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实时荧光定量PCR所用荧光探针及功能介绍

应用于实时定量 PCR 检测体系中的荧光探针主要有两种:一种是 TaqMan 探针,一种是分子信标探针。Tyagi 和 Krammer(1996)首次建立了分子信标探针,在同一寡核苷酸探针的5'端标记荧光素、3'端标记淬灭剂(DABCYL)分子信标探针能形成发夹结构,探针的噜扑环(LOOP)与目的 DNA 碱基互补,噜扑环两侧为与目的 DNA 无关的碱基互补的臂。无目的 DNA 时,探针形成发夹结构,荧光素靠近淬灭剂,荧光素接受的能量通过共振能量转移至淬灭剂,DABCYL 吸收能量后以热量形式消失,结果不产生荧光。当探针遇到目的 DNA 分子时,形成一个比两臂杂交更长也更稳定的杂交,探针自发进行构型变化,使两臂分开,荧光素和淬灭剂随之分开,此时在紫外照射下,荧光素产生荧光。影响分子信标探针构型变化的参数主要有:臂长、臂序列 GC 含量、扑环长度和溶液盐浓度,尤其是二价阳离子如 Mg2+对两臂形成的杂交茎有较强的稳......阅读全文

荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用

PCR实验室产品选择指南 荧光  基团是吸收一定波长的光子后发射特定波长的光波,可以作为抗体等分子的标记物,实时荧光定量PCR中的Taqman探针常用荧光基团FAM标记荧光基团和TAMRA标记。 荧光基团 吸收特定波长的光子后荧光染料(通常称为“荧光基团”或简称为“荧光

血液病的分子生物学检查及其应用

血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性(RFLP)、转基因技术及基因芯片(DNA-chip)技术等分子生物学技术。目前,这些技术在血液学检验领域已得到广泛应用,如应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。随着分子生物

体外诊断微流控技术在检验当中的应用

微流控研究起始于20世纪90年代,至今已经有20余年的发展历史,其间经历了基础理论奠定、单元操作技术发展、小规模集成和大规模集成几个历史发展阶段。至今,微流控技术发展臻于成熟,已经在多个领域得到认可并被广为利用,其产业化趋势亦是愈发明显。2003年《福布斯》杂志把这项技术评为“影响人类未来15件最重

首届快检技术及仪器学术讨论会报告精彩荟萃

  2014年10月16~17日,中国仪器仪表学会分析仪器分会快速检测技术及仪器专业委员会第一届学术研讨会在浙江嘉兴隆重召开,本次会议由中国仪器仪表学会分析仪器分会及快速检测技术及仪器专业委员会主办,首都科技条件平台检测与认证领域中心、浙江

实质等同性(转录组学)实验

实验材料:小麦  试剂、试剂盒:β-巯基乙醇                                   &nb

李金明:解读个体化医学检测与实验室自建试剂方法

  个体化医学检测目前国内既有经CFDA批准的商品试剂,也有实验室自建试剂方法 , 但实验室对LDTs 、性能验证和性能确认等概念通常比较模糊,如何去做性能验证和性能确认,以及在什么情况下做,性能验证的合格判决断标准等,也不清楚。本文就上述方面谈一点个人的理解和思考。  个体化医学(personal

常用生物软件(windows)全面介绍

常用生物软件(windows)全面介绍一、基因芯片1、基因芯片综合分析软件。 ArrayVision 7.0 一种功能强大的商业版基因芯片分析软件,不仅可以进行图像分析,还可以进行数据处理,方便protocol的管理功能强大,商业版正式版:6900美元。 Arraypro 4.0