甲基化和异戊烯化作用检测—多聚类异戊二烯取代物确证

实验材料蛋白试剂、试剂盒牛血清白蛋白氢氧化氨仪器、耗材试管实验步骤1. SDS-PAGE 和电洗脱分离目的蛋白。2. 洗脱的蛋白中加牛血清白蛋白载体使最终浓度为 0.1 mg/ml,并用 5 倍体积的含 1.5% 氢氧化氨的冰冷丙酮处理 30 分钟以沉淀蛋白。3. 离心收集沉淀蛋白,倒掉上清,在真空下干躁沉淀物。4. 在 0.4 ml 的乙醇:甲酸(4:1 ) 溶液中重悬蛋白,并转到一个带玻璃螺丝帽的试管中。5. 加 0.1 ml 的拉尼镍混合液(Aldrich),然后加 1 ml 水饱和戊烷。6. 用 Teflon 带绕细线封紧试管,并用 Teflon 线拧上一个帽。7. 在 100℃ 热块上加热试管过夜。8. 取出顶层保存在一个新试管中,然后再用 1 毫升戊烷再次抽提底层。9. 收集戊烷层于圆锥型样品瓶中,在盐水冰浴中蒸发到干燥。10. 用 100~200 μl 的己烷清洗试管的侧壁,将己烷溶液倒入一个干净的锥形样品瓶中,并......阅读全文

甲基化和异戊烯化作用检测—多聚类异戊二烯取代物确证

实验材料蛋白试剂、试剂盒牛血清白蛋白氢氧化氨仪器、耗材试管实验步骤1. SDS-PAGE 和电洗脱分离目的蛋白。2. 洗脱的蛋白中加牛血清白蛋白载体使最终浓度为 0.1 mg/ml,并用 5 倍体积的含 1.5% 氢氧化氨的冰冷丙酮处理 30 分钟以沉淀蛋白。3. 离心收集沉淀蛋白,倒掉上清,在真空

甲基化和异戊烯化作用的检测实验

多聚类异戊二烯取代物的确证羧基甲基化的证实实验材料蛋白                                                          试剂、试剂盒牛血清白蛋白                                                    

甲基化和异戊烯化作用的检测实验

多聚类异戊二烯取代物的确证 羧基甲基化的证实             实验材料 蛋白 试

甲基化和异戊烯化作用的检测实验_羧基甲基化的证实

实验材料细胞试剂、试剂盒甲基甲硫氨酸仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤1. 用 100 μCi/ml 的 [3H] 甲基甲硫氨酸标记细胞(约 1X107)。2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分离目的蛋白。3. 荧光光谱法观察,切下蛋白带,放在一个 0.5 ml 的微型离心管中。4. 加 10

天然的异戊烯聚合物与其他多聚物的区别

天然的异戊烯聚合物与其他多聚物的共同点为:①由具有通用结构的重复单位所组成(异戊烯骨架相当于糖,氨基酸或核苷酸单位);②此单位的结构在细节上可有所变动(例如在类异戊二烯中的双键)并按顺序排列;③链长变化极大,小到两个单位聚合而成单萜,多至数百倍的单位聚合而成的橡胶。不同点为:①重复单位以C-C键连接

不皂化的脂质的基本介绍

  (一)类萜(terpens)  类萜亦称异戊烯脂质。异戊烯是具有两个双键的五碳化合物,也叫做“2-甲基-1.3-丁二烯“。其结构式为:  CH2=CCH3CH=CH2  烯萜类化合物就是很多异戊二烯单位缩合体。两个异戊二烯单位头尾连接就形成单萜;含有4个、6个和8个异戊二烯单位的萜类化合物分别称

多聚螯合物酶组化实验

实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和 HRP 结合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物,该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时,只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加

多聚螯合物酶组化实验

EPOS 法 EnVision 法 UIP 法 PowerVision 法             实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)

不皂化的脂质类萜(terpens)

类萜亦称异戊烯脂质。异戊烯是具有两个双键的五碳化合物,也叫做“2-甲基-1.3-丁二烯“。其结构式为:CH2=CCH3CH=CH2脂类烯萜类化合物就是很多异戊二烯单位缩合体。两个异戊二烯单位头尾连接就形成单萜;含有4个、6个和8个异戊二烯单位的萜类化合物分别称为双萜、三萜或四萜。异戊二烯单位以头尾连

