定期移植法
定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 培养基制备 器皿准备 培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等,经洗涤、干燥、包装、灭菌后使用。溶解培养基配料 先在烧杯中放适量水,按培养基配方称取各项材料,依次将缓冲化合物、主要元素、微量元素、维生素等材料加入水中溶解,最后加足水量,搅拌均匀。调pH值 配料溶解后将培养基冷却至室温,根据要求加稀酸(0.1mol/L盐酸)或稀碱(10%氢氧化钠)调pH值。加酸或碱液时要缓慢、少量、多次搅拌,防止局部过碱或过酸而导致测量不准确和营养成分被破坏。加凝固剂 ......阅读全文
菌种保藏原理
菌种保藏的基本原理是使微生物的代谢作用降至极低限度,使其处于不活泼的休眠状态。从微生物本身来讲,就是要挑选典型菌种的优良纯种,最好采用它们的休眠体(如分生孢子、芽孢等),如有孢子或芽孢的微生物,要在它们生出孢子或芽孢后再进行保藏;从环境条件来讲,则是创造一个适合其长期休眠的环境条件,诸如低温、干燥、
菌种保藏实验
实验方法原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。选用优良菌株,根据生理生化特征创造一个低温环境使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法为实验室和工厂菌种室常
微生物实验室菌种管理浅谈
微生物实验室如果从事致病菌检测、培养基质控验收、方法验证等相关工作,就应该备有标准菌株。实验室需对使用的标准菌株进行规范性管理,以便有效地、安全地使用,保证实验结果的准确性。 一、实验室应建立菌种管理制度内容包括菌种申购、保管、领用、使用、传代、存储等方面的内容,标准菌种申购应由专人
内标法与外标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被
Folin—酚试剂法(Lowry法)
实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Fol
外标法与内标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质
微生物实验室菌种管理相关规范
微生物实验室如果从事致病菌检测、培养基质控验收、方法验证等相关工作,就应该备有质控菌株。实验室需对使用的质控菌株进行规范性管理,以便有效地、安全地使用,保证实验结果的准确性。首先、实验室应制定菌种管理制度内容包括菌种申购、保管、领用、使用、传代、存储等方面的内容,质控菌种申购应由专人申购,保管由专人
气相法液相法固相法优缺点
气相法液相法固相法优点:分离效率高,分析速度快,样品用量少和检测灵敏度高。选择性好,可分离、分析恒沸混合物,沸点相近的物质,某些同位素,顺式与反式异构体邻、间、对位异构体,旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使
色谱定量方法:标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组
峰面积归一法、内标法、外标法区别
色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候,通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析,从而确定待测组分的校正因子;实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样,虽然看上去是二次进样,但实际上未知样
可见异物检查法第一法(灯检法)
取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检
各显神通!浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法,用哪一种呢?每一种的适用范围是什么呢?其优缺点又是什么?其标准物又有什么要求呢?看完你就都知道了。 1、归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法,各成分校正因子一致时可用该法。 归一化法的优点: 该法简便
菌种保藏的方法(一)
菌种是主要的生物资源,也是食用菌生产首要的生产资料。一个优良的菌种被选育出来以后,必须保持其优良性状不变或尽可能地少变慢变,才不至于降低生产性能,能长期在生产中使用。因此,菌种保藏在食用菌生产上具有重要的意义。 各种微生物由于遗传特性不同,因此适合采用的保藏方法也不一样。一种良好的有效保藏
标准菌的复苏、复壮及标准储备菌株的制备
1、物品及试剂:接种针、酒精灯、移液管、75%酒精及75%酒精棉球2、培养基改良马丁琼脂培养基:用于黑曲霉复苏、复壮.液体硫乙醇酸盐培养基:用于生孢梭菌复苏、复壮.营养肉汤培养基:用于金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、短小芽孢杆菌、铜绿假单胞菌复苏、复壮。改良马丁培养基:用
标准菌的复苏、复壮及标准储备菌株的制备
1、物品及试剂:接种针、酒精灯、移液管、75%酒精及75%酒精棉球 2、培养基改良马丁琼脂培养基:用于黑曲霉复苏、复壮.液体硫乙醇酸盐培养基:用于生孢梭菌复苏、复壮.营养肉汤培养基:用于金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、短小芽孢杆菌、铜绿假单胞菌复苏、复壮。改良马丁培养基:
浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法区别很重要!
