多聚酶链式反应技术(PCR技术)
多聚酶链式反应即PCR(polymerase chain reaction)技术,应用这一技术可以将微量目的基因(DNA片段)扩增一百万倍以上。PCR反应理论的提出和技术的完善对于分子生物学的发展具有特殊的意义,它以敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等优点迅速成为分子生物学研究中应用最为广泛的方法之一,并使得很多以往无法解决的分子生物学研究难题得以解决。发明这一技术的K. Mullis因此贡献而获得了1993年度诺贝尔化学奖。 一、PCR技术的工作原理 PCR的基本工作原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5'末端和3'末端互补的寡核苷酸片段为引物(primer),在耐热DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA分子合成。重复这一过程,即可使目的DNA片段得以大量扩增。 组成PCR反应体系的基本成分包括:模板DNA、特异性引物、耐热DNA聚......阅读全文
多酶蛋白质的基本信息
中文名称多酶蛋白质英文名称multienzyme protein定 义由多个不同亚基组成的蛋白质。每个亚基分别催化部分反应最终完成整体反应。如乙酰辅酶A羧化酶由生物素羧基载体蛋白、生物素羧化酶和羧基转移酶组成,共同完成乙酰辅酶A的羧化反应。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
多酚氧化酶的基本信息
多酚氧化酶是一类含铜的氧化还原酶 。编号:EC 1.10.3.1 [1] (编号:EC 1.14.18.1 )。催化邻苯二酚氧化成邻苯二醌,也能作用于单酚单加氧酶的底物 。淡黄至暗褐色粉末或液体。溶于水,不溶于乙醇。有吸湿性。相对分子质量约为125000,最适pH为6.5,最适温度为2℃。多
多酶蛋白质的基本信息
中文名称多酶蛋白质英文名称multienzyme protein定 义由多个不同亚基组成的蛋白质。每个亚基分别催化部分反应最终完成整体反应。如乙酰辅酶A羧化酶由生物素羧基载体蛋白、生物素羧化酶和羧基转移酶组成,共同完成乙酰辅酶A的羧化反应。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
多酚氧化酶的理化性质
酶蛋白具有一般蛋白质的特性,在高温或低温条件下有易变性失活的特点。各类酶均有其活性的最适温度范围,一般在30C~50℃范围内酶活性最强。酶若失活、变性,则就丧失了催化能力。酶的催化作用具有专一性,如多酚氧化酶,只能使茶多酚物质氧化,聚合成茶多酚的氧化产物茶黄素、茶红素和茶褐素等;蛋白酶只能促使蛋白质
多酚氧化酶的基本信息
多酚氧化酶是一类含铜的氧化还原酶 。编号:EC 1.10.3.1 (编号:EC 1.14.18.1 )。催化邻苯二酚氧化成邻苯二醌,也能作用于单酚单加氧酶的底物 。淡黄至暗褐色粉末或液体。溶于水,不溶于乙醇。有吸湿性。相对分子质量约为125000,最适pH为6.5,最适温度为2℃ 。多酚氧化
发酵法制备多酶生物饲料的方法
发酵法制备的多酶生物饲料,属于发酵生物饲料的一种。利用微生物产酶,不仅可以得到多种饲用酶,起到改善饲料品质,提高利用率的效果,还能通过调节动物体内的微生态平衡,达到促进免疫力、增强机体机能等功效。 3.2.1菌种 利用微生物发酵法制备多酶生物饲料,首要关键点在于菌种的选择,好的菌种,生存能力强,
多酚氧化酶的理化性质
酶蛋白具有一般蛋白质的特性,在高温或低温条件下有易变性失活的特点。各类酶均有其活性的最适温度范围,一般在30C~50℃范围内酶活性最强。酶若失活、变性,则就丧失了催化能力。酶的催化作用具有专一性,如多酚氧化酶,只能使茶多酚物质氧化,聚合成茶多酚的氧化产物茶黄素、茶红素和茶褐素等;蛋白酶只能促使蛋白质
多酚氧化酶的检测方法介绍
常用检压法和分光光度法。前者应用多酚氧化酶(PPO)可催化儿茶素等底物在有氧条件下的氧化还原反应,根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比这一原理,用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法设备简便,但操作复杂,误差较大。后者利用邻苯二酚和D-儿茶素在PPO催
多酚氧化酶的活性测定方法
