利用这种材料,细胞生物分子超灵敏检测不再是难题
细胞微环境的改变与许多生理、病理过程密切相关,发展非侵入性荧光探针以监测细胞内生物分子含量或生理参数的微小变化,具有重要的生物学意义和医学价值。然而,目前大多数胞内荧光分析方法只提供非定量的荧光成像,其灵敏度和精确度都难以达到实际监测需求。图1 基于双激发比率型上转换荧光(UCL)的胞内检测示意图:(a) 980/808 nm双激发比率型UCL探针的组成和待分析物ClO-猝灭敏化上转换发光机理;(b) 从染料到上转换纳米颗粒(UCNPs)的能量传递过程;(c) 探针对胞内ClO-的比率型检测。 中国科学院福建物质结构研究所功能纳米结构设计与组装重点实验室陈学元团队在中科院战略性先导科技专项、中科院创新国际团队以及国家自然科学基金和中科院青促会等的支持下,首次提出近红外双激发比率型上转换策略实现细胞内生物分子的精准检测。该团队发展了一种聚合物F127包覆的水溶性染料敏化稀土上转换荧光探针,利用近红外染料IR808到Yb/E......阅读全文
荧光pH探针于细胞内pH检测的使用(二)
pH 6.0 pH 8.5 图2. 用RatioWorks™BCFL,AM标记的Hela细胞。将Hela细胞与5 µM RatioWorks™BCFL,AM(Cat# 21190)在37°C 下孵育30分钟
荧光pH探针于细胞内pH检测的使用(一)
细胞内pH在各种细胞事件中起重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附等等。借助pH敏感的荧光指示剂,研究人员能够以更高的灵敏度、空间分辨率、采样密度来监控活细胞内的pH波动。 通常,细胞的细胞内pH在其各个细胞区室之间会有所不同。例如,
共聚焦荧光探针的选择
共聚焦荧光探针的选择共聚焦激光扫描显微镜是20世纪80年代来发展起来的一种新型高精度显微镜系统,辅以各类荧光探针或荧光染料与被测物质特异性结合,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、分子、离子进行实时动态地观察和检测。荧光探针的发展非常迅速,目前仅美国Molecular Probes公
生物芯片技术荧光探针
目前用荧光探针作为检测信号的仪器,主要是考虑荧光标记所要检测的DNA的效率,以及荧光探针本身的发光效率和光谱特性。PCR过程中的DNA标记1.末端标记:在引物上标记有荧光探针,在DNA扩增过程时,使新形成的DNA链末端带有荧光探针。2 .随机插入:选择四种缄机基,使其中一种或几种挂有荧光探针,在PC
检测酶活性的荧光探针
检测酶活性的荧光探针 共聚焦激光扫描显微镜除了具备荧光显微镜检测荧光酶细胞化学的作用以外,在检测活细胞酶活性动态变化方面有着无可比拟的优势。通过对细胞施予不同的处理因素可检测细胞内相应的酶被激活或灭活的动态变化过程。有的酶荧光探针是自身就可发出荧光、有的是与酶结合后发出荧光、有的则是被酶分解后发出荧
纳米荧光探针摧灭原理
通过一间隔基S(space)和荧光团F(fluorophore)相连而构建。其中荧光团部分是光能吸收和荧光发射的场所,识别基团部分则用于结合客体,这两部分被间隔基隔开,又靠间隔基相连而成一个分子,构成了一个在选择性识别客体的同时又给出光信号变化的超分子体系。PET荧光探针中,荧光团与识别基团之间
pcr荧光探针法是什么
实时定量聚合酶链反应 (Quantitative Real-time PCR,qPCR) 是一种分子生物学技术,用于放大和同时检测或量化靶向 DNA 分子。程序遵循 PCR 的一般原则。在 PCR 反应过程中,随着循环次数的增加,PCR 产物的积累导致荧光信号的增强。因此,通过监测荧光强度,在"实时
荧光探针的分类及应用
受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为
pcr荧光探针法是什么
pcr荧光探针法是是SYBRGreen掺入到双链DNA中的量。SYBRGreen掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。
共聚焦荧光探针标记方法
(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、M
利用这种材料,细胞生物分子超灵敏检测不再是难题
细胞微环境的改变与许多生理、病理过程密切相关,发展非侵入性荧光探针以监测细胞内生物分子含量或生理参数的微小变化,具有重要的生物学意义和医学价值。然而,目前大多数胞内荧光分析方法只提供非定量的荧光成像,其灵敏度和精确度都难以达到实际监测需求。图1 基于双激发比率型上转换荧光(UCL)的胞内检测示意
探针法荧光定量pcr-荧光值要达到多少
定量PCR有绝对定量跟相对定量,绝对定量就是先用已知浓度的质粒浓度梯度(1.00E+07、1.00E+06、1.00E+05、1.00E+04、1.00E+03)制作标准曲线,然后通过做Real-timePCR的CT值计算出其表达量;相对定量是比较管家基因(GAPDH)与目的基因的CT值,得出各标本
双重荧光定量PCR探针荧光基团该怎么选择
有干扰的话,在仪器上面就可以看出来,比如说,FAM和VIC,FAM有信号,单独看VIC也肯定有信号,只是低点而已
荧光探针和荧光染料对于PCR技术的区别
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭
实时荧光定量-PCR-所用荧光探针及功能介绍
应用于实时定量 PCR 检测体系中的荧光探针主要有两种:一种是 TaqMan 探针,一种是分子信标探针。Tyagi 和 Krammer(1996)首次建立了分子信标探针,在同一寡核苷酸探针的5'端标记荧光素、3'端标记淬灭剂(DABCYL)分子信标探针能形成发夹结构,探针的噜扑环(L
我国开发独特荧光探针-对细胞代谢辅酶实现实时拍录
上海华东理工大学杨弋教授课题组新近开发出独特性荧光探针,在国际上首次实现对活细胞及各种亚细胞结构中“还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)”分子的实时动态、特异性的检测与成像,其论文日前刊登在最新一期的国际著名学术刊物《细胞—代谢》杂志上。 NADH是生物体内最重要的辅酶,广泛参与细胞内的物质和
监测活细胞内脂滴动态过程-“缓冲荧光探针”立大功
近日,大连化物所分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员团队利用“缓冲”策略,发展了细胞内脂滴动态识别荧光探针LD-FG,该探针具有优异的光稳定性,可在空间超分辨成像的基础上实现高时间分辨率和长时间稳定成像,从而发现了多种新的脂滴动态过程。 脂滴是维持脂质和能量稳态的关键细胞器,由中
荧光探针有助于癌症研究
Echelon Biosciences公司和犹他大学的研究人员合作研究,指出使用ATX-Red AR-2作为新的显像剂可有效照亮肿瘤。 ATX-Red AR-2是临床前阶段药物研发中令人兴奋的进步,可使研究人员使用非侵入性、机制特异诊断方法来监控疾病和候选药物。图像化酶自毒素的活性
局部荧光探针可以检测肠癌啦!
