酸性磷酸酶的显示方法(Comori法)

一、实验目的1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。二、实验原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基,在PH5.0 的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在与分布。本实验的技术特点是:① 用冷冻涂片和中性福尔马林固定,可避免在固定、包埋及制片过程中酶的失活,保证了实验的稳定性。②采用较短的作用时间,可避免细胞质内其它蛋白质及核内出现阳性假象,保证了实验的可靠性。③以姬姆萨染色的巨噬细胞为观察对象,细胞核及细胞轮廓以及细胞质中反应沉淀的颗粒都比较清晰,有助于深入理解细胞吞噬作用、浴酶体功能和分布以及溶酶体标志酶——酸性磷酸酶的性质。三、实验用品(一)材料小鼠腹腔液涂片(重点观察巨噬细胞)(二)器材高压灭菌锅、冰箱、注射器、载玻片、盖玻片及温箱。(三)试剂1. 10%中性福尔马林(pH6......阅读全文

酸性磷酸酶的显示方法(Comori法)

一、实验目的1. 掌握Comori 法的基本原理和方法。2. 观察酸性磷酸酶在细胞内的分布状况。二、实验原理酸性磷酸酶能分解磷酸脂而释放出磷酸基,在PH5.0 的环境中,磷酸基能与铅盐反应形成磷酸铅。但因其是无色的,所以再经过与硫化铵作用,形成棕黑色的硫化铅沉淀,由此就能显示酸性璃酸酶在细胞内的存在

bradford法和lowry法是什么法

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

bradford法和lowry法是什么法

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

沉淀法、过滤法、蒸馏法的区别

一沉淀法:固液分离。有时为了加速沉淀,可以加入一些凝聚剂,如明矾、活性炭等。二过滤法:固液分离。但是固体必须是不溶于水的才行。三蒸馏法:液液分离。利用沸点不同,沸点低的先蒸馏出来,沸点高的后蒸馏出来。

内标法与外标法

一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被

外标法与内标法

  一、内标法  什么叫内标法?怎样选择内标物?  内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。  内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质

Folin—酚试剂法(Lowry法)

实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Fol

气相法液相法固相法优缺点

气相法液相法固相法优点:分离效率高,分析速度快,样品用量少和检测灵敏度高。选择性好,可分离、分析恒沸混合物,沸点相近的物质,某些同位素,顺式与反式异构体邻、间、对位异构体,旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使

可见异物检查法第一法(灯检法)

取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检

色谱定量方法:标准加入法内标法外标法

  色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。  以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组

峰面积归一法、内标法、外标法区别

色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候,通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析,从而确定待测组分的校正因子;实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样,虽然看上去是二次进样,但实际上未知样

各显神通!浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法

  面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法,用哪一种呢?每一种的适用范围是什么呢?其优缺点又是什么?其标准物又有什么要求呢?看完你就都知道了。  1、归一化法  把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法,各成分校正因子一致时可用该法。  归一化法的优点:  该法简便

浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法区别很重要!

   1.归一化法   把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。   各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。   其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。   

消化道接种法、鼻腔接种法及角膜接种法

实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤消化道接种。在分离腹泻病毒或经由消化道病毒感染的研究中,可采用灌胃接种法将所接种的临床标本或病毒用灌胃器灌到动物胃内。抓取固定小鼠,用灌胃器吸取接种物,将灌胃针从鼠的口腔插入,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻

动态色谱法和静态法

动态色谱法是将待测粉体样品装在U型的样品管内,使含有一定比例吸附质的混合气体流过样品,根据吸附前后气体浓度变化来确定被测样品对吸附质分子准确度差、对设备要求很高等缺陷已很少使用。另一种可行的方法是采用CO2作吸附质在室温进行吸附,可以无需分子涡轮泵级的真空度。可以很方便的得到比表面积、微孔孔径、微孔

药物鉴别法呈色反应鉴别法

呈色反应鉴别法是指供试品溶液中加入适当的试剂溶液,在一定条件下进行反应,生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的呈色反应类型有以下几个。(1)三氯化铁呈色反应:应用于含有酚羟基或水解后产生酚羟基的药物,如水杨酸及其盐。(2)异羟肟酸铁反应:应用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的药物,如β-内酰胺类。(

气相色谱法—内标法

1)什么叫内标法?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。2)怎样选择内标物?内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分

