Antpedia LOGO WIKI资讯

反相色谱柱的影响因素

液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等。 反相色谱柱的优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。 反相色谱柱的影响因素: 1、柱长 有机小分子和肽类的分辨率随柱长的增加而增加.但是柱长增加并不能使蛋白质和核酸等生物大分子的分辨率显着增加.它们在较短的柱子上往往也有很好的分离效果。 2、流动相的流速 有机小分子和肽类的分辨率对流动相流速非常敏感。......阅读全文

液相色谱柱的选择

1.HPLC色谱分离模式的选择在建立化合物的HPLC方法时,可以首先根据化合物的分子量大小,极性大小及PKa,选择合适的分离模式,在适当的分离模式下去再去优化同类的色谱柱及流动相。化合物分子量<2000Da时,可根据图1来选择:图1 分子量<2000Da的分离模式化合物分子量>20

浅谈液相色谱柱的选择

随着HPLC的普及,分析方法学的开发成为一个合格的分析研究员的标配,而色谱柱的筛选是分析方法开发的第一步,也是最重要的一步,优秀的分析研究员可以根据化合物的结构特征很快确立所需的色谱柱,然后根据化合物的Pka,logP确立流动相。分析方法学的开发学问多多,本文就色谱柱的筛选进行简单介绍。1、HPLC

色谱柱的使用和维护注意事项

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。   影响色谱柱使用寿命的主要因素   一.流动相因素   1.流动相pH   不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为10

液相色谱柱的使用和维护注意事项

影响液相色谱柱寿命的主要因素  流动相因素  1.流动相pH  不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH 1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料

色谱柱相关的100个问题

  色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。  1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号

色谱柱的使用和维护注意事项

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  影响色谱柱使用寿命的主要因素  流动相因素  1.流动相pH  不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH

哪些因素会影响色谱柱的使用寿命?

    色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。   一、注意流动相因素   1.流动相pH   不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在

色谱柱保养心得

  今天有人问我,《色谱柱使用记录》表里样品进样针数后面为什么还有个累计进样针数?  套用哲学观点,任何物质都是有寿命的,大到宇宙,小到原子,但是不同的物质寿命是不一样的。  每一根色谱柱都有一个大致的进样针数寿命,理论上可以有一个规定,达到进样多少针,就强制报废。不过好像并没有这样的规定,那么也可

色谱柱的使用和维护注意事项

流动相因素1.流动相pH不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH 1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。键合相硅胶填料则由于键合层的屏蔽作用,使填料对流动相的

高效液相色谱仪常见压力问题

一、色谱反压介绍 流动相流经管路及色谱柱时会有阻力,即所谓的反压,又称系统压力。 影响色谱系统反压的因素: 流动相的粘度是产生反压的主要原因,粘度越大,反压越高; 流速对反压的影响是线性关系,流速越大,反压越高; 温度对反压的影响是反比关系,温度升高,反压降低; 反压与色谱柱

浅谈气相色谱系统的影响因素

  气相色谱法是近20余年迅速发展起来的一种新型的分离分析方法,已逐渐成为一门专门的科学气相色谱法。其最早应用于分离分析石油产品,目前已被广泛应用于石油、化工、有机合成、医药及食品等工业的科学研究和生产等方面,不仅如此气相色谱法还可应用于生物化学、临床诊断和药理等方面的研究,特别在环境保护

反相色谱柱效能评价

一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲盐均没有紫外吸收,而且标

色谱柱的维护与保养在高压液相色谱中的应用

色谱作为一种分离技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科中的一个重要的分支。在人类进入新时代之际,人们面临着在信息科学、生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速发展的挑战,在这些领域人才的需求成为国家高度发展的至关重要的因素。而色谱技术是生命科学、材料科学、环境科学

色谱柱在高压液相色谱中的应用

摘要:科学技术的发展,使得色谱技术也得到进一步的发展,不断有新的联用的技术得到应用。生物医学的发展,也不断要求高灵敏和高选择性的方法对研究的对象进行定性和定量的研究。 关键词:色谱柱 维护与保养 高压液相色谱 应用 0 引言 色谱作为一种分离技术与方法,自本世纪初起已经有100多年

高效液相色谱柱的保养和维修方法

色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等,色谱柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构及装填技术。  1.高效液相色谱柱的保养 色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测

色谱柱使用寿命延长的方法(一)