近日,国际化学与生物学杂志chemistry&biology发表了来自斯坦福大学医学院Matthew Bogyo研究小组的一项最新研究成果,他们发现一种荧光淬灭探针(aABP)能够特异性靶向在肠道发育不良中高表达的半胱氨酸蛋白酶,对指示肠道肿瘤具有非常高的敏感性和特异性。 早期检测结肠息肉能够
荧光探针的化学性质
荧光定量PCR所使用的荧光化学制剂可分为两种:荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切
复合荧光探针HSA/PinkmentOAc
过氧亚硝酸盐(Peroxynitrite,ONOO-)是由超氧阴离子自由基和一氧化氮自由基形成的具有高活性的活性氮物种,是许多体内循环途径的信号传导分子。同时,该分子具有强氧化性,可引起自由基介导的硝化反应,从而会影响生物体内多种生物过程,对脂质、蛋白、DNA等造成不可逆转的损伤。研究表明,过氧
锌离子荧光染料探针的应用
锌离子在许多生理和病理过程中都起到至关重要的作用,因此对锌离子进行探测和识别有重要理论和实际意义。荧光探针因其设计简单、易于操作、灵敏度高、可细胞成像等诸多优点而广泛应用于锌离子的识别研究。锌是生物中含量第二高的过渡金属(仅次于铁), 大脑中大多数Zn 2+紧密结合,因此细胞外和细胞内的游离Zn 2
使用荧光探针的注意事项
使用荧光探针的注意事项 不同的荧光探针在不同标本的效果常有差异,除综合考虑以上因素以外,有条件者应进行染料的筛选,以找出最适的荧光探针。此外,许多荧光探针是疏水性的,很难或不能进入细胞,须使用其乙酰羟甲基酯(acetoxymethyl,AM)形式,也就是荧光探针与AM结合后变成不带电荷的亲脂性化合物
荧光探针法是什么意思
荧光探针法是探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针。荧光探针是指在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、
钙离子荧光探针类型大盘点
钙离子在许多生理过程中起着复杂的作用。例如,细胞内钙离子在促进神经元从神经元中释放神经递质的信号转导途径中必不可少,并参与所有肌肉细胞收缩所需的机制。细胞离子浓度受被动和主动离子通道和泵的调节。离子通道和泵的故障可能导致离子浓度调节不当,从而产生不利于正常细胞功能的不利条件。钙离子浓度研究领域中常使
医学高科技:靶向荧光探针
靶向荧光探针能够在术中实时点亮癌细胞,帮助医生判断肿瘤边界和发现转移灶,这一概念也被称为荧光引导手术(fluorescence-guided surgery,FGS)。 在过去几十年中,分子影像技术的发展大大提高了肿瘤诊治的能力,传统医学影像技术一般基于生物体本身的物理特性或解剖学特征,缺乏特
用于肿瘤靶向发光示踪的氧化石墨烯修饰稀土纳米探针
稀土发光纳米晶由于可以在近红外光激发下产生上转换/下转移发光,具有发光寿命长、量子产率高和发光波长可调等优点,在体外诊断与医学影像研究中受到广泛关注。目前稀土纳米晶的可控合成与发光调控已经取得了较好的发展,但是高质量的稀土纳米晶通常在油相中合成,如何将油相分散的稀土纳米晶设计成具有良好水溶性、生
新型纳米探针可用于肿瘤靶向发光示踪
稀土发光纳米晶由于可以在近红外光激发下产生上转换/下转移发光,具有发光寿命长、量子产率高和发光波长可调等优点,在体外诊断与医学影像研究中受到广泛关注。目前稀土纳米晶的可控合成与发光调控已经取得了较好的发展,但是高质量的稀土纳米晶通常在油相中合成,如何将油相分散的稀土纳米晶设计成具有良好水溶性、生
荧光PCR法与PCR荧光探针法有何不同
荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。从两者的原理上来看,不难判断,荧光PCR法更加简单方
荧光探针的荧光基团怎么确定,识别基团怎么确定
荧光探针的荧光基团是探针分子中负责发光的部分。荧光基团的种类通常是已知的,因此可以通过观察探针的化学结构,预测探针分子中可能存在的荧光基团。荧光基团通常具有类似于苯环、萘环、吡啶环等共轭系统,这些共轭系统可以吸收光能,并在激发态下发生内部跃迁,释放出荧光。为了确定荧光基团的存在,可以使用各种分析技术