酸性磷酸酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 正磷酸单酯磷酸水解酶(最适酸度)。最适 pH 在 5 左右,描述 σ-磷酸硝基苯的碱性磷酸试验系统可以用于酸性情况。邻磷酸羧基苯+H2O → 水杨酸+Pi 实验材料 酶样品 试剂、试剂盒 乙酸缓冲液 σ-磷酸硝基苯 仪器、耗材 分光光度计 实验步骤 ......阅读全文
酸性磷酸酶染色的临床意义
酸性磷酸酶染色能帮助鉴别戈谢细胞(呈阳性反应)及尼曼-皮克细胞(呈阴性反应);红血病及红白血病时幼红细胞呈核旁单侧阳性反应;多发性骨髓瘤细胞、急性单核细胞性白血病、恶性组织细胞增生症细胞、多毛细胞白血病、T淋巴细胞性白血病等均呈强阳性反应。
酸性磷酸酶的显示方法(Comori法)
一、实验目的1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。二、实验原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基,在PH5.0 的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在
简述酸性磷酸酶分泌的基因控制
分泌酸性磷酸酶是植物普遍存在的一种对低磷胁迫的适应性反应, 而这种适应性变化也是磷缺乏响应基因协调表达的结果, 通过响应基因产物的直接或间接作用, 促进磷素的吸收、转运和有效利用,有关酸性磷酸酶基因的研究已经取得了很大的进展。Goldstein 等研究发现, 番茄根系在低磷胁迫下可诱导分泌性酸性
简述酸性磷酸酶的基本性质
诱导并分泌酸性磷酸酶是植物应对低磷环境的重要适应性反应之一。酸性磷酸酶可以从不同的有机磷底物上水解磷酸基团,供植物吸收利用。大多数的植物酸性磷酸酶没有明显的底物特异性,可以水解的底物包括 RNA、DNA、3-磷酸甘油酸、磷酸己糖等。体外实验中,从拟南芥、番茄中纯化的酸性磷酸酶的酶活力都受到了缓冲
酸性磷酸酶的显示方法实验步骤
实验试剂1. 10%中性福尔马林(pH6.8~7.1)甲醛 10ml 蒸馏水 90ml 醋酸钠 2g2. 酸性磷酸酶作用液蒸馏水 90ml 0.2mol/L醋酸缓冲液(pH4.6) 12ml 5%硝酸铅 2ml3. 2%β—甘油磷酸钠 4ml先将蒸馏水和醋酸缓冲液混合,随后分成大致相等的两份,一份中
临床化学检查方法介绍酸性磷酸酶染色
酸性磷酸酶染色介绍: 大部分血细胞内均存在酸性磷酸酶活性,胞质内的酸性磷酸酶在酸性条件下,经水解,再与硝酸铅、硫酸胺作用,可生成棕黄色或棕黄色的硫酸铅沉淀。酸性磷酸酶染色正常值: 阳性:粒细胞、T淋细胞、浆细胞、巨核细胞、血小板、幼红细胞和单核-巨噬系统细胞。酸性磷酸酶染色临床意义: 酸性磷酸
简述酸性磷酸酶染色的临床意义
酸性磷酸酶染色能帮助鉴别戈谢细胞(呈阳性反应)及尼曼-皮克细胞(呈阴性反应);红血病及红白血病时幼红细胞呈核旁单侧阳性反应;多发性骨髓瘤细胞、急性单核细胞性白血病、恶性组织细胞增生症细胞、多毛细胞白血病、T淋巴细胞性白血病等均呈强阳性反应。
酸性磷酸酶染色的原理与结果判断
(1)原理:血细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下,将基质中的磷酸萘酚AS-BI水解,释放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI与六偶氮付品红偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内,如果血细胞的胞质呈红色为阳性反应,无红色为阴性反应。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制备2份基质液,一份再加入适量L-酒石
生化检测项目血酸性磷酸酶染色介绍
酸性磷酸酶染色介绍: 大部分血细胞内均存在酸性磷酸酶活性,胞质内的酸性磷酸酶在酸性条件下,经水解,再与硝酸铅、硫酸胺作用,可生成棕黄色或棕黄色的硫酸铅沉淀。酸性磷酸酶染色正常值: 阳性:粒细胞、T淋细胞、浆细胞、巨核细胞、血小板、幼红细胞和单核-巨噬系统细胞。酸性磷酸酶染色临床意义: 酸性磷酸
酸性磷酸酶染色的原理与结果判断
