分子杂交基因探针的类型介绍

分子杂交基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类,根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针,RNA探针,cDNA探针,cRNA探针及寡核苷酸探针等几类,DNA探针还有单链和双链之分。......阅读全文

分子杂交基因探针的类型介绍

分子杂交基因探针根据标记方法不同可粗分为放射性探针和非放射性探针两大类,根据探针的核酸性质不同又可分为DNA探针,RNA探针,cDNA探针,cRNA探针及寡核苷酸探针等几类,DNA探针还有单链和双链之分。

分子杂交基因所用DNA探针应用介绍

DNA探针是最常用的核酸探针,指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获得DNA探针数量很多,有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和人类细胞DNA探针。这类探针多为某一基因的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。这些DNA探针

核酸分子杂交探针的介绍

  若杂交的目的是识别靶DNA中的特异核苷酸序列,这需要牵涉到另一项核酸操作的基本技术─探针(probe)的制备。探针是指带有某些标记物(如放射性同位素32P,荧光物质异硫氰酸荧光素等)的特异性核酸序列片段。若我们设法使一个核酸序列带上32P,那么它与靶序列互补形成的杂交双链,就会带有放射性。以适当

分子杂交技术RNA探针的相关介绍

  许多载体如pBluescript, pGEM等均带有来自噬菌体SP6或E.coli噬菌体T7或T3的启动子,它们能特异性地被各自噬菌体编码的依赖于DNA的RNA聚合酶所识别,合成特异性的RNA。在反应体系中若加入经标记的NTP,则可合成RNA探针。RNA探针一般都是单链,它具有单链DNA探针的优

核酸分子杂交的主要类型介绍

核酸分子杂交可分为液相杂交和固相杂交。1.液相杂交液相杂交是让DNA探针和待测核酸在溶液中进行反应。在溶液中,待测核酸和探针均自由运动,增加了两者结合的机会,因此液相杂交要比固相杂交快5~10倍。但液相杂交不易分离杂交体和游离核酸探针,常规应用不易。2.固相杂交固相杂交是先将待测核酸样本结合到固相载

核酸分子杂交的概念、基本原理、探针及类型

主要内容:一、分子杂交的概念 二、分子杂交基本原理 (一)DNA变性: 1、DNA变性的方法2、增色效应3、溶解曲线4、融解温度5、影响Tm值的因素。 (二)复性:退火一、分子杂交的概念: 分子杂交(molecular hybridization)指具有一定同源序列的两条核酸单链(DNA或RNA),

分子杂交仪的类型

  分子杂交仪 Hybridization Oven  根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。  1、是用于大容量的分子杂交仪;  2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;  3、用于小容量的核酸杂交仪;  4、微孔板原位杂交仪;  5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;  

分子杂交仪的类型

  分子杂交仪 Hybridization Oven  根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。  1、是用于大容量的分子杂交仪;  2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;  3、用于小容量的核酸杂交仪;  4、微孔板原位杂交仪;  5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;  

分子杂交CDNA探针的技术特点及应用介绍

cDNA(complementary DNA)是指互补于mRNA的DNA分子。cDNA是由RNA经一种称为逆转录酶(reversetranscriptase)的DNA聚合酶催化产生的,这种逆录酶是Temin等在70年代初研究致癌RNA病毒时发现的。该酶以RNA为模板,根据碱基配对原则,按照RNA的核

分子杂交RNA探针的技术特点及应用介绍

在DNA序列未知而必须首先进行克隆以便绘制酶谱和测序时,也常应用克隆。克隆探针一般较寡核苷酸探针特异性强,复杂度也高,从统计学角度而言,较长的序列随机碰撞互补序列的机会较短序列少,克隆探针的另一优点是,可获得较强的杂交信号,因为克隆探针较寡核苷酸探针掺入的可检测标记基因更多。但是,较长的探针对于靶序

分子杂交RNA探针的技术特点及应用介绍

RNA探针是一类很有前途的核酸探针,由于RNA是单链分子,所以它与靶序列的杂交反应效率极高。早期采用的RNA探针是细胞mRNA探针和病毒RNA探针,这些RNA是在细胞基因转录或病毒复制过程中得到标记的,标记效率往往不高,且受到多种因素的制约。这类RNA探针主要用于研究目的,而不是用于检测。例如,在筛

