ELISA的概念、原理、操作步骤

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。(一) 原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。(二) 操作步骤方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1. 包被:用0.05M ......阅读全文

人PKC-elisa检测试剂盒操作步骤

人PKC elisa检测试剂盒操作步骤:1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板置于37℃温育30分钟;4、将酶标板板取出

人血清铁(SI)ELISA试剂盒操作步骤

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人血清铁(SI)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血清铁(SI)水平。用纯化的人血清铁(SI)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清铁(SI),再与HRP标记的血清铁(SI)抗体结合,形成抗

elisa试剂盒操作步骤与注意事项

elisa试剂盒操作步骤1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四

羊布病(Brucellosis)ELISA试剂盒操作步骤

我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定羊血清,血浆及相关液体样本中羊布病(Brucellosis)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中羊布病(Brucellosis)水平。用纯化的羊布病

植物甘薯病毒(SPV)ELISA试剂盒操作步骤

我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测植物组织,细胞上清及相关液体样本中植物甘薯病毒(SPV)水平。实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中甘薯病毒(SPV)。用纯化的甘薯病

人脂多糖(LPS)ELISA试剂盒操作步骤

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人脂多糖(LPS)的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂多糖(LPS)水平。用纯化的人脂多糖(LPS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂多糖 (LPS),再与HRP标记的脂多糖(

小鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒操作步骤

我司ELISA试剂盒品质保证,质量优,价格实惠,是您生物实验的首选,如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠肌酐(Cr)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肌酐(Cr)水平。用纯化的小鼠肌酐(Cr)抗体包被微孔板,制

热解吸仪的原理及操作步骤

     热解吸仪广泛应用于大气污染、建筑工程室内空气污染、高纯气体、石油化工、食品等分析测试领域,是利用隋性气体流提取固体和液体介质中的挥发物,并通过加热的方法转移到分析系统,如气相色谱仪或色/质连用仪,将介质中的挥发物组分分析出来的装置,其主要操作步骤为:吸附-脱附-气相色谱分析。    利用物

熔点仪的工作原理和操作步骤

   工作原理    熔点仪是按照药典规定的熔点检测方法而设计的,该仪器利用电子技术实现温度程控,初熔和终熔数字显示。应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用电子线路实现了快速“起始温度”设定及四档可供选择的线性的升温速率。仪器采用药典规定的毛细管作为样品管,通过高倍率的放大镜观察毛细管内样品的熔化

糖度计的设计原理及操作步骤

  设计原理  光线从一种介质进入另一种介质时会产生折射现象,且入射角正弦之比恒为定值,此比值称为折光率。果蔬汁液中可溶性固形物含量与折光率在一定条件下(同一温度、压力)成正比例,故测定果蔬汁液的折光率,可求出果蔬汁液的浓度(含糖量的多少)。常用仪器是手持式折光仪,也称糖镜、手持式糖度计,通过测定果

熔点仪的工作原理和操作步骤

工作原理    熔点仪是按照药典规定的熔点检测方法而设计的,该仪器利用电子技术实现温度程控,初熔和终熔数字显示。应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用电子线路实现了快速“起始温度”设定及四档可供选择的线性的升温速率。仪器采用药典规定的毛细管作为样品管,通过高倍率的放大镜观察毛细管内样品的熔化过程,清

熔点仪的工作原理和操作步骤

  工作原理      熔点仪是按照药典规定的熔点检测方法而设计的,该仪器利用电子技术实现温度程控,初熔和终熔数字显示。应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用电子线路实现了快速“起始温度”设定及四档可供选择的线性的升温速率。仪器采用药典规定的毛细管作为样品管,通过高倍率的放大镜观察毛细管内样品的熔化

western-blotting的原理、操作步骤及意义

一。免疫印迹法    免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southen早先建立的检测核酸的印迹方法Southen blot相类似,亦被称为Wester

cDNA的合成实验原理和操作步骤

一、实验目的掌握植物cDNA合成的原理和方法二、实验原理反转录酶主要用于体外cDNA的合成。目前最常用的反转录酶(reverse transcriptase) 有SuperscriptII、M-MLV和AMV等。它们具有依赖于RNA或DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性,可以以RNA分子

