色谱柱冲洗的那些事儿（反相色谱柱）
衣服穿久了要洗，色谱柱用久了要冲，不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单，到底该怎么洗，还是有些门道的：第一个问题：用什么冲1.1：什么叫冲洗色谱柱通常，色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来，并且保存在合适的溶剂中；还有另一种情况，也可以算作冲洗的范畴，就是梯度方法间重新平衡色谱柱的过程。1.2：常用的溶剂针对于反相色谱柱，通常是用到纯的水和有机溶剂，水主要是作为冲洗掉色谱柱中的盐和其他添加剂，而有机溶剂则是用来冲洗掉一些在色谱柱上有较强保留的污染物，除了在分析中常用到的甲醇和乙腈之外，还有一些对污染物去除能力更强的有机溶剂也可以使用，比如异丙醇。第二个问题：冲多久色谱柱到底要冲多久，这个是经常困扰大家的问题，20分钟，30分钟，还是一个小时？2.1.1：色谱柱冲洗的计算原理其实，冲洗色谱柱并不是一个时间概念，而是一个体积的问题：通常要完全置换色谱柱中的流动相，需要至少十倍柱体积，也就是说，要有至少十倍于色谱......阅读全文
色谱柱冲洗的那些事儿（反相色谱柱）
衣服穿久了要洗，色谱柱用久了要冲，不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单，到底该怎么洗，还是有些门道的：第一个问题：用什么冲1.1：什么叫冲洗色谱柱通常，色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来，并且保存在合适的溶剂中；还有另一种情况，也可以算作冲洗的范畴，就是梯度方法间重新平衡色谱
色谱柱冲洗的那些事儿（反相色谱柱）
衣服穿久了要洗，色谱柱用久了要冲，不过冲洗色谱柱可不像洗衣服那么简单，到底该怎么洗，还是有些门道的：第一个问题：用什么冲1.1：什么叫冲洗色谱柱通常，色谱柱冲洗就是把色谱柱上的脏东西和对色谱柱有损坏的东西冲出来，并且保存在合适的溶剂中；还有另一种情况，也可以算作冲洗的范畴，就是梯度方法间重新平衡色谱
反相色谱柱
反相色谱柱
反相色谱柱与正向色谱柱的区别
倒置或法线相位是基于相对于固定相位的移动相位的极性。如果流动相的极性强于固定相，则称为反相色谱；如果流动相的极性弱于固定相，则称为正相色谱。反相色谱流动相极性强，易携带极性分子，留下非极性分子。主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱就是这样，有些人喜欢说，反相液相色谱其实是一种意义，也就是说，
反相色谱色谱柱的选择
色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30～250 mm,颗粒直径在1.6～5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优
分享色谱柱柱活化冲洗的技巧
色谱柱使用pH范围在1.5～10.0，通常建议使用范围pH为2.0～8.0比较合适，流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降，使用寿命变短，所以要严格控制pH范围。 新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓
新的色谱柱柱活化冲洗技巧
一、新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓冲盐，在换成流动相前，请使用过渡流动相过渡后再换流动相平衡； 二、日常维护 1、建议检测前样品和流动相进行过滤； 2、建议每天做完样品后及时进行清洗； 3、常规检测 测试完后，直接
分享色谱柱柱活化冲洗的技巧
色谱柱使用pH范围在1.5～10.0，通常建议使用范围pH为2.0～8.0比较合适，流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降，使用寿命变短，所以要严格控制pH范围。新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓冲盐，在换
分享色谱柱柱活化冲洗的技巧
色谱柱使用pH范围在1.5～10.0，通常建议使用范围pH为2.0～8.0比较合适，流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降，使用寿命变短，所以要严格控制pH范围。 新的色谱柱活化：采用100%甲醇1ml/min冲洗60min，再换成流动相进行平衡；如果流动相中含有缓
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装：1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配.为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度.安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常.对分析较复杂的样品建议安装保护柱.2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳
正相色谱柱与反相色谱柱的区别
色谱柱的安装 1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积，进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线，同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前，确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。 2、为了使色谱柱与仪器系统
反相色谱柱的选择
反相色谱柱的选择： 1.柱子的PH值使用范围 反相色谱柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。 一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要