常用检压法和分光光度法。前者应用多酚氧化酶(PPO)可催化儿茶素等底物在有氧条件下的氧化还原反应,根据底物的氧化速率与单位酶浓度和单位时间内的耗氧量成正比这一原理,用瓦氏呼吸仪测定反应过程中的耗氧量求得PPO活性的大小,此方法设备简便,但操作复杂,误差较大。后者利用邻苯二酚和D-儿茶素在PPO催化下
多酚氧化酶(PPO)的分离提取
一、原理与目的多酚氧化酶是植物组织内广泛存在的一种含铜氧化酶,植物受到机械损伤和病菌侵染后,PPO催化酚与O2氧化形成醌,是组织形成褐变,以便损伤恢复,防止或减少感染,提高抗病能力。醌类物质对微生物有毒害作用,所以伤口醌类物质出现是植物防止伤口感染的愈伤反应,因而受伤组织一般这种酶的活性就会提高。多
多酚氧化酶的研究历史简介
多酚氧化酶(,PPO)是自然界中分布极广的一种金属蛋白酶,普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中,甚至在土壤中腐烂的植物残渣上都可以检测到多酚氧化酶的活性。由于其检测方便,是被最早研究的几类酶之一。自1883年Yoghid发现日本漆树液汁变硬可能和某种活性物质相关,1938年Keilin D.和Ma
上海有机所在II型聚酮合酶研究方面获进展
11月6日,中国科学院上海有机化学研究所刘文课题组在《自然-合成》(Nature Synthesis)上,在线发表了题为Analysis of siderochelin biosynthesis reveals that a type II polyketide synthase catalys
低聚葡萄糖苷酶的功能特点及结构组成
低聚葡萄糖苷酶,酶不能直接分解淀粉中的α-1,6-糖苷键,而只能分解经α-淀粉酶水解后的α—糊精中的α-1,6-糖苷键。nth="12" year="1899">2.4.2淀粉-1,6-葡萄糖苷酶该酶是一种典型的间接脱支酶,可作用于外露一个葡萄糖残基的α-1,6-糖苷键。nth="12" year=
真核基因组的中度重复顺序—多聚家族的基本介绍
多聚家族的基本单位是dT-dG双核苷酸,多个dT-dG双核苷酸串联重复在一起,分散于人体基因组中。已经发现,这个家族的一个成员位于人类δ和β珠蛋白基因之间,含有17个dT-dG双核苷酸组成的串联重复顺序。在人基因组中,dT-dG交替顺序达106拷贝,这些顺序的平均长度为40bp。人们推测,这样一
多聚准轮烷基高拉伸性瞬态水凝胶的剪切诱导组装
在国家自然科学基金项目(批准号:21772083, 21822104)的资助下,南方科技大学蒋伟课题组在超分子耗散自组装材料领域取得了重要进展。相关研究成果以“Shear-induced Assembly of A Transient yet Highly Stretchable Hydroge
离子色谱法测定水产品中的多聚磷酸盐
采用英蓝超滤技术,离子色谱法,梯度淋洗测定水产品中多聚磷酸盐的含量。该法对被测离子的检出限为0.2~0.3μg/L,线性范围为2~50 mg/L,线性相关系数达到0.9999以上,连续6次进样检出待测离子的相对标准偏差小于5%,样品的加标回收率在83%~116%之间。实验结果表明,该法灵敏
昆明动物所在多聚不饱和脂肪酸生物合成研究中获进展
多聚不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids,PUFAs),如花生四烯酸(AA, C20:4n-6)、二十碳五烯酸(EPA,C20:5n-3)和二十二碳六烯酸(DHA,C22:6n-3),具有两个以上的不饱和键,不仅是构成生物膜的结构分子,而且也是胞内外重要的信号分子
人正五聚蛋白3(PTX3)酶联免疫分析(ELISA)
人正五聚蛋白-3(PTX3)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中正五聚蛋白-3(PTX3)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人正五聚蛋白-3(PTX3)水平。用纯化的人正五聚蛋白-3(PTX
人正五聚蛋白3(PTX3)酶联免疫分析(ELISA)
人正五聚蛋白-3(PTX3)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中正五聚蛋白-3(PTX3)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人正五聚蛋白-3(PTX3)水平。用纯化的人正五聚蛋白-3(PTX3)
大鼠D二聚体-(D2D)酶联免疫分析
