染色技术
由于微生物细胞含有大量水分（一般在80-90%以上），对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大，与周围背景没有明显的明暗差。所以，除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外，绝大多数情况下都必须经过染色后，才能在显微镜下进行观察。但是，任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的，在染色过程中微生物的形态与结构均会发生一些变化，不能完全代表其生活细胞的真实情况，染色观察时必须注意。 本节包括四部分： 一、染色的基本原理 二、染料的种类和选择 三、制片和染色的基本程序 四、染色方法一、染色的基本原理 微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附，且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力......阅读全文
免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍间接法
间接法是根据抗球蛋白试验的原理,用荧光素标记抗球蛋白抗体(简称标记抗抗体)的方法(图）。间接法的检测过程分为两步:第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中在37℃下保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体;第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、
关于染色质免疫共沉淀的技术结合介绍
１、CHIP-seq ChIP-Seq的原理是：首先通过染色质免疫共沉淀技术（ChIP）特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，并对其进行纯化与文库构建；然后对富集得到的DNA片段进行高通量测序。研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上，从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等相
胚胎植入前染色体筛查的新技术
尽管体外受精（IVF）已经彻底改变了不孕不育的治疗，但这个过程本身不够高效，成功率很低。染色体非整倍体，是造成体外受精失败的主要原因，因为大多数非整倍体胚胎无法植入，或在孕早期流产。因此，提高成功率的关键，是选择染色体数目正常的胚胎。为此，人们开始采用胚胎植入前染色体筛查（PGS）。 他们最早
新技术让沉默的X染色体重新激活
大多数分子生物学家都在寻找如何开启或调节单基因表达的方法。来自英国MRC临床科学中心的科学家们最近取得了一项新进展，他们发现了唤醒女性体细胞中被沉默的X染色体的新方法。 当一个“正常”细胞重新回到干细胞状态，就会出现一些失活的基因发生重新激活。临床科学中心的科学家们在进行体细胞重编程过程中发现
专家解析单细胞分析技术：简单的染色成像方法
在这项研究中，Nakauchi教授采用了一种简单的免疫染色技术：单细胞磷酸成像分析（single-cell imaging of phosphorylation assay，SCIPhos）。先将大约50个细胞想排列在载玻片上，然后进行染色，通过共聚焦显微镜进行观察，通过这些染色了的磷酸化修饰蛋白，
台盼蓝(Trypan－Blue)染色法技术要点（二）
在下面的小视频中，台盼蓝染料被缓缓加入在室温培养了168小时的Jurkat细胞。大家可以清楚地看到部分细胞被染成蓝色后迅速膨胀和破裂，染色随即变浅，细胞失去形态变成“气球“。整个过程仅几秒钟。 有视频为证，这些“气球“状物体就是死细胞的残骸。但当我们在显微镜下计数时，这些“气球”由于颜色太浅通常不会
关于免疫荧光技术—荧光抗体染色的基本介绍
免疫荧光技术(immunofluorescence techniques) 该法是以荧光素，如异硫氰酸荧光素(fluorescence isothiocyanate，FITC)、罗丹明等标记抗体或抗原，以检测标本中抗原或抗体的方法。免疫荧光技术也包括两种基本类型，即荧光抗体染色(fluoresc
台盼蓝(Trypan－Blue)染色法技术要点（一）
台盼蓝 (Trypan Blue) 染色法是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，细胞不被染色；而死细胞的胞膜不完整，通透性增加，可使台盼蓝渗入将细胞染成蓝色。因此，借助台盼蓝染色可以简单、快速地区分活细胞和死细胞。想当年小编还是初入实验室的
小白鼠骨髓细胞染色体制片技术
实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征，统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术，优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬液中
免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍直接法
直接法是指用特异荧光抗体直接滴加于待检的标本上,由荧光标记的抗体与抗原发生特异结合(图)。标本中如有相应的抗原存在,即与荧光抗体特异性结合,在镜下可见有荧光的抗原复合物。此法的优点是操作简单、特异性高。其缺点是检查每种抗原均需制备相应的特异性荧光抗体,且敏感性低于间接法。
台盼蓝(Trypan－Blue)染色法技术要点（三）
台盼蓝浓度不同的台盼蓝浓度对细胞染色会有不同影响吗？Nexcelom的科学家们将同一Jurkat细胞样本与0.4%，0.2%，0.1%，0.05%和0.025%的台盼蓝以1：1比例混合，以下是部分浓度染色后的细胞图片： 下面的直方图统计了不同浓度台盼蓝检测到的死细胞（较深着色）和“气球”状细胞的浓度
染色质染色体和染色单体的区别
