膜上胰岛素受体数量的测定实验

试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级) 牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰岛素 (受体级)(DuPontNEN NEX 196)(2200uCi/mmol,35.5nmol/L)试剂结合缓冲液(供两点结合试验法用)(配方,见“试剂的配制” PP.234~240)操作程序1) 于两只微量离心管中各加 40ul 大鼠肝的质膜(20 mg/ml), 记作#1 和#2。2) 各管加 30ul 1%BSA。3) 各管加 140ul 结合缓冲液 。4)#2 管中加 60ul 17.5umol/L 猪胰岛素 (使终浓度为 3.5umol/L),#1 管中加 60ul 蒸馏水。5) 各管加 30ul 5nmol/L[125I] 胰岛素(使......阅读全文

膜上胰岛素受体数量的测定实验

试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级) 牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰岛素 (受体级)

膜上胰岛素受体数量的测定实验

膜上胰岛素受体数量的测定实验             试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级)

膜上胰岛素受体数量的测定实验

胰岛素可高亲和性地与其受体结合(KD~109mol/L),这一能力使我们能估测出甚至是相当粗制的制备物中的胰岛素受体数。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒结合缓冲液[125I] 胰岛素 (受体级)牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17

膜受体的数量和分布的介绍

  一种细胞膜可以含有几种不同的受体,如脂肪细胞膜上含有肾上腺素、胰高血糖素、胰岛素等近10种激素受体。它们的数目互不相同。同一受体在不同细胞膜上的受体数目也是不同的。一般的受体的密度为103~104个/细胞,但电鳐电器官上的乙酰胆碱的受体的密度和数量较大,分别为104~105微米2或1011个/细

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白[125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B溶液 C结合缓冲液仪器、耗材Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125I] 胰岛素

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜牛血清白蛋白 [125I] 胰岛素猪胰岛素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 B 溶液 C 结合缓冲液仪器、耗材 Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管实验步骤 材料与设备纯化的鼠肝质膜(得自实验 1)Ti 70 转头和带盖的聚丙烯离心管牛血清白蛋白(BSA,1%)[125

胰岛素受体的溶解及活性测定实验

胰岛素受体的溶解及活性测定实验             试剂、试剂盒 纯化的鼠肝质膜 牛血清白蛋白 [125I]

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

本实验介绍胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定方法。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I350

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见 试剂的配制  PP.234~240)操作程序1)于

胰岛素受体对胰岛素亲和性的测定实验

试剂、试剂盒 牛血淸白蛋白猪胰岛素[125I]胰岛素(受体级)结合缓冲液实验步骤 材料[125I]胰岛素(受体级)(DuPontNENNEX196)猪胰岛素(如,Sigma Chemical Co,I3505)牛血淸白蛋白(BSA;1%)试剂结合缓冲液(冷配体置换实验用)(配方,见“试剂的配制”,P

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验标签: 胰岛素受体 [125I]胰岛素 蛋白质纯化与鉴定实验指南 第四单元 实验 5本实验介绍关于胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联过程。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验实验方法原理 试剂、试剂盒

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验             试剂、试剂盒 纯化的鼠肝细胞质膜 部分纯化的胰岛素受体

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体纯化的胰岛素受体[125I] 胰岛素猪胰岛素双琥珀酰亚胺酰辛二酸二甲亚砜NH4Cl甘油SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材蛋白质凝胶电泳装置干胶器实验步骤材料与设备纯化的鼠肝细胞质膜(见本单元实验 1)部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验

胰岛素受体与[125I]胰岛素的交联实验             实验方法原理 试剂、试剂盒 纯化的鼠肝

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的鼠肝细胞质膜部分纯化的胰岛素受体純化

胰岛素受体糖基化的分析实验

胰岛素受体糖基化的分析实验             试剂、试剂盒 纯化的胰岛素受体 内切糖苷酶 F 内切糖苦酶 H

胰岛素受体糖基化的分析实验

本实验介绍关于胰岛素受体糖基化的分析。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒纯化的胰岛素受体内切糖苷酶 F内切糖苦酶 H神经氨酸酶甘油蛋白酶抑制剂储液内切糖苷酶 F 缓冲液内切糖苷酶 H 缓冲液神经氨酸酶缓冲液SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材凝胶电泳装置X-射线胶片和

