核酸纯度、浓度与分子量测定实验

实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A280 的比值,来测定所得核酸的纯度。利用一系列不同浓度的DNA标准溶液(0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml),或已知浓度的DNA marker,和未知浓度DNA样品一起进行琼脂糖凝胶电泳,以EB染色后,在凝胶图象分析仪上观察,比较标准浓度及未知浓度的亮度,来求取DNA 的含量。比较DNA样品与DNA marker条带位置,推知DNA 样品分子量。 实验材料 ......阅读全文

蛋白分子量大约为780左右,压缩胶与分离胶浓度多少合适

压缩胶一般都为5%;分离胶(单位kD)150以上:6%;100~150:8%;50~100:10%;20~50:12%;20以下:16%。一般为这个范围,也可有些许的差异。

DNA浓度和纯度的测定(分光光度法和溴化乙锭法)

Ⅰ 分光光度法 一、目的 熟练掌握分光光度法检测DNA纯度和浓度的方法。 二、原理 DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在 260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。 对

琼脂糖凝胶电泳法检测-DNA-及-RNA-的纯度及浓度

  1、DNA 的琼脂糖凝胶电泳检测  (1)配制琼脂糖凝胶  ①称取适量琼脂糖,放入100mL锥形瓶中按胶浓度加入1倍 TAE 或 TBE 缓冲液,于微波炉或水浴中溶解。  ②熔化的琼脂糖冷却至60℃,加入终浓度为0.5μg/mL 的 EB,混匀。  ③将凝胶床水平放置,插入两端的挡板,用滴管吸取

如何用分光光度计测量核酸的浓度

方便,灵敏,除了知道含量,还知道组成成分,比如od260/od280低了,就说明蛋白等杂志多了。但是,不知道质量,比如真核rna:跑胶的话有三条带,说明你的rna抽的不错,但是用分光光度计虽能测出rna含量高,但是我们不知道是不是被降解了;或者dna是不是断裂了~~~首先,分光光度计测量的样品必须是

重磅新品实现需求全覆盖,安捷伦走在二代测序最前沿

  上海慕尼黑生化展期间,一个即将面试的新核酸质控平台 Agilent 4150 TapeStation 的首次亮相引起了广泛关注。这不仅仅只是一台新仪器的面世,更标志着安捷伦紧跟基因检测行业“去集中化”的全球发展趋势,实现了对不同类型客户需求的全覆盖。  慕尼黑上海分析生化展关键词之——“去集中化

高纯度氢气发生器的纯度多少

高纯度氢气发生器的纯度多少技术参数:1、氢气纯度:>99.999%2、氢气流量:0‐1L/min3、输出压力:0–0.4Mpa(出厂设定0.3 Mpa)4、zui大功率:220V±10%;50HZ±5%5、压力稳定精度:400W6、环境条件:环境湿度10–40ºC;相对湿度≤85%;无大量粉尘及腐蚀

截留分子量

截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff),是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能,又称切割分子量。由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实

核酸蛋白检测仪的功能特点概述

 核酸蛋白检测仪适用于生命科学研究,工作波长为200–800 nm。可用于:(1)DNA、RNA 和寡核苷酸的定量(2)用Bradford, Lowry 和BCA 检测法定量蛋白(3)监控细胞培养的生长状况(4)简易的动力学分析(5)波长扫描和峰检测核酸蛋白检测仪采用菜单式界面,只需触一下按键就可以

羟乙基淀粉分子量及分子量分布表征

羟乙基淀粉(Hyroxyethyl Starch, HES)是一种非离子型淀粉改性产物。目前,被认为是最为良好的血浆代用品,在医学领域常作为失血性休克的治疗和血液的稀释剂等以维持血液胶体渗透压作用。因其独有的特性及功能,近年来,羟乙基淀粉再次成为人们关注的焦点。 HES的分子量及分子量的分布无疑

“70万一针”寡核苷酸药进医保,此类药物分析您知道吗?

 2021年12月3日,国家医疗保障局召开新闻发布会公布2021年国家医保药品目录调整结果,于2022年1月1日正式执行。治疗罕见病脊髓性肌萎缩症(SMA)的药物诺西那生钠注射液被纳入医保,价格从曾经的70万一针降至3.3万,为患者及其家庭带来福音。SMA是一种罕见的遗传性神经肌肉疾病,是由于SMN

丙烯纯度分析

1、方法概述:以气相色谱法分析丙烯中的杂质(甲烷、乙烯、乙烷、丙烷、异丁烷、正丁烷、丙二烯、乙炔、反丁二烯、1-丁烯、异丁烯、顺丁-2-烯、1、3-丁二烯、乙炔等),以六通定量阀进样、氢火焰检测器检测、工作站外标定量。2、仪器配置:(1)GC-2010气相色谱仪1台(2)FID检测器1套(3)六通进