1.归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。 各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。 其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。
消化道接种法、鼻腔接种法及角膜接种法
实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤消化道接种。在分离腹泻病毒或经由消化道病毒感染的研究中,可采用灌胃接种法将所接种的临床标本或病毒用灌胃器灌到动物胃内。抓取固定小鼠,用灌胃器吸取接种物,将灌胃针从鼠的口腔插入,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻
药物鉴别法呈色反应鉴别法
呈色反应鉴别法是指供试品溶液中加入适当的试剂溶液,在一定条件下进行反应,生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的呈色反应类型有以下几个。(1)三氯化铁呈色反应:应用于含有酚羟基或水解后产生酚羟基的药物,如水杨酸及其盐。(2)异羟肟酸铁反应:应用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的药物,如β-内酰胺类。(
气相色谱法—内标法
1)什么叫内标法?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。2)怎样选择内标物?内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分
气相色谱法—内标法
什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不
动态色谱法和静态法
动态色谱法是将待测粉体样品装在U型的样品管内,使含有一定比例吸附质的混合气体流过样品,根据吸附前后气体浓度变化来确定被测样品对吸附质分子准确度差、对设备要求很高等缺陷已很少使用。另一种可行的方法是采用CO2作吸附质在室温进行吸附,可以无需分子涡轮泵级的真空度。可以很方便的得到比表面积、微孔孔径、微孔
药物鉴别法薄层色谱鉴别法
薄层色谱鉴别法薄层色谱法鉴别原理为同一种药物在同样条件下的薄层色行为相同。一般采用对照品(或标准品)比较法,将供试品和对照品(或标准品)按药典规定,用同种溶剂配成同样浓度的溶液。在同一层板上点样、展开、显色,要求供试品斑点应与对照品(或标准品)斑点的位置(Rf)和颜色一致。薄层色谱法简单易行,适用于
mESCs传代
实验概要mESCs传代主要试剂细胞基础培养液、DPBS、mES培养液A、mESCs培养液B、0.25% Trypsin主要设备35 mm、60 mm、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、倒置显微镜、离心机实验步骤(1)传代前一天准备好饲养层细胞,饲养层细胞要求接种密度大致
细胞传代
实验概要去除死细胞和生长状况不佳的细胞,获得下一代细胞实验原理游离期:细胞接种后在培养液中呈悬浮状态,细胞质回缩,胞体呈圆球形。贴壁期:细胞附着于底物上,游离期结束。血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋白,这些带正电荷的糖蛋白的促贴壁因子吸附于底物,悬浮细胞再与吸附因子附着。潜伏期:
浅谈内路法眶隔脂肪移植在矫正泪槽畸形中的应用
下睑袋是指眶隔、下睑皮肤等支持结构退变后松弛下垂,眶内脂肪膨出所形成的下眼睑袋状物,常同时伴有眶下缘内侧凹陷,即泪槽畸形。传统的眶肌筋膜韧带提紧眼袋整复术旧1和肌皮瓣骨膜悬吊法眼袋去除术等往往局限于去除下睑袋,而对泪槽畸形的矫正关注较少。有学者在行下睑袋成形术时,将释放的眶隔脂肪带蒂移植矫正泪槽凹陷
法发明可与皮肤移植相结合的基因疗法-预防皮肤病癌变
一些遗传性皮肤病非常容易发生癌变,但长期以来,医学界一直没有有效的预防这类癌变的办法。法国科学家最近发明了一种可以与皮肤移植相结合的基因疗法,从而为此类皮肤病患者带来了福音。 法国国家科研中心日前发表公报说,一些遗传性皮肤病往往要通过皮肤移植来治疗,这样可以预防皮肤病变处发生癌变,但是传统的皮肤移植
液氮冷冻保藏技术
近年来,很多有特殊意义和特征的高级动、植物细胞能够在液氮中长期保藏,并发现在液氮中保藏的菌种的存活率远比其他保藏办法高且回复突变的发生率极低。液氮罐厂家了解液氮保藏巳成为工业微生物菌种保藏的*好办法。(而让液氮保持效果,便于运输,储存离不开液氮罐)具体办法是:把细胞悬浮于必定的分散剂中或是把在琼脂培
病毒冷冻保藏技术
实验概要Snap freezing, or flash freezing, is the process by which samples are lowered to temperatures below -70°C very rapidly using dry ice or liquid
足迹法
High Resolution Genetic Footprinting (Stanford)Genetic footprinting is a technique for high-resolution mapping of the functional organization of a clo
圆环法
测量方法:圆环法 (GB/T6541-86); 测量范围:5~200mN/m 运动速度:快速:1mm/S 慢速:0.3――0.4mm/S 灵敏阀:0.1mN/m 适用温度:10--30℃ 适应温度:≤80% 电源:交流220