染色技术

由于微生物细胞含有大量水分(一般在80-90%以上),对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,与周围背景没有明显的明暗差。所以,除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外,绝大多数情况下都必须经过染色后,才能在显微镜下进行观察。但是,任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的,在染色过程中微生物的形态与结构均会发生一些变化,不能完全代表其生活细胞的真实情况,染色观察时必须注意。 本节包括四部分: 一、染色的基本原理 二、染料的种类和选择 三、制片和染色的基本程序 四、染色方法一、染色的基本原理 微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力......阅读全文

Cell发布突破性染色质检测技术

  来自美国麻省大学医学院的研究人员开发出了一项新技术,可以提供真核生物基因组的详细三维(3-D)图像,这有可能帮助科学家们解答一些有关染色质结构的关键问题。在发表于《细胞》(Cell)杂志上的研究论文中,这一称作为Micro-C的新技术使得研究人员能够以核小体分辨率来分析染色体折叠,填补了以往一些

染色体显带技术的临床意义

1.G带人类的24种染色体可显示出各自特异的带纹。据此可以将这些染色体排列起来进行同源染色体比较,确定染色体结构异常。2.Q带由于各条染色体都显示出各自独特的带纹,由此即可准确的识别人类每一号染色体。3.R带R带有利于测定染色体长度,观察末端区的结构。一般R显带主要用于研究染色体末端缺失和结构重排。

基于PCR技术的染色质沉淀分析2

METHOD Analysis of precipitated chromatin fractions (from Chromatin Immunoprecipitation on Unfixed Chromatin from Cells and Tissues to Analyze Histone

快速了解染色质免疫共沉淀技术(ChIP)

ChIP技术的原理在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,以富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段,再通过多种下游检测技术(定量PCR、基因芯片、测序等)来检测此富集片段的DNA序

快速了解染色质免疫共沉淀技术(ChIP)

  ChIP技术的原理   在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来,以富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段,再通过多种下游检测技术(定量PCR、基因芯片、测序等)来检测此富集片

新技术分析单细胞的染色质构象

  分析染色质构象的技术不少,但有的需要大量细胞,有的则分辨率太低。这阻碍了我们对于单细胞中染色质构象的了解。近日,瑞典卡罗林斯卡学院的研究人员在《Biotechniques》上介绍了一种新方法,能够高分辨率地分析单细胞中染色质的接近程度。   对于理解基因调控、DNA复制和修复来说,研究染色体的

简述染色体分析技术的适应症

  染色体分析技术为怀疑染色体异常而不孕不育的患者提供明确的诊断;开展异位杂交荧光染色体分析技术,通过国际先进的分子生物学基因芯片技术,检查Y染色体是否有微缺失以及Y染色体长臂(Yq11)基因缺失情况,以指导患者的检查和治疗,减少患者无谓的经济负担和各类并发症的发生。通过精液分析、精液特检、分泌物分

染色体跳移的技术和应用特点

中文名称染色体跳移英文名称chromosome jumping定  义从基因组文库中跳过已知位点分离克隆某些序列的技术。通常用于绕过那些难以步移通过或不想去分析的区域,克隆基因组上新的段落。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

染色质免疫沉淀(ChIP)技术的难点

染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,简称ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体的特异性反应,可以真实地反映体内蛋白分子与基因组DNA结合的状况。下面我们就最基本的实验步骤,实验中的小技巧以及需要注意的问题简单介绍一下。1.

染色体显带技术的临床意义

1.G带人类的24种染色体可显示出各自特异的带纹。据此可以将这些染色体排列起来进行同源染色体比较,确定染色体结构异常。2.Q带由于各条染色体都显示出各自独特的带纹,由此即可准确的识别人类每一号染色体。3.R带R带有利于测定染色体长度,观察末端区的结构。一般R显带主要用于研究染色体末端缺失和结构重排。

NGS技术:检测自然流产组织染色体异常

最新研究成果表明NGS技术检测自然流产胚胎组织染色体异常适用于临床。自然流产是妊娠早期常见的并发症,在临床上发生率约为25%,约50%及以上的自然流产与胚胎染色体异常有关。因此,发生自然流产时,取流产胎儿的组织做染色体核型检测对本次自然流产病因的诊断以及以后的生育指导都具有重要意义。在该项研究中,利

妇科白带涂片多项检查快速染色技术的应用

赵宗玲  作者单位:101500北京市密云县医院检验科妇科白带涂片多项检查快速染色技术,简称CTB染色,为卫生部“十年百项”科技成果重点推广项目,是利用一种多功能染液做妇科白带涂片染色的新方法。用CTB染色液可一次染色制片后同时做滴虫、霉菌、纤毛菌、淋球菌、加特纳球杆菌、核异质细胞和癌细胞等7项检查

技术和方案18-染色质免疫沉淀

试剂、试剂盒甲醛甘氨酸TBS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液免疫共沉淀洗脱液TESTE仪器、耗材超声波粉碎仪实验步骤1.培养要分析的细胞。每一个样品,需要在三角瓶中培养 50~100ml 细胞至 OD600 大约为 1。2.甲醛处理细胞交联蛋白质和 DNA。加甲醛到细胞中至终浓度为 1%(37% 的甲醛按 1

基于PCR技术的染色质沉淀分析1

INTRODUCTIONAfter chromatin immunoprecipitation (ChIP), different PCR-based approaches can be used to determine how much DNA is precipitated at a locu

