签”的过程。人体内至少50%的蛋白质都会发生糖基化修饰。这类修饰与蛋白质的正确折叠、构象稳定性及分泌等密
糖蛋白标志物研究工具——凝集素芯片
糖基化是Z为广泛和复杂的蛋白质共翻译或翻译后修饰之一,它是通过糖基转移酶,在新生多肽或者成熟蛋白质的特定氨基酸上添加多个单糖的过程,通俗的理解就是在细胞器内“出厂”的蛋白质上添加各种糖链“标签”的过程。人体内至少50%的蛋白质都会发生糖基化修饰。这类修饰与蛋白质的正确折叠、构象稳定性及分泌等密
糖蛋白标志物研究工具——凝集素芯片(二)
第4步:关键糖蛋白鉴定为了进一步明确是哪个蛋白的表达量发生了上调,研究人员以凝集素SNA-I为钓饵,进行了pull down实验。血清pull down产物(P-M3)经电泳分离后,对42 kDa分子量附近的蛋白条带进行了质谱鉴定。结果显示,高同源性蛋白HP和HPR的鉴定分值Z高。随后通过w
糖蛋白标志物研究工具——凝集素芯片(一)
糖基化是Z为广泛和复杂的蛋白质共翻译或翻译后修饰之一,它是通过糖基转移酶,在新生多肽或者成熟蛋白质的特定氨基酸上添加多个单糖的过程,通俗的理解就是在细胞器内“出厂”的蛋白质上添加各种糖链“标签”的过程。人体内至少50%的蛋白质都会发生糖基化修饰。这类修饰与蛋白质的正确折叠、构象稳定性及分泌等密切相关
Life-Tech新一代miRNA功能研究工具介绍
新一代miRNA功能研究工具介绍 ――mirVana™ miRNA mimics 与 inhibitors Ambion(now part of Life Technologies),是提供microRNA调控研究工具产品的第一家公司。从那时起,Ambion® miRNA m
Life-Tech推出新一代miRNA功能研究工具
Ambion(现在属于Life Technologies),是提供microRNA调控研究工具产品的第一家公司。从那时起,Ambion® miRNA mimics与 inhibitors系列产品就成了人为调节miRNA表达水平的最常用研究工具。 如今,Life Technologies
生物芯片技术扫描工具
一旦荧光标记样品和微阵列反应后,未结合的成分就可洗去,结合到芯片的样品可通过荧光检测装置进行检测。聚焦扫描仪和CCD相机均已成功地应用于芯片的检测。聚焦扫描主要是利用玻璃基质小区域(约100um2)的激光发晒透镜(或两者)使整个影像聚集,每个位点上带荧光的样品发射的光通过一系列的反光镜,光片和晶体后
吴雪琼:结核抗体蛋白诊断芯片即将投入临床
早在公元三世纪以前,我国古代医学还只是认识到该病可能是一种极为严重的慢性传染病,“累年积月,渐就顿滞,以至于死,死后复转旁人,乃至灭门”。8月25日,北京日报从解放军总医院第二附属医院(原309医院)全军结核病研究所吴雪琼课题组了解到,这项历经10年研制出的结核抗体蛋白诊断芯片超越传统结核病
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒PP 缓冲液变性裂解缓冲液仪器、耗材微量滴定板实验步骤3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表达载体里构建的,可表达带 N 端 RGS-His6 标记的大肠杆菌 cDNA 表达克隆来生产重组植物蛋白。由于超出本章节的范围,我们不在此详细叙
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒 PP 缓冲液变性裂解缓冲液仪器、耗材 微量滴定板实验步骤 3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表达载体里构建的,可表达带 N 端 RGS-His6 标记的大肠杆菌 cDNA 表达克隆来生产重组植物蛋白。由于超出本章节的范围,
植物蛋白芯片的构建和抗原抗体相互作用的研究实验
实验材料:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷试剂、试剂盒:PP 缓冲液 变性裂解缓冲液 仪器、耗材:微量滴定板实验步骤:3.1 高通量蛋白的表达和纯化我们用在 PQE30 表
新型工具有望加速抗体识别和疫苗开发研究
近日,一项刊登在国际杂志Cell上的研究报告中,来自范德堡大学的科学家们通过研究开发了一种新工具或有望加速抗体疫苗的研究;这种名为“LIBRA-seq”的工具或有望让抗体发现和疫苗开发研究领域迅速扩大。 图片来源:Cell, Volume 179, Issue 7, P1636-1646.E1
蛋白质芯片对于抗原抗体检测的应用
在CavinM.等人的实验中,蛋白质芯片上的抗原抗体反应体现出很好的特异性,在一块蛋白质芯片上10800个点中,根据抗原抗体的特异性结合检测到唯一的1个阳性位点。Cavin M.指出,这种特异性的抗原抗体反应一旦确立,就可以利用这项技术来度量整个细胞或组织中的蛋白质的丰富程度和修饰程度。其次利用蛋白
诊断结核病新技术:结核抗体蛋白诊断芯片
结核抗体蛋白诊断芯片即将投入生产使用。这项技术将超越传统结核病诊断,提高结核菌的检出率。 记者昨天(8月25日)从解放军总医院第二附属医院(原309医院)全军结核病研究所吴雪琼课题组了解到,这项历经10年研制出的结核抗体蛋白诊断芯片超越传统结核病诊断“金标准”,目前该成果已转让生
生物芯片技术的扫描工具
一旦荧光标记样品和微阵列反应后,未结合的成分就可洗去,结合到芯片的样品可通过荧光检测装置进行检测。聚焦扫描仪和CCD相机均已成功地应用于芯片的检测。聚焦扫描主要是利用玻璃基质小区域(约100um2)的激光发晒透镜(或两者)使整个影像聚集,每个位点上带荧光的样品发射的光通过一系列的反光镜,光片和晶
蛋白质芯片技术应用于抗原抗体检测