引伸计的工作原理与操作步骤

引伸计是用来测量试件线伸缩变形的仪器。它一般由三个基本部分组成,即感受变形部分;传递和放大部分;显示部分。引伸计的种类很多,在拉力机上常有的有大变形引伸计(测试橡胶类产品)和小变形引伸计(金属引伸计)这两种。一、产品简介    引伸计是用来测量试件线伸缩变形的仪器。它一般由三个基本部分组成,即感受变

western-blotting的原理、操作步骤及意义

一。免疫印迹法    免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southen早先建立的检测核酸的印迹方法Southen blot相类似,亦被称为Wester

冷冻干燥的原理及操作步骤

冷冻干燥是指通过升华从冻结的生物产品中去除水分或其他溶剂的过程。升华指的是溶剂,比如水,象干冰一样,不经过液态,从固态直接变为气态的过程。冷冻干燥得到的产物称作冻干物(lyophilizer),该过程称作冻干(lyophilization)。 为什么要选择冷冻干燥?  传统的干燥会引起材料皱缩,破坏

质粒抽提的原理及操作步骤

质粒抽提方法即去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,去除蛋白质及其它杂质,以得到相对纯净的质粒。今天我们主要来了解一下质粒抽提原理和操作步骤。 ⒈质粒抽提原理 其中用到三种溶液以及硅酸纤维膜(超滤柱)。 溶液Ⅰ:50 mM葡萄糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA,pH 8

分子标记—AFLP原理和操作步骤

AFLP可用于:(1)构建遗传连锁图谱;(2)利用AFLP快速鉴别与目的基因紧密连锁的分子标记;(3)AFLP辅助的轮回选择育种;(4)研究基因表达与调控;(5)分类和进化研究;(6)甲基化研究等。实验方法原理AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行

热解吸仪原理及操作步骤

       热解吸仪广泛应用于大气污染、建筑工程室内空气污染、高纯气体、石油化工、食品等分析测试领域,是利用隋性气体流提取固体和液体介质中的挥发物,并通过加热的方法转移到分析系统,如气相色谱仪或色/质连用仪,将介质中的挥发物组分分析出来的装置,其主要操作步骤为:吸附-脱附-气相色谱分析。     

热解吸仪原理及操作步骤

热解吸仪广泛应用于大气污染、建筑工程室内空气污染、高纯气体、石油化工、食品等分析测试领域,是利用隋性气体流提取固体和液体介质中的挥发物,并通过加热的方法转移到分析系统,如气相色谱仪或色/质连用仪,将介质中的挥发物组分分析出来的装置,其主要操作步骤为:吸附-脱附-气相色谱分析。       利用物理(

分子标记—AFLP原理和操作步骤

            实验方法原理 AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺序和接头顺序就作为以后

分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺

固相萃取原理及操作步骤

  固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等2)离子交换作用:SAX,SCX,COOH、NH2等3)物理吸附:Florsil、Alumina等  pH值对固相萃取的影响  pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于

转膜实验原理与操作步骤

转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如 RFLP 分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的: 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理: 1.  转膜的方式: 向上的毛细管

双向电泳原理及操作步骤

实验概要本文介绍了双向电泳原理及操作步骤(第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳)。实验原理二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。通

分子标记——AFLP原理和操作步骤

一、原理AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的粘末端顺

Southern印迹技术原理和操作步骤

实验原理:Southern印迹是将DNA片断从电泳凝胶上直接转移至膜支持物(如硝酸纤维素膜、尼龙膜)上,使DNA片断固定的技术。先将DNA经限制性内切酶消化成一系列片段,进行琼脂糖凝胶电泳,各片段因分子量不同而彼此分开,然后经碱处理凝胶,使DNA的片段被变性、中和并通过毛细作用在高盐缓冲液中在原位将

96T-ELISA试剂盒的操作步骤@本生资讯

  96T elisa试剂盒的操作步骤   【ELISA试剂盒操作步骤】   1.   标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100   μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别   加到第

猪髓磷脂碱性蛋白-ELISA试剂盒操作步骤

猪髓磷脂碱性蛋白 ELISA试剂盒操作步骤: 1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液5