关于类萜的分类介绍

  单萜和倍半萜 有些单萜醇和倍半萜醇以及它们的代谢物是生物通讯的信息素;有些用于香料工业。例如:单萜香叶烯、tr牻牛儿醇、柠檬醛、苎烯、α -蒎烯等;倍半萜法呢醇、姜烯、檀香脑、蒿属素等。  二萜 植醇是含氧的无环二萜,叶绿素的重要构件;维生素A是单环二萜,与暗视觉有关;松脂的主要成分松香酸是三环

类萜的分类介绍

单萜和倍半萜 有些单萜醇和倍半萜醇以及它们的代谢物是生物通讯的信息素;有些用于香料工业。例如:单萜香叶烯、tr牻牛儿醇、柠檬醛、苎烯、α- 蒎烯等;倍半萜法呢醇、姜烯、檀香脑、蒿属素等。二萜 植醇是含氧的无环二萜,叶绿素的重要构件;维生素A是单环二萜,与暗视觉有关;松脂的主要成分松香酸是三环二萜;赤

多聚体的结构和作用

多聚体是由单体(monomers)结合而成的分子。生物分子(如蛋白质、核酸、糖)都是多聚体(polymers)。

DNA甲基化的定义和作用

DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性

类萜的结构介绍

萜类化合物!又称类异戊二烯!是植物界广泛存在的一类天然烃类化合物,具有异戊二烯单元 [1]  。类萜是异戊二烯五碳单位(饱和的或部分饱和的五碳支链化合物)的聚合物。因其不含脂肪酸成分,故属非皂化性脂质,亦称类异戊二烯或异戊烯脂质。此外还有由异戊二烯聚合链通过碳-碳键与其他成分结合组成的条合异戊烯脂质

关于类萜的结构介绍

  萜类化合物!又称类异戊二烯!是植物界广泛存在的一类天然烃类化合物,具有异戊二烯单元 [1] 。类萜是异戊二烯五碳单位(饱和的或部分饱和的五碳支链化合物)的聚合物。因其不含脂肪酸成分,故属非皂化性脂质,亦称类异戊二烯或异戊烯脂质。此外还有由异戊二烯聚合链通过碳-碳键与其他成分结合组成的条合异戊烯脂

异戊烯脂质的结构特点

类萜亦称异戊烯脂质。异戊烯是具有两个双键的五碳化合物,也叫做“2-甲基-1.3-丁二烯“。其结构式为:CH2=CCH3CH=CH2烯萜类化合物就是很多异戊二烯单位缩合体。两个异戊二烯单位头尾连接就形成单萜;含有4个、6个和8个异戊二烯单位的萜类化合物分别称为双萜、三萜或四萜。异戊二烯单位以头尾连接排

多聚螯合物酶组化实验——EPOS-法

长期以来,许多的研究者希望 IHC 方法更敏感、更稳定、更简单,要求多步检测系统简化,但敏感性要进一步提高,使这一技术面临巨大的挑战。在实践中,往往是步骤减少了,敏感性也降低,这是一对矛盾。一种新的多聚螯合物酶二步法在 1995 年被隆重推出,该方法与简单的二步法相比较,具有很高的敏感性、稳定性和特

多聚螯合物酶组化实验——UIP-法

实验方法原理UIP(universal immuno-enzyme polymer)法,即通用免疫酶复合物法,是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似,不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物(N-Histo

多聚螯合物酶组化实验——EnVision-法

实验方法原理抗原-抗体反应结合后,第二抗体上标记有多聚化合物(葡聚糖)酶复合物(EnVision 复合物),与第一抗体结合,进而由酶作用底物进行显色定位。EnVision 复合物是利用一种多聚化合物将 HRP 或 AKP 和第二抗体(抗鼠或抗兔 IgG)同时标记在一个多聚化合物上,即形成酶-多聚化合

多聚螯合物酶组化实验——PowerVision-法

实验方法原理PowerVision 系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子,呈串珠状排列,由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子,与酶和免疫球蛋白交联,排列紧密,形成串珠状多聚物,因此相对分子质量较小。其特点是简便、敏感。其操作流程同 EnVision 法,但一抗的稀释

