TUNEL检测的实验方法
a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f. 转步骤5。 a. 收集细胞(不超过200万细胞)，PBS或HBSS洗涤一次。b. 用4%多聚甲醛固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。c. 用PBS或HBSS洗涤一次。d. 用含0.1% Triton X-100的PBS重悬细胞，冰浴孵育2分钟。e. 转步骤5。 a. 二甲苯中脱蜡5-10分钟。换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。无水乙醇5分钟。90%乙醇2分钟。70%乙醇2分钟，蒸馏水2分钟。b.滴加20μg/ml不含DNase的蛋白酶K，20-37℃作用15-30分钟(不同组织的最佳作用温度和......阅读全文
细胞凋亡（TUNEL，TUNEL染色）检测技术
细胞凋亡是指为维持内环境稳定， 生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下，其死亡途径被激活，并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。细胞凋亡是程序性死亡过程的一种主要形式，它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合，最终细胞片段化形成许多
TUNEL－labeling
In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labelingby Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox andJosé C. Rodrig
TUNEL－方法
Terminal deoxynucleotidyl Transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) is an in situ method for detecting the 3'-OH ends of DNA exposed dur
TUNEL－assay
PROTOCOL:•Deparaffinize and rehydrate slides:3 x 3´ Xylene3 x 2´ 100% ethanol1 x 2´ 95%, 80%, 70% ethanol (each)1 x 5´ 1x PBS•Microwave antigen retrie
TUNEL分析实验——组织切片的－TUNEL－染色
实验材料组织试剂、试剂盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 取下组织，立即用新制备的 4% 甲醛固定，室温过夜。用多聚甲醛制备 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通风橱中加热至 50~60℃，加几滴 1
Tunel－Procedure－in－Bovine－Embryos－牛胚胎TUNEL检测凋亡
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go highe
TUNEL分析实验——贴壁细胞的－TUNEL－染色
实验材料细胞试剂、试剂盒PBSTdT 反应混合液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 用无菌镊子将一无菌盖玻片放入 35 mm 培养皿中。2. 将大约 1X104 细胞接种于无菌盖玻片上，培养 24~48 小时。凋亡诱导时，细胞铺满不超过 80%。如细胞贴壁不太好，可以用纤连蛋白、聚赖氨酸或血
Detection－by－TUNEL－labeling
In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labelingby Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox,José C. Rodriguez
TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织
TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织
TUNEL－PROCEDURE－IN－BOVINE－EMBRYOS
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go high
TUNEL－PROCEDURE－IN－BOVINE－EMBRYOS
Materials8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go high
TUNEL检测的原理
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera
TUNEL分析实验——TUNEL－染色的流式细胞计量术分析
实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒PBS甲醛柠檬酸钠溶液仪器、耗材流式细胞计量仪实验步骤1. 凋亡诱导之后，200 g 离心 5 分钟收集 1X106 悬浮细胞，用冷的 PBS 洗 2 次，重复离心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定细胞沉淀，室温下在水平摇床上孵育 30 分钟。3. 20
简述TUNEL检测的原理
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfe
Apoptosis－TUNEL－assay－(Paraffin－Sections)
Protocol for Paraffin Sections:Dewax paraffin sections:Incubate slides, 55°C, 30 min.Xylenes, 2 times, 2 min. each100% EtOH, 2 times, 2 min. each95% E
Apoptosis－TUNEL－Assay－(frozen－sections)
Protocol for Frozen Sections:Warm 150ml 4% Paraformaldehyde/1x PBS to RT. Fix slides in it, 20 min., RT.1x PBS rinse, 2 times.1x PBS, 30 min., RT. Beg
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可
TUNEL检测的实验原理
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera
关于TUNEL检测的介绍
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TU
TUNEL检测的实验目的
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNE
TUNEL检测的常见问题
出现非特异性荧光标记a. 有些细胞或组织，例如平滑肌细胞或组织，nuclease或polymerase的酶活性水平较高，易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是，取细胞或组织后立即固定并且要充分固定，以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液，例如一些酸性固定液，导致出现假阳性。建议采用推荐
TUNEL检测的实验方法
对于贴壁细胞或细胞涂片a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f
TUNEL检测的实验方法
a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f. 转步骤5。 a.
细胞凋亡检测实验——TUNEL法
实验方法原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶（过氧化物酶或碱性磷酸酶）的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下，过氧化物酶可产生很强的颜色反应，特异准确
TUNEL检测的实验方法
对于贴壁细胞或细胞涂片a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f
TUNEL检测的定义和原理
基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNE
TUNEL检测的常见问题
a. 有些细胞或组织，例如平滑肌细胞或组织，nuclease或polymerase的酶活性水平较高，易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是，取细胞或组织后立即固定并且要充分固定，以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液，例如一些酸性固定液，导致出现假阳性。建议采用推荐的固定液。c. TU
TUNEL检测的实验方法
a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入含0.1% Triton X-100的PBS，冰浴孵育2分钟。f. 转步骤5。 a.
Whole－mount－TUNEL－analysis－of－Xenopus－embryos
Fixation and pretreatmentDejelly albino embryos carefully in 2% Cystein (pH 7.8).Remove the vitellin membrane with two pairs of tweezers (or c