分子杂交技术的核酸探针标记法

核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA

分子杂交仪产品类型

分子杂交仪 Hybridization Oven根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。1、是用于大容量的分子杂交仪;2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;3、用于小容量的核酸杂交仪;4、微孔板原位杂交仪;5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;6、Western杂交仪。原位分

产品类型/分子杂交仪

分子杂交仪 Hybridization Oven 根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。 1、是用于大容量的分子杂交仪; 2、用于Southern 或者 Northern技术点杂交的杂交仪; 3、用于小容量的核酸杂交仪; 4、微孔板原位杂交仪; 5、载玻片原位杂交和平板杂交仪; 6、Weste

核酸基因分子探针

从化学和生物学的意义上理解,探针是一种已知特异性的分子,它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体,以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交,形成杂交体,再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断,称为

杂交育种的杂交类型介绍

品种内杂交同一品种不同生态型间的杂交。品种间杂交(种内杂交)品种间杂交是指两个遗传基础不同的品种间、自交系间、自交不亲和系间或雄性不育系与恢复系间的杂交。种间杂交(属内杂交)同一属不同物种间的杂交。渐渗杂交将一些基因从一个物种转移到另一个物种的基因组中被称为“渐渗杂交”  。同一属或同一科不同属的不

基因探针基因探针的基本介绍

  基因探针基因探针(probe)就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列,它可以包括整个基因,也可以仅仅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。  1.探针的来源 DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe

分子杂交法进行基因定位的方法介绍

分子杂交和体细胞遗传学相结合的方法也可以用来测定人的基因的绝对位置。用体细胞遗传学方法,可以得到只含有某一条人类染色体的人-仓鼠杂种细胞的克隆。然后可以进一步取得这一人类染色体发生各种缺失的克隆。把从这一系列缺失克隆中提取出来的 DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上。再把人的基因文库中的各个基因的 DNA片

分子杂交——Southern基因检测

实验概要将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。但由于该技

分子杂交——Northern基因检测

实验概要Northern杂交采用琼脂糖凝胶电泳,将分子量大小不同的RNA分离开来,随后将其原位转移至固相支持物(如尼龙膜、硝酸纤维膜等)上,再用放射性(或非放射性)标记的DNA或RNA探针,依据其同源性进行杂交,最后进行放射自显影(或化学显影),以目标RNA所在位置表示其分子量的大小,而其显影强度则

核酸探针杂交检测技术介绍

一、核酸探针预杂交预杂交的目的是用非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)将待测核酸分子中的非特异性位点封闭,以避免这些位点与探针的非特异性结合。杂交反应是使单链核酸探针与固定在膜上的待测核酸单链在一定温度和条件下进行复性反应的过程。杂交

分子杂交仪的产品类型有哪些?

  分子杂交仪 Hybridization Oven  根据实验的需求,可以将分子杂交仪分为5大类。  1、是用于大容量的分子杂交仪;  2、用于Southern或者Northern技术点杂交的杂交仪;  3、用于小容量的核酸杂交仪;  4、微孔板原位杂交仪;  5、载玻片原位杂交和平板杂交仪;  

杂交探针的概念

杂交探针是一小段单链DNA片段(十几到几百个碱基),用于检测与其互补的核酸序列。

分子杂交技术Southern杂交的相关介绍

  Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:  (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。  (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。  (3)预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。 

分子杂交——Southern基因检测2

C.转移按凝胶的大小剪裁NC膜或尼龙膜并剪去一角作为标记,水浸湿后,浸入转移液中5min。剪一张比膜稍宽的长条Whatman 3mm滤纸作为盐桥,再按凝胶的尺寸剪3-5张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。( 转移过程一般需要8-24hr,每隔数hr换掉已经湿掉的纸巾。转移液用20×S

分子杂交的方式介绍

1、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交类型有:菌落原位杂交、

分子杂交方式介绍

1、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交类型有:菌落原位杂交、

分子杂交技术介绍

互补的核苷酸序列通过Watson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测

分子杂交方式介绍

1、固相杂交将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上,一条反应核酸游离在溶液中。固体支持物有硝酸纤维素滤膜、尼龙膜、乳胶颗粒、磁珠和微孔板等。由于固相杂交后,未杂交的游离片段可容易地漂洗除去,膜上留下的杂交物容易检测和能防止靶DNA自我复性等优点,所以最为常用。常用的固相杂交类型有:菌落原位杂交、

DNA探针原位杂交的相关介绍

  1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附  2、56—60℃烤片2—16h  3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡)  4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥  5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1