关于核酸浓度检测仪,你想知道的都在这里

 核酸浓度检测仪在其原始功能的基础上开发了一种便捷的超微检测模式,装有样品只能使用一滴样品完成检测。这使其成为市场上的多功能超痕量核酸蛋白质分析仪,它完美地集成了新老一代的紫外分光光度计,并具有三种检测模式,可满足任何客户的需求。关于它你想知道的都在这里。  核酸浓度检测仪具有比色皿测量,温度控制和

核酸分离与纯化的设计与原则(二)

(四)核酸的浓缩、沉淀与洗涤随着核酸提取试剂的逐步加入,以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失,样品中核酸的浓度会逐渐下降,及至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时,需要对核酸进行浓缩。沉淀是核酸浓缩最常用的方法,其优点在于核酸沉淀后,可以很容易地改变溶解缓冲液和调整核酸溶液至所

分子量怎样计算?

N的相对原子质量是14,H是1,C是12,O是16,NH2CONH2,含两个N原子,4个H原子,1个C、1个O,所以N的质量比是:(14*2)/(14*2+4+12+16)≈46.7%其它类同。

慧眼识金丨纯度计量助力黄金纯度鉴定

  黄金具有重要的货币属性及装饰与保值功能,在人类几千年的历史中始终是财富和华贵的象征。黄金相关国家标准对杂质元素规定了明确的限量,例如,《金条》(GB/T 26021)对银(Ag)、铜(Cu)等十余种杂质元素进行了限量,《高纯金》(GB/T 25933)规定了更多杂质(21种)的限量要求。由于黄金

核酸分离与纯化的设计与原则

细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA

核酸分离与纯化的设计与原则

细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子,均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA又有染色体DNA

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同。2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好。3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏。4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

这几大功能确保核酸浓度检测仪测量的完整性

 核酸浓度检测仪强大的自动调节光路技术有助于准确测量浓缩样品而无需稀释。这几大功能确保检测仪测量的完整性。  1、在提供准确的定量测定的同时,它可以增强用户对样品质量的了解。及早发现污染物可以避免下游应用程序出现故障,从而节省了故障排除时间。  2、在几秒钟内验证样品结果,识别样品污染物并获得校正后

核酸蛋白测定仪测定DNA浓度时显示无效是怎么回事

出现这种情况 你可以考虑以下因素:1、测试之前是否做了空白液试验,空白液是否和稀释或者溶解液相同.2、放置是否同光杯一致,看看光径有没有调节好.3、容易犯得错误,溶液是否完全溶解,液体中是否存在气泡,很多人粗心大意经常在这里吃亏.4、很多人喜欢用清水做空白试验,不知道你是不是,如果是的话是否保证了水

分子克隆常用技术

一、核酸的纯化  在分子克隆的所有操作中,最基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。然而,如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸,则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白质后

分子克隆(molecular-coloning)常用技术

一、核酸的纯化在分子克隆 的所有操作中,最基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆 有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。然而,如要从细胞裂解液等复杂的分子混合物中纯化核酸,则要先用某些蛋白水解酶消化大部分蛋白

分子克隆常用技术简介(核酸纯化、浓缩、电泳和DNA、RNA的...

分子克隆常用技术简介(核酸纯化、浓缩、电泳和DNA、RNA的定量)一、核酸的纯化在分子克隆的所有操作中,最基本的操作是核酸的纯化。其关键步骤是去蛋白质,通常只要用酚/氯仿。氯仿抽提核酸的溶液即可。每当需要把克隆有某一些所用的酶灭活或去除以便进行下一步时,可进行这种抽提。然而,如要从细胞裂解液等复杂的

核酸分离提取的原则和要求

  核酸包括DNA、RNA两种分子 ,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体 DNA为双链线性分子 ,原核生物的“染色体 ”、质粒 及真核细胞器 DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的结

植物染色体DNA的抽取及浓度测定

目的意义DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质,它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用,是分子生物学和基因工程研究的对象,但无论是研究植物DNA的结构和功能,还是开展外源DNA的转化、转导的研究,首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。因此,本实验的目的是学习植物基因组DNA提

表观相对分子量

中文名称表观相对分子量英文名称apparent relative molecular weight定  义利用已知分子量的标准参照物通过凝胶层析或SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳等实验结果推导所得生物大分子的分子量。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

lcms仪器最小分子量

  LCMS是有机合成中重要的分析工具,解析LCMS谱图也是一项基本技能。  想了解更多有机知识,请点击上方蓝字或扫描文末二维码,关注我的公众号。  小蓝建了有机化学交流微信群,已有10000多名小伙伴参与,点击这里,马上加入  LCMS基本原理和特性  1)LCMS的特性:是HPLC和MS的结合,

截留分子量的概念

截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff),是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能,又称切割分子量。由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实

核酸分离提取的原则

核酸分离提取的原则核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的