（1）、染色质和染色体的主要成分都是DNA和蛋白质，它们之间的不同，不过是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。 染色质出现于间期，呈丝状。它们在核内的螺旋程度不一，螺旋紧密的部分，染色较深，有的螺旋松疏染色较浅，染色质在光镜下呈现颗粒状，不均匀地分布于细胞核中。细胞分裂时染色质细
关于检测染色体和染色体组畸变—荧光原位杂交(FISH)技术的基本介绍
荧光原位杂交最早由Bauman(1980)建立，后由Lucas(1989)首先应用于染色体畸变分析。其原理是按检测目标准备恰当的DNA序列作为探针，并用生物素标记，对载玻片上待测标本中的DNA杂交，最后通过杂交位点的荧光观察染色体结构或数目的改变。应用特殊染色体和染色体某区域的荧光探针可在体内检
血细胞化学染色的染色法—铁染色的介绍
（1）血细胞化学染色的染色法—铁染色的原理：人体内有一定量的以铁蛋白和含铁血黄素形式贮存的铁元素，这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应，生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀（普鲁士蓝），定位于含铁的部位。 （2）血细胞化学染色的染色法—铁染色的操作方法：将染色液滴加在骨髓小粒丰富的骨髓涂片上，室温20～30
血细胞化学染色的染色方法—－糖原染色（PAS）的介绍
（1）血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色（PAS）的原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。 （2）血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色（PAS）的操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液
电子染色的染色特点介绍
电子染色（electron stain）是利用某些重金属盐（铀、铅等）能与细胞的某些结构和成分结合，以提高电子密度来增强结构的反差。
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后，细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。（二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
瑞氏染色法：染色原理
既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂：A液：5％石炭酸： 10ml鞣酸： 2g饱和硫酸铝钾液：10mlB液：结晶紫酒精饱和液应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。二、染色方法：1. 玻片的处理：要求用新的载玻片，用前须在95％酒精中浸泡24小时以上，用时从酒精中
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 （二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或
关于芽孢染色的染色方法介绍
（1）芽孢染色— 将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。 （2）芽孢染色— 滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。 （3）芽孢染色— 用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—
瑞氏染色法染色原理
瑞氏染色法染色原理： 为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。瑞氏染料： 是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。染色原理： 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理的吸附作用，又有化学的
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂：1. 结晶紫溶液：A液：结晶紫：2g，95%乙醇：20ml。B液：草酸铵：0.8g，蒸馏水：80ml。需在用前24小时将A液. B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。2.
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂：1. 结晶紫溶液：A液：结晶紫：2g，95%乙醇：20ml。B液：草酸铵：0.8g，蒸馏水：80ml。需在用前24小时将A液. B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。2.
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。（二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
洋红染色剂的染色配方
通常的染色配方为：（1）醋酸洋红配方：冰醋酸1体积、蒸馏水1体积、洋红饱和量。配法：冰醋酸与蒸馏水混合煮沸，加入洋红再煮20分钟。（2）明矾洋红配方：洋红1g，铵明矾或钾明矾10g，蒸馏水100mL。配法：先将明矾溶于蒸馏水，再加入洋红煮沸，冷却后加入少量防腐剂（水杨酸钠、石炭酸等）。（3）硼砂洋红
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m
脂质染色实验_苏丹－III－染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液：苏丹 III 2.5 g，70％ 乙醇 500 ml，充分溶解后，室温下形成饱和溶液，可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10～20 μm 左右，采用
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m