气相色谱法—内标法

什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被色谱拄所分离,又不

药物鉴别法薄层色谱鉴别法

薄层色谱鉴别法薄层色谱法鉴别原理为同一种药物在同样条件下的薄层色行为相同。一般采用对照品(或标准品)比较法,将供试品和对照品(或标准品)按药典规定,用同种溶剂配成同样浓度的溶液。在同一层板上点样、展开、显色,要求供试品斑点应与对照品(或标准品)斑点的位置(Rf)和颜色一致。薄层色谱法简单易行,适用于

足迹法

High Resolution Genetic Footprinting (Stanford)Genetic footprinting is a technique for high-resolution mapping of the functional organization of a clo

圆环法

测量方法:圆环法 (GB/T6541-86);     测量范围:5~200mN/m     运动速度:快速:1mm/S               慢速:0.3――0.4mm/S     灵敏阀:0.1mN/m     适用温度:10--30℃     适应温度:≤80%     电源:交流220

电容法

涂层测厚仪的无损检测方法与原理:涂层测厚仪在现实测量中是一门理论上综合性较强,又非常重视实践环节的很有发展前途的学科。它涉及到材料的物理性质,产品设计,制造工艺,断裂力学以及有限元计算等诸多方面。  在化工,电子,电力,金属等行业中,为了实现对各类材料的保护或装饰作用,通常采用喷涂有色金属覆盖以及磷

ELISA法

ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。由于测定中需要酶标记抗原或抗体,酶分子与抗原或抗体分子的结合物可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。常用的ELISA分析1)   测定抗原A  将抗体吸附于固相表面,这个过程叫包被。B

重量法

一、定义     根据单质或化合物的重量,计算出在供试品中的含量的定量方法称为重量法 二、原理     采用不同方法分离出供试品中的被测成分,称取重量,以计算其含量。按分离方法不同,重量分析分为沉淀重量法、挥发重量法和提取重量法。 三、沉淀重量法 (一)原理     被测成分与试剂作用,生成组成固定

色谱定量分析归一化法、内标法、外标法及标准加入法比较

  归一化法  把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。  各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。  其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。  外标法(标准曲线法、直

内标法和外标法的区别

1、方法不同内标法是将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中,然后对含有内标物的样品进行色谱分析,分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子。外标法是按梯度添加一定量的标准品于空白溶剂中制成对照样品,与未知试样平行地进行样品处理并检测。2、要求不同内标法对于内标物的选择要有一定

水溶液酸碱中和法(中和法)(一)

一、定义    以酸碱中和反应为基础的容量分析法称为酸碱中和法(亦称酸碱滴定法)。二、原理    以酸(碱)滴定液,滴定被测物质,以指示剂或仪器指示终点,根据消耗滴定液的浓度和毫升数,可计算出被测药物的含量。    反应式:  H+ + OH- →← H2O三、酸碱指示剂(一)指示剂的变色原理   

极谱法及伏安法的介绍

  防腐钢管内结疤缺点是存在于钢管内表面,雷同于黄豆粒大小的凹坑,结疤内大部分有呈灰褐色或灰黑色的异物。内结疤的影响因素有:除氧化物剂、喷吹工艺、芯棒光滑等因素。底下就随防腐钢管厂家小编来看一下怎么管制防腐钢管的内表面缺点:   1、除氧化物剂   氧化物要求在芯棒预穿时处于熔融形态。其力度等严

药物鉴别法荧光反应鉴别法

荧光反应鉴别法常用的荧光发射形式有以下类型。(1)药物本身可在可见光下发射荧光。(2)药物溶液加硫酸使呈酸性后,在可见光下发射荧光,如苯并二氮杂类药物。(3)药物和溴反应后,在可见光下发射荧光。(4)药物和间苯二酚反应后,发射出荧光或药物经其他反应后发射荧光。

卡氏水分仪(容量法/库仑法)

该系列水分仪开创了水分测定地新纪元!它极好地平衡了“快速”和“准确”这对矛盾体,让“鱼”与“熊掌”从此可以兼得!该系列滴定仪测量范围广(固体、液体、气体适用)且测量迅速、准确,同时兼备“学习滴定”功能让初学者能迅速学会操作。DL31/DL38容量仪可使用乙醇基的卡氏试剂,完全符合环保要求。DL38容