(1)原理:血细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下,将基质中的磷酸萘酚AS-BI水解,释放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI与六偶氮付品红偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内,如果血细胞的胞质呈红色为阳性反应,无红色为阴性反应。 抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制备2份基质液,一份再加入适量L-酒石
关于血清酸性磷酸酶的注意事项
(1) 血清和肝素抗凝血浆结果相似,草酸盐抗凝血浆结果偏低。 (2) 血清要及时分离,标本不能溶血,否则测定结果偏高。 (3) 标本在较高温度和碱性环境中极不稳定,如不能及时测定应将血清冰冻或酸化后置冰箱保存,可稳定1周。血清酸化方法:1ml血清加50μl 5mol/L醋酸盐缓冲液,可
关于血清酸性磷酸酶的临床意义
ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断。 (1) 前列腺癌:尤其是转移癌ACP明显升高。PAP对前列腺癌的诊断较ACP敏感,二者对晚期前列腺的诊断、疗效观察及预后监测价值更大。 (2) 血液病:粒细胞白血病、高雪病、尼曼匹克病、原发性血小板减少性紫癜、溶血性贫血等ACP活性亦增高。 (3)
比色法测定酸性磷酸酶生理变异
男、女性血中ACP含量无差异,新生儿ACP活性与成人相似,出生后1个月中血清酶活性甚高,然后随年龄的增长而逐渐下降,青春期又可出现一活性峰值,至20岁降至成人水平。
酸性磷酸酶染色的原理及临床意义
酸性磷酸酶染色的原理与临床意义: (1)原理:血细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下,将基质中的磷酸萘酚AS-BI水解,释放萘酚AS-BI,萘酚AS-BI与六偶氮付品红偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内,如果血细胞的胞质呈红色为阳性反应,无红色为阴性反应。抗酒石酸酸性磷酸酶染色是用相同方法制备2
临床化学检查方法介绍血清酸性磷酸酶介绍
血清酸性磷酸酶介绍: 酸性磷酸酶(ACP)是一组最适pH低于7的磷酸酶,在pH5时活性最强,能水解各种正磷酸单酯。ACP存在于多种组织和体液中,如前列腺、肝、脾、肾、红细胞、血浆、乳汁、唾液等,健康男性血清中ACP约1/3-1/2来源于前列腺。ACP测定主要是比色法。血清酸性磷酸酶正
细胞增殖的检验方法:酸性磷酸酶法
酸性磷酸酶法1.96孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。2.去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3.37℃,孵育1~4h。4.加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5.在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细
关于酸性磷酸酶染色的注意事项介绍
酸性磷酸酶染色,必要时加做L-酒石酸抑制试验,即为酸性磷酸酶染色被酒石酸抑制;反之则不被酒石酸抑制,产生不溶性红色沉淀,定位于胞质内。这对鉴别诊断多毛细胞白血病有重要意义(L-酒石酸抑制试验仍呈阳性),而多发性骨髓瘤细胞,急性单核细胞性白血病细胞、恶性组织细胞增生症细胞均可被L-酒石酸所抑制,阳
精浆酸性磷酸酶测定(ACP)参考值
80~1000U/ml(速率法);>200U/1次射精 (β-硝基酚法)。
临床化学检查方法介绍精子酸性磷酸酶介绍
精子酸性磷酸酶介绍: 精子酸性磷酸酶活性升高与细胞受损的程度呈正相关。精子酸性磷酸酶正常值: 4-20单位。精子酸性磷酸酶临床意义: 异常结果:精子酸性磷酸酶增高,可导致前列腺炎。各种因素引起的炎症会使精子酸性磷酸酶降低。 需要检查的人群:患有前列腺炎和各种炎症的患者,或者不育患者。精子酸性
关于酸性磷酸酶的介绍和临床意义
酸性磷酸酶主要分布于前列腺、肝、脾、乳汁、红细胞、血小板及骨骼等。以前列腺含量最为丰富。酸性磷酸酶(acid phosphatase EC3.1.3.2)是一种在酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶。人血清酸性磷酸酶的最适pH为5~6,最适作用温度37℃。 临床意义 前列腺癌,特别
