TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织 试剂、试剂盒 甲醛 NaOH PBS 二甲苯 乙醇 蛋白酶 K Tris-HCl 溶液 仪器、耗材 Parafilm 膜 实验步骤 ......阅读全文
Whole－mount－TUNEL－analysis－of－Xenopus－embryos
Fixation and pretreatmentDejelly albino embryos carefully in 2% Cystein (pH 7.8).Remove the vitellin membrane with two pairs of tweezers (or c
TUNEL检测的实验方法
a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f. 转步骤5。 a.
TUNEL检测的实验方法
对于贴壁细胞或细胞涂片a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f
TUNEL检测的实验方法
a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f. 转步骤5。 a.
调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪分析过程
相关专题实验室的CT-流式细胞仪调亡细胞的TUNEL的流式细胞仪 分析过程为：1.离心收集细胞，PBS 洗1～2次。2.1%多聚甲醛低温下固定15min。3.3ml PBS 洗1次，70%乙醇固定，冰箱内放置1～3天。4.PBS 轻洗1次。5.细胞与TdT标记液37℃孵育，时间1～2h。6.PBS
In－Situ－Cell－Death－(Apoptosis)－Detection－by－TUNEL－labeling
Protocol for Frozen Sections:Warm 150ml 4% Paraformaldehyde/1x PBS to RT. Fix slides in it, 20 min., RT.1x PBS rinse, 2 times.1x PBS, 30 min., RT. Beg
TUNEL－法测凋亡技术操作步骤
一、TUNEL检测原理 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况，可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。 其原理是细胞凋亡发生时，内源性核酸酶激活，
TUNEL－法测凋亡技术操作步骤
TUNEL 法测凋亡操作步骤 一、TUNEL检测原理 TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒是采用非同位素方法来检测细胞在凋亡过程中DNA 的断裂情况，可在原位快速准确地检测单个凋亡细胞。本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。
tunel和dapi双染的意义
为维持内环境稳定，能够与DNA强力结合的荧光染料。1、细胞凋亡是指为维持内环境稳定，生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下，其死亡途径被激活，并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。2、DAPI，即4'，6-二脒基-2-苯基吲哚，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测
罗氏TUNEL细胞凋亡检测程序
一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的 dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，
TUNEL检测的基本信息介绍
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TU
TUNEL检测的基本原理介绍
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfe
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的（1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序
（In situ cell death detection kit-POD法）一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的dU
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的（1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的（1）石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95％和75％乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml）,于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析
1. 对于贴壁细胞或细胞涂片： a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
原理 在细胞凋亡的过程中，基因组DNA会断裂产生双链、低分子量的DNA片段和高分子量的DNA片段，这些DNA链的缺口可以利用没标记法来识别。试剂盒就是通过催化DNA断端，来标记缺口。酶底物显色后，可以光镜检查被染色的细胞。
TUNEL检测出现标记效率低的原因
a. 使用乙醇或甲醇固定会导致标记的效率较低。b. 固定时间过长，导致交联程度过高。此时宜减少固定时间。c. 荧光淬灭。Fluorescence在普通光照10分钟就会严重淬灭。解决方法是需注意避光操作。d. 碘化丙啶双染时，如果碘化丙啶染色过深会导致观察到的本试剂盒的TUNEL染色效果减弱。碘化丙啶
tunel法荧光和显色法原理的区别
TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次，每次5min；2.用梯度乙醇（100、95、90、80、70％）各浸洗1次，每次3min；3.PBS漂洗2次；4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min；5.PBS漂洗2次；6
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。本试剂盒采用TUNEL法，应用高活性的基因重组末端脱氧核糖核苷酸转移酶（Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT）在凋亡细胞断裂的DNA 3’-
TUNEL检测出现荧光背景很高的原因
a. 支原体污染。请使用支原体染色检测试剂盒检测是否为支原体污染。b. 高速分裂和增殖的细胞，有时也会出现细胞核中的DNA断裂。c. TUNEL反应过强。可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液稀释TdT酶2-5倍后再按照说明书操作。稀释后的TdT酶需当日使用。d. 红细胞中血红蛋白导致的自发荧光产生严重干
如何计数TUNEL切片上的总细胞数
你是计算凋亡细胞总数还是所有肿瘤细胞总数？还是你的检测方法 荧光显微镜检测还是流式细胞仪？检测的是HE切片上 还是细胞爬片 还是细胞悬浮液？细胞悬浮液通常用流式，其他的都可直接镜检。按理论讲，显微镜数荧光点就是你所需要的凋亡细胞数了，但细胞总数的话可以再荧光淬灭后做HE染色，然后利用计算灰度的方法让
tunel法荧光和显色法原理的区别
TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次，每次5min；2.用梯度乙醇（100、95、90、80、70％）各浸洗1次，每次3min；3.PBS漂洗2次；4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min；5.PBS漂洗2次；6
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程，染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体DNA多聚体。
hoechst－和tunel法检测细胞凋亡的区别
hoechst法看凋亡，主要是看sub-G1期的细胞数量。原理就是凋亡的细胞，由于DNA正在降解，所以含量比正常细胞要少。在以PI荧光强度（代表DNA量）为横坐标的柱状图上，一般会有2个峰，G1和G2，G1就是正常细胞，G2是正在分裂的2倍体。2者间是S期细胞。如果有凋亡的细胞，在G1前会有细胞出现
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法（TUNEL法） 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是；细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法) 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3羟基在末断转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用下，与生物素或
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法) 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是；细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3羟基在末断转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)或DNA多聚酶的作用
TUNEL细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法（TUNEL法）细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是；细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用