反相色谱柱的选择
1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解；当PH值大于7时硅胶易溶解；经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷
盐冲洗色谱柱方法
流动相中含有缓冲盐时，大的原则是：使用前要过渡，使用后要清洗(清洗包括两个步骤，一个步骤是用来清洗缓冲盐，另一个步骤是用来清洗强保留物质的)，具体请按如下方式保养色谱柱：1、使用前的过渡：用乙腈：水=10：90(如果是甲醇体系则用甲醇：水=10：90)以1ml/min流速过渡30min(目的是防止缓
如何区分正相色谱柱和反相色谱柱
本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明：1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。 由于硅胶
反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说，最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系，对于含有酸碱性组份的样品，流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系；检测波长一般在254nm下检测，因为在此波长处，甲醇、乙腈，磷酸缓冲盐均没有紫外吸收，而且标
什么是反相色谱柱
固定相为非极性的色谱柱。在反相键合相色谱中，溶剂的极性越弱洗脱能力越强，即弱极性溶剂的洗脱强度更大
反相色谱柱效能评价
一、反相色谱柱评价条件 对于一根填充柱来说，最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系，对于含有酸碱性组份的样品，流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系；检测波长一般在254nm下检测，因为在此波长处，甲醇、乙腈，磷酸缓冲
反相色谱柱的平衡方法
反相色谱柱的平衡方法 聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物，制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围，即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此，在硅胶基质色谱柱适用受限的
反相色谱柱的平衡方法
聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物，制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围，即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此，在硅胶基质色谱柱适用受限的碱性pH下仍然可以使用。
反相色谱柱的影响因素
液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱；反相色谱柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料
色谱柱能否用纯水冲洗
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析，主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物，主要用于测试ee值，dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂，如水-甲醇，乙腈，甚至加入无机盐配成缓冲溶液，而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求，过多的水会使其损坏。
正相色谱柱和反相色谱柱的适用范围
反相柱用于大多数HPLC分析，主要用来做含量分析。正相柱主要用于分离手性化合物，主要用于测试ee值，dr值等。前者流动相一般为与水混溶的溶剂，如水-甲醇，乙腈，甚至加入无机盐配成缓冲溶液，而后者往往用正戊烷等憎水溶剂。正相柱对溶剂中的水有一定要求，过多的水会使其损坏。
如何正确及时的冲洗色谱柱？
开始试验前,应了解柱中当前是何种溶剂。对于新色谱柱,如无特殊说明均为评价报告中所用流动相。柱中当前溶剂一定要与分析样品所用流动相互溶,如不能混溶,要用与二者均能相互混溶的第三种溶剂过渡。异丙醇是能与各种溶剂混溶的试剂,可作为中介流动相使用。反相键合硅胶柱适宜的保存环境是纯甲醇,如分析用流动相为缓冲液
液相色谱仪反相色谱柱的平衡
液相色谱仪反相色谱柱是保存在乙腈中，新柱应先用10～20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱，一定确保分析样品所使用的流动相与乙腈－水互溶。每天用足够的时间以流动相平衡色谱柱，会在处理问题方面获得zui大的“补偿”，而且色谱柱的寿命会变得更长。平衡操作步骤：1、平衡开始时，将流速缓慢提高，用流动相平衡色谱
反相色谱柱的使用方法
反相柱主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/m
反相色谱柱的使用方法
反相柱主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/m
离子色谱柱能用纯水冲洗吗
按看说明书或咨询色谱柱厂商，防止损害色谱柱，离子柱都不便宜，小心为上。用纯水短时间内冲洗色谱柱，通常不会对色谱柱造成较大的损伤，但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象，所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱，建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈进行冲洗，通常水的含量