细胞增殖的检验方法——酸性磷酸酶法
1、96孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。2、去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。3、37℃,孵育1~4h。4、加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。5、在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细胞,同样处理
比色法测定酸性磷酸酶参考值
成人总酶活性为0~9U/L, 前列腺酸性磷酸酶为0~3U/L(连续监测法)。
血清酸性磷酸酶同工酶的注意事项
(1) 比色法: ① 基质液中不应含游离酚,如空白管显红色,则说明磷酸苯二钠已分解,应重新配制。 ② 铁氰化钾应避光保存,显蓝色则失效。加入后应迅速混匀,以充分显色。 ③ 溶血及黄疸血清应做自身对照管,以清除误差。 (2) 连续监测法: ① 应空腹采血。高脂饮食可使小肠合成ALP增高,
生化检测项目血清酸性磷酸酶同工酶介绍
血清酸性磷酸酶同工酶介绍: 酸性磷酸酶(ACP)有20种同工酶,临床测定的同工酶大致为两大类,一为前列腺酸性磷酸酶(PAP),是体内活性最高的一种酸性磷酸酶同工酶,另一类为非前列腺酸性磷酸酶。测定前列腺酸性磷酸酶的方法较多,有化学法、放免法、免疫沉淀法、对流免疫电泳和电泳法等,非前列腺酸性磷酸酶一
比色法测定酸性磷酸酶(ACP)的方法
1.方法(1)麝香草酚酞比色法:该方法目前已少用。(2)连续监测法:α-磷酸萘胺在酸性条件下被ACP水解为α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固红TR盐反应生成稳定的重氮化合物。通过测定在405nm吸光度的变化速率来计算ACP的活性。前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可测得非前列腺酸性磷酸酶活
抗酒石酸酸性磷酸酶染色临床意义
【临床意义】 酸性磷酶(ACP)与细胞许多生理功能和病理变化有关。用聚丙酰胺凝胶电泳证明,血细胞的ACP,由7种同工酶组成(ACP、0、1、2、3、3b、4、5、)。在某些血液病时,同功酶的出现与疾病特点和占优势的细胞类型有关。1970年发现毛细胞胞浆里含有一种能对抗酒石酸抑制作用的ACP,经证明
比色法测定酸性磷酸酶(ACP)的方法
1.方法 (1)麝香草酚酞比色法:该方法目前已少用。 (2)连续监测法:α-磷酸萘胺在酸性条件下被ACP水解为α-萘酚和磷酸,α-萘酚再和固红TR盐反应生成稳定的重氮化合物。通过测定在405nm吸光度的变化速率来计算ACP的活性。 前列腺酸性磷酸酶可被酒石酸抑制,血清加入酒石酸后可测得非前
比色法测定酸性磷酸酶的临床意义
临床血清ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标。前列腺癌,特别是有转移时,血清ACP可明显升高,前列腺酸性磷酸酶更有意义。溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期作过直肠检查者,此酶亦可轻度增高。由于血清ACP酶活性极不稳定,活性测定的应用渐趋稀少。
比色法测定酸性磷酸酶的临床意义
临床血清ACP测定主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标。前列腺癌,特别是有转移时,血清ACP可明显升高,前列腺酸性磷酸酶更有意义。 溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期作过直肠检查者,此酶亦可轻度增高。 由于血清ACP酶活性极不稳定,活性测定的应用渐趋稀少。
精液酸性磷酸酶的注意事项及检查过程
注意事项 1、红细胞中酸性磷酸酶活性约比血清中高100倍,故标本不可溶血。甲醛可抑制红细胞中的酸性磷酸酶活性,但前列腺酸性磷酸酶不受影响,故可加 37%~40%甲醛处理(在缓冲-基质混合液中处理)后若酸性磷酸酶仍很高,表示这种酸性磷酸酶可能来自前列腺(甲醛配法:取市售37%~40%甲醛 50m