泛醌和泛色烯醇的结构特点和功能

泛醌和泛色烯醇 具有多聚异戊烯侧链(25~50碳原子)的取代苯醌,因其广泛存在于生物界,故名泛醌。泛醌的苯醌环与相邻的异戊二烯单位缩合环化而成的化合物称为泛色烯醇。大鼠肝脏主要含具有9个异戊烯单位侧链的泛醌(UQ-9);高等植物含UQ-9和UQ-10;缺叶绿素植物则主要含UQ-6-7。泛醌也叫辅酶Q

奶品中三聚氰胺的常规检测和GCMS确证(二)

图1(反相).  三聚氰胺标样图谱。 仪器、试剂与材料 仪器:本实验使用Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪系统,含LC-20AD输液泵,SIL-20A自动进样器,CTO-20AC柱温箱,SPD-20A紫外可见检测器,CBM-20A控制器,DGU-20A3在线脱气机

奶品中三聚氰胺的常规检测和GCMS确证(一)

图1.  三聚氰胺硅烷化衍生物TIC图。 三鹿奶粉事件发生的第一时间,岛津公司即推出两种不同的方法用于奶粉、奶制品中三聚氰胺的检测,其中反相离子对色谱法测定奶粉中三聚氰胺含量,操作简便,检测快速; GCMS气质联用仪检测法具有灵敏度高、重现性好和可靠性高等优点,定量检测限可达5μ

萜类的结构特点

类萜是异戊二烯五碳单位(饱和的或部分饱和的五碳支链化合物)的聚合物。因其不含脂肪酸成分,故属非皂化性脂质,亦称类异戊二烯或异戊烯脂质。此外还有由异戊二烯聚合链通过碳-碳键与其他成分结合组成的条合异戊烯脂质。

检测自身免疫病:铁蛋白多聚抗原和多聚二抗检测

  自身免疫疾病是机体针对自身抗原产生大量自身抗体后引起的慢性全身性疾病。因此,检测患者体内特异性的自身抗体是诊断该病的主要指标。例如,用ELISA检测原发性干燥综合征(Primary Sjogren's syndrome, pSS)患者血清中的抗M3及α-fodrin抗体,为其诊断提供了重

异戊烯焦磷酸的基本信息

中文名称:异戊烯焦磷酸英文名称:isopentenyl pyrophosphate;IPP 定义:所属学科: 生物化学与分子生物学(一级学科) ;新陈代谢(二级学科)中文别名:IPP性质:低温下为白色结晶固体,室温下为无色液体。为游离基型引发剂,用作氯乙烯及其他单体聚合或共聚的低温引发剂。

昆明植物所PPAP类天然产物研究获系列进展

  中国科学院昆明植物研究所重要类群植物化学及功能研究团队许刚研究组长期从事天然多环多异戊烯基取代酰基间苯三酚类天然产物(简称PPAP)的研究工作,先后对近20种藤黄科植物中的PPAP类成分开展了深入的研究,发现了大量结构新颖、活性显著的化合物;相关成果在Org. Lett., Chem. Comm

DNA甲基化酶的作用和种类

DNA甲基化酶分为2类,即维持DNA甲基化转移酶(Dnmtl或维持甲基化酶)和从头甲基化酶。根据序列的同源性和功能,真核生物DNA甲基化转移酶又分为4类:Dnmtl/METl、Dnmt2、CMTs和Dn-mt3。DnmtliiMETl类酶参与CG序列甲基化的维持。CMTs类酶仅发现在植物中,主要特征

昆明植物所在天然PPAP类化合物研究中取得新进展

  天然多环多异戊烯基取代间苯三酚类化合物(Polycyclic Polyprenylated Acylphloroglucinols,简称PPAP)是一类具有聚酮和异戊烯基化杂合生源途径的天然产物。PPAP的间苯三酚母核通常由一个酰基(苯甲酰基、异丁酰基或2-甲基-丁酰基)和多个异戊烯基取代。酰基

质体醌的结构特点和功能

质体醌广泛存在于植物界,是具有一个多聚异戊二烯侧链的三烷基取代的苯醌。如质体醌A是含有9个异戊烯单位侧链的质体醌,在光合磷酸化中起重要作用。