胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验
胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝细胞质膜 部分纯化的胰岛素受体 純化的胰岛素受体 猪胰岛素 ATP 一抗 二抗 自磷酸化缓冲液 起始溶液 SDS-PAGE 样品缓冲液 蛋白质印迹转移液 封闭缓冲液 Tris-HCl NaCl Tween-20 仪器、耗材 ......阅读全文
胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验
胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝细胞质膜 部分纯化的胰岛素受体
胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验
本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化
胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验
本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化
自磷酸化的定义
当配体-受体结合时,受体胞外结构域构象变化导致相邻的单跨膜受体二聚化,以利于受体间的交互磷酸化,即自磷酸化。同时可以提供磷酸集团,和作为蛋白质激酶磷酸化的底物
自磷酸化的功能特点
当配体-受体结合时,受体胞外结构域构象变化导致相邻的单跨膜受体二聚化,以利于受体间的交互磷酸化,即自磷酸化。
胰岛素受体的功能介绍
已知有三种胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物(IRSs)。第一种是胰岛素受体底物1(IRS1),是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括:PI(3)K、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(growthfactor rec
胰岛素的受体是什么
胰岛素的受体是胰岛素受体: 一个四聚体,由两个α亚基和两个β亚基通过二硫键连接。两个α亚基位于细胞 质膜的外侧,其上有胰岛素的结合位点;两个β亚基是跨膜蛋白,起信号转导作用。无胰岛素结 合时,受体的酪氨酸蛋白激酶没有活性。当胰岛素与受体的α亚基结合并改变了β亚基的构型 后,酪氨酸蛋白激酶才被激活
胰岛素受体底物的概念
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一种能够被激活的胰岛受体酪氨酸激酶的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基可被磷酸化,磷酸化的IRSs能够结合并激活下游效应物。
胰岛素受体底物的定义
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS),参与胰岛素及其他细胞因子信号转导的磷酸化蛋白。IRS在被胰岛素受体磷酸化以后,如同一块“磁铁”与那些具有SH2结构域的蛋白结合,根据所结合蛋白的具体结构产生不同的效应,如激活SH2蛋白的酶活性、改变蛋白质构型并同另外的蛋
胰岛素信号通路的相关作用介绍
胰岛素信号通路胰岛素在发挥作用时需首先与靶细胞膜上的一种异四聚体受体相结合。胰岛素受体是膜糖蛋白,由两个单独的胰岛素结合结构域(α亚单位)与两个信号转导结构域(β亚单位)组成。胰岛素与受体结合后引起α亚单位构象改变,从而三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)能够结合
胰岛素的信号通路
胰岛素信号通路胰岛素在发挥作用时需首先与靶细胞膜上的一种异四聚体受体相结合。胰岛素受体是膜糖蛋白,由两个单独的胰岛素结合结构域(α亚单位)与两个信号转导结构域(β亚单位)组成。胰岛素与受体结合后引起α亚单位构象改变,从而三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)能够结合于β
关于胰岛素受体的作用介绍
当胰岛素与受体的α亚基结合并改变了β亚基的构型后,酪氨酸蛋白激酶才被激活,激活后可催化两个反应∶ ①使四聚体复合物中β亚基特异位点的酪氨酸残基磷酸化,这种过程称为自我磷酸化(autophosphorylation); ②将胰岛素受体底物(insulinreceptor substrate,I
胰岛素受体底物的主要种类
已知有三种胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物(IRS)。第一种是胰岛素受体底物1(IRS1)。这是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(growthf
胰岛素受体底物的功能介绍
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一种能够被激活的胰岛受体酪氨酸激酶的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基可被磷酸化,磷 酸化的IRSs能够结合并激活下游效应物。
胰岛素受体底物种类介绍
第一种是胰岛素受体底物1(IRS1),是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括:PI(3)K、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(growthfactor receptor-bound protein2,一种通过SH
关于胰岛素受体底物的简介
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS) 是指能够被激活的胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基,可被磷酸化,磷酸化的IRS能够结合并激活下游效应物。 IRS在被胰岛素受体磷酸化以后,如同一块“磁铁”与那些具有SH2结构域的蛋白结合,根
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验标签: 胰岛素受体 [125I]胰岛素 蛋白质纯化与鉴定实验指南 第四单元 实验 5本实验介绍关于胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验实验方法原理 试剂、试剂盒
胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验
本实验介绍胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I350
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体纯化的胰岛素受体[125I] 胰岛素猪胰岛素双琥珀酰亚胺酰辛二酸二甲亚砜NH4Cl甘油SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材蛋白质凝胶电泳装置干胶器实验步骤材料与设备纯化的鼠肝细胞质膜(见本单元实验 1)部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层
胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验
材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见 试剂的配制 PP.234~240)操作程序1)于
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验
胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验 实验方法原理 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝
胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验
试剂、试剂盒 牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤 材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见“试剂的配制”,P
关于胰岛素受体底物的种类介绍
已知有三种胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物(IRS)。 第一种是胰岛素受体底物1(IRS1)。这是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(gro
胰岛素受体底物的结构功能特点
胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS) 是指能够被激活的胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基,可被磷酸化,磷酸化的IRS能够结合并激活下游效应物。
胰岛素样生长因子受体介绍
胰岛素样生长因子受体IGF必须与载体蛋白IGF结合蛋白(IGFBP)解离后与其特有受体结合才能发挥生物效应。IGF受体分两型,即IGF-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)和IGF-Ⅱ受体(IGF-ⅡR),前者属酪氨酸激酶型受体,是由两个α亚基组成异源四聚体糖蛋白;后者没有氨酸激酶活性。
自噬受体蛋白招募自噬起始相关ULK复合物分子机制
Nat Comm 细胞自噬(Autophagy)是真核细胞中一种高度受调控的、溶酶体依赖的细胞代谢过程,对于维持细胞内稳态以及促进细胞的生长、发育和存活具有至关重要的作用。选择性自噬通过自噬受体蛋白来特异性地识别和降解特定的底物,包括蛋白聚集体、受损线粒体、外源性的入侵病原体等。选择性自噬在众
胰岛素受体糖基化的分析实验
胰岛素受体糖基化的分析实验 试剂、试剂盒 纯化的胰岛素受体 内切糖苷酶 F 内切糖苦酶 H
胰岛素受体的溶解及活性测定实验
试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素
膜上胰岛素受体数量的测定实验
试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级) 牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰岛素 (受体级)
膜上胰岛素受体数量的测定实验
膜上胰岛素受体数量的测定实验 试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级)