胰岛素测定实验

实验材料 胰岛素标准品125 I-胰岛素试剂、试剂盒 抗血清第二抗体PBS正常兔血清仪器、耗材 计数仪试管加样器离心机实验步骤 一、材料及试剂 1.  胰岛素标准品(不同浓度的) 2、125 I-胰岛素 3、抗血清 4、第二抗体 5、分析试剂  为0.05 mol/L pH7.4 PBS液+1%正常

膜受体的激素受体的相关介绍

  激素与受体结合后如何产生生物效应?20世纪60年代提出的第二信使假设认为,作为第一信使的激素分子与细胞膜受体结合后并不进入细胞。结合激素的受体能使位于膜上的腺苷酸环化酶活化,从而使ATP转成环(化)腺苷酸(cAMP),后者称为第二信使,它能引发细胞内一系列生化反应而产生最终生物效应。例如,肾上腺

免疫学实验抗胰岛素受体抗体介绍

抗胰岛素受体抗体介绍:  抗胰岛素受体抗体(IRA)是Flier等于1975年在研究合并黑色棘皮症的胰岛素抵抗综合征病人时发现的。此抗体可与存在于机体细胞膜上的胰岛素受体结合,而表现为对胰岛素的亲和性降低。检测IRA时常用传代人淋巴细胞IM-9(胞质膜上受体丰富,细胞易于获得)或人胎盘制备胰岛素受体

胰岛素受体的功能介绍

已知有三种胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物(IRSs)。第一种是胰岛素受体底物1(IRS1),是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括:PI(3)K、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(growthfactor rec

胰岛素的受体是什么

  胰岛素的受体是胰岛素受体: 一个四聚体,由两个α亚基和两个β亚基通过二硫键连接。两个α亚基位于细胞 质膜的外侧,其上有胰岛素的结合位点;两个β亚基是跨膜蛋白,起信号转导作用。无胰岛素结 合时,受体的酪氨酸蛋白激酶没有活性。当胰岛素与受体的α亚基结合并改变了β亚基的构型 后,酪氨酸蛋白激酶才被激活

胰岛素受体底物的概念

胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一种能够被激活的胰岛受体酪氨酸激酶的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基可被磷酸化,磷酸化的IRSs能够结合并激活下游效应物。

胰岛素受体底物的定义

胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS),参与胰岛素及其他细胞因子信号转导的磷酸化蛋白。IRS在被胰岛素受体磷酸化以后,如同一块“磁铁”与那些具有SH2结构域的蛋白结合,根据所结合蛋白的具体结构产生不同的效应,如激活SH2蛋白的酶活性、改变蛋白质构型并同另外的蛋

细胞膜受体的数量和分布

  一种细胞膜可以含有几种不同的受体,如脂肪细胞膜上含有肾上腺素、胰高血糖素、胰岛素等近10种激素受体。它们的数目互不相同。同一受体在不同细胞膜上的受体数目也是不同的。一般的受体的密度为103~104个/细胞,但电鳐电器官上的乙酰胆碱的受体的密度和数量较大,分别为104~105微米2或1011个/细

胰岛素测定实验——放射免疫测定

放射免疫测定胰岛素可以用于:(1)以放射性同位素作为示踪物进行免疫标记检测技术;(2)用同位素标记的抗原和样品中待测的未标记抗原与固定量的特异性抗体竞争结合,或进行竞争性一致反应,以判定待测抗原含量。实验方法原理胰岛素的分子量5700,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个 氨基酸,B链有30个氨基酸。

关于胰岛素受体的作用介绍

  当胰岛素与受体的α亚基结合并改变了β亚基的构型后,酪氨酸蛋白激酶才被激活,激活后可催化两个反应∶  ①使四聚体复合物中β亚基特异位点的酪氨酸残基磷酸化,这种过程称为自我磷酸化(autophosphorylation);  ②将胰岛素受体底物(insulinreceptor substrate,I

胰岛素受体底物的主要种类

已知有三种胰岛素受体酪氨酸激酶作用的底物(IRS)。第一种是胰岛素受体底物1(IRS1)。这是一种蛋白质,其上有多个(至少8个)可被受体激酶磷酸化的位点,磷酸化后可同多种效应物结合,包括PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)、Syp(一种磷酸酪氨酸磷酸酶)、Nck(一种连接蛋白)、GRB2(growthf

胰岛素受体底物的功能介绍

胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRSs)是一种能够被激活的胰岛受体酪氨酸激酶的底物, 其上具有十几个酪氨酸残基可被磷酸化,磷 酸化的IRSs能够结合并激活下游效应物。