色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关系外,最主要的是与日常的维护密切相关。为延长色谱柱的使用寿命,维护您的利益,请仔细阅读此部分。色谱柱的使用寿命主要是柱效和柱压两个指标来衡量,如果一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱使用寿命的关键是,消除

液相色谱柱的保护

   液相色谱柱的保护    在液相色谱仪的使用中,保持液相色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱用久后常出现柱压升高,柱效降低,峰形畸变, 保留时间改变等变化,如不采取适当措施,色谱柱将无法再使用,缩短色谱柱的使用寿命,本文从影响色谱柱的外界因素出发,并

高效液相色谱柱的保养和维修方法

色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等,色谱柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构及装填技术。  1.高效液相色谱柱的保养  色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将

气相色谱分析

气相色谱分析是指流动相为气体的色谱分析法。气体和易于挥发的液体或固体 等试佯都可用气相色谱分析进行分离和测定。简述色谱分析是以分离为基础的,要进行有效的气相色谱分析,必须在色谱柱中将样品中各组分完全分离才能定性和定量。气相色谱分离过程中,溶质分子与固定相之间的相互作用,决定了溶质在固定相和载气之问的

导致液相色谱仪反相色谱柱污染的因素

反相色谱在高效液相色谱中是应用最广泛的技术,主要是因为它适用于分析极大多数的非极性物质和离子化合物。大多数用于反相色谱的固定相都是天然的疏水物质,因此,分析物是按照它们与固定相的疏水相互作用的大小来分离的。    反相色谱柱在分离检测过程中,分析物和基质污染能使固定相受到影响,使

与色谱柱相关的问题汇总(九)

  81.请问下HibarRT250-4这个柱子很特殊么?为什么很多药典中的药物分离都用它做柱子,因为才开始做药,不知道hi,bar的柱子特点是什么?   答:HibarRT250-4是Merk的一个品牌,不是很了解。大概是共用柱头,可更换的柱管。   82.在碱性条件下硅胶溶解,

【干货】如何判断一只色谱柱的“退休”时间?

  色谱工作者常会碰到这样的问题,色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?如何确定一支色谱柱是否应该“退休”?新的色谱柱在使用前都要做什么?如何对柱子进行清洗?好的色谱柱应具备哪些性能?等等一系列问题,都是今天小萃要和您探讨的。   新色谱柱开启和安装推荐步骤   1.使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,

色谱柱维护保养在液相色谱中的应用

摘要:科学技术的发展,使得色谱技术也得到进一步的发展,不断有新的联用的技术得到应用。生物医学的发展,也不断要求高灵敏和高选择性的方法对研究的对象进行定性和定量的研究。关键词:色谱柱维护与保养高压液相色谱应用引言色谱作为一种分离技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科

HPLC异常峰峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题解析

  高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法,这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题,如何解决这些问题呢?  1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,

色谱柱的维护与保养在高压液相色谱中的应用

色谱作为一种分离技术与方法,自本世纪初起已经有100多年的历史了,现在已经成为分析化学学科中的一个重要的分支。在人类进入新时代之际,人们面临着在信息科学、生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速发展的挑战,在这些领域人才的需求成为国家高度发展的至关重要的因素。而色谱技术是生命科学、材料科学、环

基于高压制备液相的多维色谱技术在中药分离纯化中应用

  1 引 言   中药广泛应用于疾病的预防和治疗[1]。快速分离纯化技术对于理解中药复杂的物质基础、控制中药质量和发现潜在活性物质具有重要意义,也是目前中药研究的热点问题之一。作为分析型高效液相色谱系统的延伸,高压制备液相系统能够在保证样品分离度的前提下,大幅度提高载样量,从而快速获得高

高效液相色谱柱的保养和维护

 色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等,色谱柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构及装填技术。  1、高效液相色谱柱的保养  色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并

如何判断一只色谱柱的“退休”时间?

    如何判断一只色谱柱的“退休”时间?    色谱工作者常会碰到这样的问题,色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?如何确定一支色谱柱是否应该“退休”?新的色谱柱在使用前都要做什么?如何对柱子进行清洗?好的色谱柱应具备哪些性能?等等一系列问

反相色谱柱的优点和影响因素

液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料柱等

如何延长色谱柱的寿命?

通常,一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好,但也有的色谱柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响色谱柱寿命和其它问题的因素很多,而有些因素是操作者很难控制的,如果被分析的样品(如分析生物样品),怎么净化样品也是“脏”的,对于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后,在多数情况下总能够人为地