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杂交探针的检测实验

实验步骤 1. 暗室中,以42~45℃水浴,温育盛有4盎司(113.3 g)Kodak NTB-2放射自显影胶乳瓶30 min。同时,在500 ml 三角瓶中预热等体积的水至相同温度。 2. 胶乳熔化后,缓慢沿三角瓶壁(以一角度)倒入瓶中并混匀(轻旋1~2次,防止气泡产生)。 3. 分装胶乳于尼龙闪烁瓶或塑料的玻片包装盒中。用铝箔包裹或放于闭光容器里,贮于从未存过32P或有机化合物的冰箱。 4. 使用胶乳前,应测试其质量。用两张洁净未使用过的玻片浸以胶乳,并进行显影(见基 本方案2)。在100×显微镜下观察,如每一视野可见多于100个显影颗粒,则应将胶乳退回生产商(Kodak)。 ......阅读全文

杂交探针的检测实验

1.  将载玻片以胶带固定于硬纸板或废胶片上。2.  将Du Pont Cronex 成像胶片(MRF 34 Clear) 轻压在玻片上4℃曝光。3.  当用这种胶片时,应注意以胶片的胶乳面正对样品。

杂交探针的检测实验

实验步骤 1.  暗室中,以42~45℃水浴,温育盛有4盎司(113.3 g)Kodak NTB-2放射自显影胶乳瓶30 min。同时,在500 ml 三角瓶中预热等体积的水至相同温度。 2.  胶乳熔化后,缓慢沿三角瓶壁(以一角度)倒入瓶中

杂交探针的检测实验3

实验步骤 1.  暗室中,以42~45℃水浴,温育盛有4盎司(113.3 g)Kodak NTB-2放射自显影胶乳瓶30 min。同时,在500 ml 三角瓶中预热等体积的水至相同温度。 2.  胶乳熔化后,缓慢沿三角瓶壁(以一角度)倒入瓶中并混匀(轻旋1~2次,防止气泡产生)。

杂交探针的检测实验2

实验材料胶乳试剂、试剂盒显影剂仪器、耗材浸泡盒水浴锅玻片架实验步骤1.  在42℃~45℃水浴溶化小份稀释的胶乳10 min,将胶乳倒入或吸入洁净的玻片包装盒中(浸泡盒)。 2.  将玻片缓慢并轻柔地浸入浸泡盒中,缓慢取出并垂直放置在试管架上或将玻片置于干燥器中2 h,使其干燥。3.  将充分干燥的

杂交探针的检测实验1

放射自显影胶片用于检测与细胞学样品进行杂交的32P或35S-标记探针,并可应用于在大的器官或组织进行的实验,欲获得单细胞水平结果,需要用乳胶放射自显影。实验步骤1.  将载玻片以胶带固定于硬纸板或废胶片上。2.  将Du Pont Cronex 成像胶片(MRF 34 Clear) 轻压在玻片上4℃

核酸探针杂交检测技术介绍

一、核酸探针预杂交预杂交的目的是用非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)将待测核酸分子中的非特异性位点封闭,以避免这些位点与探针的非特异性结合。杂交反应是使单链核酸探针与固定在膜上的待测核酸单链在一定温度和条件下进行复性反应的过程。杂交

杂交探针的概念

杂交探针是一小段单链DNA片段(十几到几百个碱基),用于检测与其互补的核酸序列。

DNA探针原位杂交

  1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附  2、56—60℃烤片2—16h  3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡)  4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥  5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1

用检测和驱动 DNA 探针进行差异杂交实验

下面 4 个探针用于差异筛选杂交。1. 检测者特异性消减探针(正向消减探针)。2. 驱动者特异性消减探针(反向消减探针)。3. 从检测者 mRNA(或检測者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。4. 从驱动者 mRNA(或驱动者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。本实验来源于 PC

用检测和驱动 DNA 探针进行差异杂交实验

试剂、试剂盒 洗涤缓冲液SDSSSCBlocking 溶液经过剪切的鲑鱼精 DNA探针仪器、耗材 沸水浴杂交炉实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂高严格性洗涤缓冲液(0.2XSSC,5 g/LSDS),预热到 68°C(可选,见第 9 步)低严格性洗涤缓冲液(2XSSC,5 g/LSDS),预