在CavinM.等人的实验中,蛋白质芯片上的抗原抗体反应体现出很好的特异性,在一块蛋白质芯片上10800个点中,根据抗原抗体的特异性结合检测到唯一的1个阳性位点。Cavin M.指出,这种特异性的抗原抗体反应一旦确立,就可以利用这项技术来度量整个细胞或组织中的蛋白质的丰富程度和修饰程度。其次利用蛋白
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术简介
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术 自身免疫性疾病是由异常免疫反应引起的慢性退行性或炎症性疾病。不同的自身免疫性疾病对机体的影响各有不同。例如,在多发性硬化症中,自身免疫反应的侵害对象是中枢神经系统,而在克罗恩病中则是肠道。此外,同种疾病对不同个体的组织和器官的影响程度不尽相同。 此类
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用3
表2. ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒 名称 Ex(nm) Em(nm) 规格 货号 ReadiLink™xtra Rapid iFluor™350抗体标记试剂盒 344 4
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用1
用特定标签标记抗体已成为生物科学和医学研究中的重要且常规程序,标签的范围从视觉标记(例如荧光染料)到半抗原分子(例如生物素),标签的作用有增强免疫复合物和蛋白质-蛋白质相互作用的可见性,以及用于蛋白质的分离和纯化。 在确定选择哪种标签类型时,应侧重于抗体的下游应用。荧光标
全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用2
方便的设计以取得最大的效果: ReadiLink™快速抗体标记试剂盒利用胺反应性标记来制备共价标记的结合物。这些反应性标记选择性地靶向并结合至目标抗体上的伯胺(例如赖氨酸残基)。要标记您的抗体,只需将您的抗体溶液(浓度约1 mg / mL)与ReadiLink™
绿色荧光蛋白融合抗体研究
融合抗体 近二十年来,抗体生成技术有了飞速发展,已经从细胞工程抗体(杂交瘤技术一单克隆抗体)发展到了第三代抗体:基因工程抗体,尤其是噬菌体抗体库技术的出现,解决了人源抗体的研制问题,促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体(Single-chain variable
新一代生物芯片的发展
自从微芯片技术在1991年发明出来之后,科学家开始利用这种微小到难以想象的芯片,研究数以万计的基因活动,由于它具有快速,以及大量的特性,因此在后基因时代,这个技术就显得非常的重要,就美国一家称为市场研究(MarketResearch)的公司所做的研究显示,DNA微芯片的产业价值会逐年的发展,估计于2
芯片分离蛋白
尽管现在所有的注意力都集中到了蛋白芯片的研究上,蛋白质组研究实验室的主流技术还是双向凝胶电泳。双向凝胶电泳在历史上由于其低通量、低重复性以及对于少量蛋白不易检出的特性,其应用受到限制,这些少量蛋白通常是人类蛋白质组中最重要的疾病相关蛋白。然而,双向凝胶电泳技术的优势又继续推动了日益进展高通量模式的细
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(一)
自身免疫性疾病是由异常免疫反应引起的慢性退行性或炎症性疾病。不同的自身免疫性疾病对机体的影响各有不同。例如,在多发性硬化症中,自身免疫反应的侵害对象是中枢神经系统,而在克罗恩病中则是肠道。此外,同种疾病对不同个体的组织和器官的影响程度不尽相同。此类疾病的严重程度取决于患者的免疫系统情况。其人群患病率
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(四)
方法多样化在一项研究自身抗体图谱能否预测小鼠对1型糖尿病的耐受性或易感性的试验中,研究人员将一组共266种抗原点样在玻璃芯片上。抗原中的肽分别来自热休克蛋白、组织抗原、免疫系统成分、结构抗原、激素、酶、血浆蛋白、合成寡核苷酸及细菌抗原。在这组266种原始抗原中,研究人员发现一个27种抗原的组合可以将
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(三)
微球芯片具有显著的优势:每个微球装置均以最佳方式单独加工,随后将不同的小球装置组合起来制备最终的多路复用小球试剂。芯片检测中可以容纳大量的分析物,因此可以使用多个内部对照以确保测定系统的预期性能。自身抗体的多路复用分析中可能需要不同的对照(表II)。相对荧光是芯片技术中常用的输出信号。可以使用荧光内
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(二)
芯片技术多路复用蛋白质分析技术最近研制成功,主要包括两种子技术:平板芯片和球形芯片。平板芯片:该技术采用一块二维微芯片,芯片内含针对各种分析所定义的反应位点。通过可溶阶段的配合基,平板芯片可以对蛋白质、代谢物及其他分子组成的混合物中的几种固定化蛋白进行同时检测。几年前,某研究小组制造了一种内置115
研究蛋白质RNA相互作用的新工具
近日,赛默飞世尔科技全新推出了一款Pierce Magnetic RNA-Protein Pull-Down Kit,让研究人员能够以末端标记的RNA作为诱饵,轻松富集蛋白质-RNA的相互作用。与抗体捕获相比,这种方法的优势在于脱硫生物素化的目标RNA能够直接富集RBP(或复合物)。 蛋白