植物染色体显带技术和带型分析

实验概要学习和掌握植物染色体Giemsa显带技术和带型分析方法,进一步鉴别植物染色体组和染色体结构。实验原理对植物有丝分裂中期染色体进行酶解,酸、碱、盐等处理,再经染色后,染色体可清楚地显示出很多条深浅、宽窄不同的染色带。各染色体上染色带的数目、部位、宽窄、深浅、相对稳定,为鉴别染色体的形态提供依据

糖类染色实验——糖原染色

实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水

人类染色体姊妹染色单体差别染色

     姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt(1973)在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),当用Hoechst33258 荧光染料染色时,发现了姊妹染色单体的色差反映和它们

全自动染色体分析系统的技术参数

  全自动染色体自动扫描平台;染色体核型分析软件, 自动扫描双着丝粒染色体、微核。无间断80片染色体、微核玻片递送自染色体全自动扫描系统。

新技术助染色体易位患者健康生育

  “在我国,染色体易位患者并不鲜见。我们研发出的染色体易位诊断新技术,可帮助患者健康生育。”4月6日,在长沙召开的“染色体易位诊断新技术MicroSeq临床医用”新闻发布会上,中信湘雅生殖与遗传专科医院副院长林戈称。  染色体易位,是指包括染色体平衡易位、罗氏易位等在内的染色质数量不变的结构异常性

细胞活力测定技术(荧光法和染色法)

用 途  在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的;相反,不产生荧光的细胞,表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性,用染料处理时,活原生质体不吸收染料,细胞未染上颜色,而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。操作步骤 (一)荧光法 1. 制备细胞和原生质体材料。取花药挤

免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍直接法

直接法是指用特异荧光抗体直接滴加于待检的标本上,由荧光标记的抗体与抗原发生特异结合(图)。标本中如有相应的抗原存在,即与荧光抗体特异性结合,在镜下可见有荧光的抗原复合物。此法的优点是操作简单、特异性高。其缺点是检查每种抗原均需制备相应的特异性荧光抗体,且敏感性低于间接法。

专家解析单细胞分析技术:简单的染色成像方法

在这项研究中,Nakauchi教授采用了一种简单的免疫染色技术:单细胞磷酸成像分析(single-cell imaging of phosphorylation assay,SCIPhos)。先将大约50个细胞想排列在载玻片上,然后进行染色,通过共聚焦显微镜进行观察,通过这些染色了的磷酸化修饰蛋白,

免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍间接法

间接法是根据抗球蛋白试验的原理,用荧光素标记抗球蛋白抗体(简称标记抗抗体)的方法(图)。间接法的检测过程分为两步:第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中在37℃下保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体;第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、

关于染色质免疫共沉淀的技术结合介绍

  1、CHIP-seq  ChIP-Seq的原理是:首先通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP)特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,并对其进行纯化与文库构建;然后对富集得到的DNA片段进行高通量测序。研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等相

胚胎植入前染色体筛查的新技术

  尽管体外受精(IVF)已经彻底改变了不孕不育的治疗,但这个过程本身不够高效,成功率很低。染色体非整倍体,是造成体外受精失败的主要原因,因为大多数非整倍体胚胎无法植入,或在孕早期流产。因此,提高成功率的关键,是选择染色体数目正常的胚胎。为此,人们开始采用胚胎植入前染色体筛查(PGS)。  他们最早

新技术让沉默的X染色体重新激活

  大多数分子生物学家都在寻找如何开启或调节单基因表达的方法。来自英国MRC临床科学中心的科学家们最近取得了一项新进展,他们发现了唤醒女性体细胞中被沉默的X染色体的新方法。  当一个“正常”细胞重新回到干细胞状态,就会出现一些失活的基因发生重新激活。临床科学中心的科学家们在进行体细胞重编程过程中发现

细胞活力测定技术(荧光法和染色法)

用途 在荧光显微镜下可观察到产生荧光的细胞。表明是有活力的;相反,不产生荧光的细胞,表明是无力的。本法利用活原生质体有选择吸收外界的特性,用染料处理时,活原生质体不吸收染料,细胞未染上颜色,而死细胞立即吸附大量染料而染上颜色。(一)荧光法操作步骤荧光法1、制备细胞和原生质体材料。取花药挤压花粉,取幼

台盼蓝(Trypan-Blue)染色法技术要点(二)

在下面的小视频中,台盼蓝染料被缓缓加入在室温培养了168小时的Jurkat细胞。大家可以清楚地看到部分细胞被染成蓝色后迅速膨胀和破裂,染色随即变浅,细胞失去形态变成“气球“。整个过程仅几秒钟。 有视频为证,这些“气球“状物体就是死细胞的残骸。但当我们在显微镜下计数时,这些“气球”由于颜色太浅通常不会

微生物的染色技术及显微镜观察

一、细菌  的简单染色法 1 目的 1.1 学习微生物涂片、染色的基本技术。 1.2 掌握细菌的简单染色法。 1.3 初步认识细菌的形态特征,巩固学习油镜的使用方法和无菌操作技术。 2 原理 细菌的涂片和染色是微生物学实验中的一项基本技术。细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对它们

关于免疫荧光技术—荧光抗体染色的基本介绍

  免疫荧光技术(immunofluorescence techniques) 该法是以荧光素,如异硫氰酸荧光素(fluorescence isothiocyanate,FITC)、罗丹明等标记抗体或抗原,以检测标本中抗原或抗体的方法。免疫荧光技术也包括两种基本类型,即荧光抗体染色(fluoresc