大鼠D二聚体 (D2D)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中D二聚体 (D2D)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠D二聚体 (D2D)水平。用纯化的大鼠D二聚体 (D2D)抗体包被微孔板,制成固相
发酵法制备多酶生物饲料存在的缺陷
目前发酵法多酶饲料的研制与开发已取得了较大进步,但是仍存在许多技术问题。在菌种方面,由于添加到饲料中的微生物必须保证其安全性,所以大都采用没有经过改良的原始菌种作为发酵菌种,所以其酶活力一般比较低,这是发酵法的主要技术问题。另外,采用混合菌种时,如何很好地利用各菌种的互补性,这一方面也尚未研究透彻。
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物(如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等)组织中,PPO是与内囊体膜结合在一起的,天然状态无活性,但将组织匀浆或损伤后PPO被活化,从而表现出活性。在果蔬细胞组织中,PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内;马铃薯块茎中几乎所
多酚氧化酶的纯化和活力测定
实验原理很多植物受到机械损伤时在空气中会逐渐变成褐色,这是损伤时植物细胞破碎,原来彼此分开的多酚氧化酶和多酚类物质接触反应的结果。反应如下: +H2O 多酚氧化酶 +1/2O2 多酚氧化酶(po1yphenoloxidase,PP0)是一种含铜酶,它能够催化酚类物质转变成
多酚氧化酶的理化性质介绍
酶蛋白具有一般蛋白质的特性,在高温或低温条件下有易变性失活的特点。各类酶均有其活性的最适温度范围,一般在30C~50℃范围内酶活性最强。酶若失活、变性,则就丧失了催化能力。酶的催化作用具有专一性,如多酚氧化酶,只能使茶多酚物质氧化,聚合成茶多酚的氧化产物茶黄素、茶红素和茶褐素等;蛋白酶只能促使蛋
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物(如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等)组织中,PPO是与内囊体膜结合在一起的,天然状态无活性,但将组织匀浆或损伤后PPO被活化,从而表现出活性。在果蔬细胞组织中,PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内[7];马铃薯块茎中
植物中的多酚氧化酶及作用
在植物(如苹果、荔枝、菠菜、马铃薯、豆类、茶叶、桑叶、烟草等)组织中,PPO是与内囊体膜结合在一起的,天然状态无活性,但将组织匀浆或损伤后PPO被活化,从而表现出活性。在果蔬细胞组织中,PPO存在的位置因原料的种类、品种及成熟度的不同而有差异,绿叶中PPO活性大部分存在于叶绿体内[7];马铃薯块
单宁酶及多酚氧化酶对饲料中抗营养因子的作用
单宁是水溶性多酚类物质。主要存在于高粱和豆科子实中。据报道,单宁与胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反应,降低蛋白质和碳水化合物的利用率。单宁也可以与金属离子等化合物形成沉淀,还可以与维生素B12形成络合物而降低其利用率。 单宁及棉酚是阻碍高粱和棉粕(饼)大量使用的主要因素。现在多用微生物发酵法去除单
单宁酶及多酚氧化酶对饲料中抗营养因子的作用
单宁是水溶性多酚类物质。主要存在于高粱和豆科子实中。据报道,单宁与胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反应,降低蛋白质和碳水化合物的利用率。单宁也可以与金属离子等化合物形成沉淀,还可以与维生素B12形成络合物而降低其利用率。 单宁及棉酚是阻碍高粱和棉粕(饼)大量使用的主要因素。现在多用微生物发酵法去除单
单宁酶及多酚氧化酶对饲料中抗营养因子的作用
单宁是水溶性多酚类物质。主要存在于高粱和豆科子实中。据报道,单宁与胰蛋白酶和淀粉酶或酶的底物反应,降低蛋白质和碳水化合物的利用率。单宁也可以与金属离子等化合物形成沉淀,还可以与维生素B12形成络合物而降低其利用率。 单宁及棉酚是阻碍高粱和棉粕(饼)大量使用的主要因素。现在多用微生物发酵法去除单
甲基化和异戊烯化作用检测—多聚类异戊二烯取代物确证
实验材料蛋白试剂、试剂盒牛血清白蛋白氢氧化氨仪器、耗材试管实验步骤1. SDS-PAGE 和电洗脱分离目的蛋白。2. 洗脱的蛋白中加牛血清白蛋白载体使最终浓度为 0.1 mg/ml,并用 5 倍体积的含 1.5% 氢氧化氨的冰冷丙酮处理 30 分钟以沉淀蛋白。3. 离心收集沉淀蛋白,倒掉上清,在真空